一種防治糖尿病的藥物組合物及其製備方法

2023-10-20 16:09:22 1

專利名稱：一種防治糖尿病的藥物組合物及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物組合物及其製備方法，特別是涉及一種防治糖尿病的藥物組合物及其製備方法。
背景技術：
糖尿病是一類由遺傳、環境、免疫等多病因引起的內分泌代謝紊亂疾病。其特點是慢性高血糖，伴隨因胰島素分泌及/或作用缺陷引起的糖、脂肪和蛋白質代謝紊亂。基本病理生理是絕對或相對性胰島素分泌不足及胰高糖素活性增高所引起的代謝紊亂。臨床出現多飲、多食、多尿、消瘦、疲勞等症狀，併發症廣泛而嚴重，常可引發心、腦血管、腎、眼底、視網膜及神經系統病變，嚴重時可發生酮症酸中毒，高滲性昏迷等併發症。
糖尿病為慢性終身性疾病，一旦發生，需終身服藥。糖尿病為常見病、多發病，年發病率為930/10萬，現今糖尿病有擴大化和年輕化的傾向，我國新患糖尿病人數每年以125萬，每天以3500人的速度遞增[1]，這個驚人的成長，使糖尿病正式擠入十大代表性國民病之列。糖尿病是現代疾病中的第二殺手，其對人體的危害僅次於癌症，造成嚴重的身心損害和社會負擔。因此，積極開展糖尿病的防治研究，已成為當今衛生工作的一項重要課題。糖尿病的治療目的是糾正糖代謝紊亂，促進胰島功能恢復，改善胰島素抵抗狀態，並及時防治各種併發症。西醫口服降糖藥療效肯定，但長期使用會出現抗體，導致繼發性失效，且具有不同程度的副作用，如低血糖、胃腸道不適等。胰島素療效確切，但需注射給藥，使用不便，且久用易產生抗體，使其生物活性降低，劑量增加則易產生高胰島素血症而加速各種慢性併發症的發生和發展。中醫藥文獻無「糖尿病」病名，根據糖尿病的臨床表現，如多尿、多食、多飲等「三多」症，與中醫學「消渴」病的臨床表現相一致。中醫治療糖尿病是以整體觀念、辨證論治為主，針對氣血盛衰、陰陽消長及氣機、痰瘀狀況，調整人體內環境，改善患者代謝狀況而達治療目的。中藥降血糖效果雖較西藥弱，但作用緩和而持久，能有效地改善症狀、降低血糖、防治併發症、控制病情發展且由於許多中藥具有雙向調節作用，一般不會引起低血糖等不良反應，有著西藥不可替代的優勢，日益受到國內外學者的重視。因此，充分繼承祖國醫學防治糖尿病的寶貴遺產，突出中醫特色，發揮其優勢，結合現代醫學對糖尿病的研究和中醫藥治療最新進展，開發出高效、無毒副作用的純天然藥物，具有十分重要的理論意義與臨床實用價值，將產生良好的經濟效益和社會效益。本發明目的在於提供一種防治糖尿病的藥物組合物及其製備方法。本發明目的在於提供一種質量控制方法。

發明內容
本發明目的是通過如下技術方案實現的，原料藥按重量比為黃芪400-800重量份葛根300-500重量份山藥300-500重量份蒼朮200-400重量份知母200-400重量份天花粉200-400重量份地黃300-500重量份馬齒莧200-400重量份 丹參200-400重量份鬼箭羽200-400重量份 桑枝200-400重量份上述原料藥可以製成任何臨床可接受的劑型，如片劑，膠囊，顆粒劑，口服液體製劑，皮下給藥製劑，栓劑等。
本發明藥物組合物的製備方法為取蒼朮、丹參二味用4-8倍量85-95％乙醇回流提取1-2小時，濾過，藥渣與葛根合併，用60-80％乙醇回流提取2-4次，每次4-7倍量，分別提取0.5-2小時，濾過，合併濾液，減壓回收乙醇，水液備用；取黃芪等八味藥加水煎煮2-3次，每次加8-12倍水，煎煮1-2小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度1.10~1.12/60℃，兌入上述醇提濃縮液，噴霧乾燥，製成臨床可接受的劑型，如片劑，膠囊，顆粒劑，口服液體製劑，皮下給藥製劑，栓劑等。
本發明顆粒劑的質量控制方法中包括鑑別和/或含量測定，鑑別包括如下方法中的一種或幾種
鑑別a.取本品粉末2g，加甲醇40ml超聲提取20-40分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水15ml使溶解，用乙醚分2-4次萃取，每次15-30ml，棄去乙醚液，取水層用水飽和正丁醇分2-4次萃取，每次15-30ml，合併正丁醇層用0.5-2％，氫氧化鈉溶液分2-3次洗滌，每次10-20ml，棄去鹼液，正丁醇用正丁醇飽和的水洗至中性，取正丁醇液，濃縮至幹，殘渣加水5ml使溶解，加於已處理好的D101大孔樹脂柱，分別用水40-60ml，30-50％乙醇20-40ml，60-80％乙醇40-60ml洗脫，收集60-80％乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗；吸取供試品溶液8μl，黃芪甲苷對照品4μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以11-14∶6-9∶1-2氯仿—甲醇—水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10硫酸乙醇溶液，100-110℃加熱5-8min，至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
b.取本品3g，加乙醇30ml，超聲提取20-40分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取蒼朮對照藥材2g，同法製成對照藥材溶液，照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液4μ1，對照藥材溶液2μl，分別點於同一矽膠G板上，以石油醚60-90℃為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。
c.取鑑別b項下供試品溶液作為供試品溶液，另取丹參對照藥材2g，加乙醇30ml，超聲提取20-40分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為對照藥材溶液。再取丹參酮IIA對照品，加醋酸乙酯製成每1ml含2mg的溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各4μ1，對照品溶液2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以16-19∶1-4苯—醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾乾。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。
d.取本品2g，用甲醇20ml超聲20-40分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水10 ml使溶解，再加鹽酸0.5～2ml，沸水浴回流1-2小時，回流液用氯仿分2-3次萃取，每次20ml。合併氯仿液，水浴蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取山藥對照藥材2g同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以7-9∶1-3苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開劑展開，取出，晾乾，噴以5-10％硫酸乙醇溶液，100-110℃加熱3-8min至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
e.取鑑別d項下供試品液作為供試品液，另取菝葜皂苷元對照品，加苯製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以7-9∶1-3苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開劑展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇液，100-110℃加熱5min至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定，色譜條件與系統適用性試驗，用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；19-17∶79-82∶1-2甲醇—水—冰醋酸為流動相，檢測波長為250nm。理論塔板數按葛根素峰計算應不低於4000；對照品溶液的製備，精密稱取葛根素對照品10mg，置25ml量瓶中，加30％乙醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加20-40％乙醇至刻度，搖勻，即得，每1ml含葛根素80μg；取本品顆粒研細，稱取1.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲提取30-50分鐘，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法，分別精密吸取對照品與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測定，即得；本品每1g含葛根素(C21H20O9)，不得少於0.85mg。
本發明藥物組合物(芪黃降糖顆粒)藥效學研究表明芪黃降糖顆粒具有滋陰清熱、益氣養陰、活血化瘀；適用於NIDDM糖尿病(氣陰兩虛兼血瘀證)。(1)芪黃降糖顆粒對ALX-DM家兔的血糖升高有明顯的降低作用，對ALX-DM家兔糖代謝有明顯的改善作用，可明顯的拮抗葡萄糖引起的血糖升高，並能明顯降低AUC血糖區線下面積。(2)芪黃降糖顆粒對STZ-DM大鼠的體重下降和血糖升高有明顯的降低作用，對STZ-DM大鼠糖代謝有明顯的改善作用，對葡萄糖引起的血糖升高有明顯的拮抗作用，並能明顯降低AUC血糖區線下面積。(3)芪黃降糖顆粒對STZ-DM大鼠的血脂代謝障礙有明顯的改善作用，表現在血CHO、TG水平的降低。(4)芪黃降糖顆粒對STZ-DM大鼠的血MDA水平有明顯的降低作用，表明本品有一定的抗氧化作用。(5)芪黃降糖顆粒對STZ所造成的胰島細胞損傷有一定的修復作用，表現在給糖負荷前、後血清胰島素水平明顯高於模型對照組，病理組織學檢查證實芪黃降糖顆粒對STZ所致大鼠胰島β-細胞損傷有一定的修復作用。(6)芪黃降糖顆粒對四氧嘧啶致糖尿病小鼠的體重、耐力下降有明顯的改善作用，並可顯著降低空腹血糖水平；動態血糖監測提示藥後21天降糖作用比較顯著(7)芪黃降糖顆粒對四氧嘧啶致糖尿病小鼠的耳廓微循環障礙有明顯的改善作用。(8)芪黃降糖顆粒對正常大鼠的血糖、血脂代謝亦沒有顯著的影響。
下述實驗例用於進一步說明本發明。
實驗例一、芪黃降糖顆粒對四氧嘧啶家兔糖代謝的影響取家兔30隻，穩定飼養一周，其間抽測空腹血糖兩次，以3.6-5.4mmol/L為入選動物標準。按文獻[1]方法給四氧嘧啶120mg/kg耳緣靜脈注射，造模後48-72h複測空腹血糖，以＞15.0mmol/L作為模型成功動物。
根據血糖升高幅度，隨機分為水對照組、藥物高、中、低劑量組，降糖靈組。分別按2.8g/kg、1.4g/kg、0.7g/kg、40mg/kg給藥，給藥體積為5.0ml/kg體重，對照組給等體積水灌胃，連續給藥15天，試驗前禁食6h，末次藥後12h，耳緣靜脈採血做口服葡萄糖耐量試驗[2](2.0g/kg葡萄糖灌胃)，並分別在口服葡萄糖0、30、60、120分鐘複測血糖水平，計算空腹及葡萄糖灌胃後60分鐘血糖區線下面積(Area Under Curve)。結果進行組間統計學處理，見表1、表2。
AUC＝0.5×30分×[空腹血糖+30分血糖+30分血糖+60分血糖值]表1對四氧嘧啶模型家兔空腹血糖(mmol/L)的影響(X±S，n＝6)組別試驗前血糖造模後血糖 給藥後血糖水組4.12±0.2319.45±1.6817.93±1.82高劑量組4.20±0.3218.47±2.269.35±1.34***中劑量組4.25±0.2919.57±2.0711.02±2.11***
低劑量組4.17±0.3118.38±2.2011.35±2.60***
降糖靈組4.25±0.3419.43±1.968.63±1.35***糖脈康組4.35±0.3419.52±2.2711.08±3.06***注與自身試驗前比較###示P＜0.001.
藥後與造模對照組比較*示P＜0.05，***示P＜0.001.
表1結果表明芪黃降糖顆粒對四氧嘧啶模型家兔的血糖升高有明顯的降低作用，高、中劑量組與模型對照組比較均有極顯著性差異，低劑量組與模型對照組比較均有顯著性差異；芪黃降糖顆粒對四氧嘧啶模型家兔糖代謝有明顯的改善作用，對葡萄糖引起的血糖升高有明顯的降低作用，高、中、低劑量組與模型對照組比較均有顯著性差異。
實驗例二、芪黃降糖顆粒的抗氧化作用——對STZ-DM大鼠血MDA含量的影響取大鼠70隻，穩定飼養一周，其間抽測空腹血糖兩次，以3.6-5.4mmol/L為入選動物標準。其中10隻大鼠作為正常對照組，另外60隻大鼠按文獻[3]方法以0.1mol/LpH4.5檸檬酸鈉-檸檬酸緩衝液，在冰域中新鮮配置10mg/ml的STZ溶液，每隻大鼠按50mg/kg靜脈注射，造模後7-10天複測空腹血糖，以＞13.8mmol/L作為模型成功大鼠。將STZ-DM大鼠60隻按血糖升高幅度隨機分為水對照組、藥物高、中、低劑量組，降糖靈組、糖脈康組。分別按3.24g/kg、1.62g/kg、0.81g/kg、0.009g/kg、1.35g/kg給藥，給藥體積為1.0ml/100g體重，對照組給等體積水灌胃，連續給藥20天；眶靜脈採血，按TCA-TBA法，于波長535nm檢測樣品吸收度A值，以反映血MDA水平，結果進行組間統計學處理，見表2表2.芪黃降糖顆粒對STZ—DM大鼠血MDA含量的影響(X±s，n＝10)組別 血MDA含量正常對照組0.071±0.023模型對照組0.148±0.024###高劑量組 0.112±0.027##**中劑量組 0.118±0.027####*低劑量組 0.124±0.022###*降糖靈組 0.121±0.033###糖脈康組 0.116±0.026###*表2結果表明MDA是組織過氧化過程中很重要的中間產物，芪黃降糖顆粒對STZ-DM大鼠的血MDA水平有明顯的降低作用，高、中、低劑量組與模型對照組比較均有顯著性差異。表明本品有一定的抗氧化作用。
實驗例三、芪黃降糖顆粒對STZ-DM大鼠胰島β-細胞功能的影響試驗動物分組、造模、給藥時間及劑量均同實驗例2，試驗前禁食8h，末次藥後12h，在做口服葡萄糖耐量試驗同時，分別在口服葡萄糖0、30、60、120分鐘，眼眶靜脈採血測胰島素水平。結果進行組間統計學處理，見表3。
表3.對STZ模型大鼠血清胰島素水平的影響(X±S，n＝8)組別 給葡萄糖後0分 給葡萄糖後30分 給葡萄糖後60分給葡萄糖後120分正常組 4.99±1.184.81±1.09 5.06∶0.593.26∶1.86模型組 1.49±0.93### 1.26±0.33 1.30∶0.40### 1.47∶0.51高劑量 3.19±2.02#* 3.75±1.33***2.93∶1.26###** 2.82∶0.71***中劑量 3.76±1.72** 3.03±1.79#* 2.06∶0.42###** 2.19∶0.72*低劑量 1.97±0.54### 2.07±0.37###***$$ 2.13∶1.01 ###* 1.69∶0.86#$
降糖靈 2.23±0.78### 3.51±1.83** 2.49∶0.85###** 2.78∶0.69***糖脈康 2.68±0.71###*2.83±1.53##*1.57∶0.76###$ 1.96∶0.60$
表3結果表明給糖負荷前模型對照組血胰島素水平明顯低於正常對照組，說明STZ對胰島β細胞造成一定損傷。藥物高、中劑量組胰島素水平明顯高於模型對照組，說明藥物對STZ造成的β細胞損傷有一定的修復作用。正常大鼠給糖負荷後30分鐘胰島素分泌增多，60分鐘出現胰島素分泌高峰，其後逐漸下降。藥物高、中劑量組在給糖負荷後30分鐘血清胰島素水平迅速升高，且明顯高於造模對照組，對於改善STZ-DM大鼠的糖代謝有一定的作用。
實施例1黃芪600g葛根400g 山藥400g蒼 術300g知母300g天花粉300g地黃400g馬齒莧300g丹參300g鬼箭羽300g桑枝300g以上十一味，取蒼朮、丹參二味用6倍量95％乙醇回流提取1小時，濾過，藥渣與葛根合併，用70％6乙醇回流提取三次，每次5倍量，分別提取2小時，1小時，0.5小時，濾過，合併濾液，減壓回收乙醇(60~70℃，-0.08Mpa)，水液備用；取黃芪等八味藥加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時，第二次加8倍水煎煮1.5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度1.10~1.12(60℃)，兌入上述醇提濃縮液，加入適量糊精(約150g)攪勻，噴霧乾燥(進風180~200℃，出風80~85℃)，乾粉加蛋白糖5g，並加糊精至1000g，幹壓製成顆粒，每袋裝5g，口服，一次1袋，一日3次。
實施例2本發明藥物組合物顆粒劑的質量控制方法鑑別a.取本品粉末2g，加甲醇40ml超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水15ml使溶解，30ml，30ml，15ml，15ml用乙醚分四次萃取，棄去乙醚液，30ml，30ml，15ml取水層用水飽和正丁醇分三次萃取，合併正丁醇層用1％氫氧化鈉分兩次洗滌，每次15ml，棄去鹼液，正丁醇用正丁醇飽和的水洗至中性，取正丁醇液，濃縮至幹，殘渣加水5ml使溶解，加於內徑1.5cm，高10cm已處理好的D101大孔樹脂柱，分別用水50ml，40％乙醇30ml，70％乙醇50ml洗脫，收集70％乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗；吸取供試品溶液8μl，黃芪甲苷對照品4μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以13∶7∶2氯仿—甲醇—水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱5min，至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
b.取本品3g，加乙醇30ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取蒼朮對照藥材2g，同法製成對照藥材溶液，照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液4μl，對照藥材溶液2μl，分別點於同一矽膠G板上，以60—90℃石油醚為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。
c.取鑑別b項下供試品溶液作為供試品溶液，另取丹參對照藥材2g，加乙醇30ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為對照藥材溶液。再取丹參酮IIA對照品，加醋酸乙酯製成每1ml含2mg的溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各4μl，對照品溶液2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以19∶1苯—醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾乾。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。
d.取本品2g，用甲醇20ml超聲30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水10ml使溶解，再加鹽酸1ml，沸水浴回流1小時，回流液用氯仿分兩次萃取，每次20ml。合併氯仿液，水浴蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取山藥對照藥材2g同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以9.1苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開劑展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱5min至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
e.取鑑別d項下供試品液作為供試品液，另取菝葜皂苷元對照品，加苯製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以9∶1苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開劑展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇液，105℃加熱5min至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定，色譜條件與系統適用性試驗，用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；19∶81∶1甲醇—水—冰醋酸為流動相，檢測波長為250nm。理論塔板數按葛根素峰計算應不低於4000；對照品溶液的製備，精密稱取葛根素對照品10mg，置25ml量瓶中，加30％乙醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加30％乙醇至刻度，搖勻，即得，每1ml含葛根素80μg；取本品顆粒研細，稱取1.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，250w，50kHz超聲提取40分鐘，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法，分別精密吸取對照品與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測定，即得；本品每1g含葛根素(C21H20O9)，不得少於0.85mg。
權利要求
1.一種治療糖尿病的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物是由如下原料藥製成的黃芪400-800重量份葛根300-500重量份山藥300-500重量份蒼朮200-400重量份知母200-400重量份天花粉200-400重量份地黃300-500重量份馬齒莧200-400重量份丹參200-400重量份鬼箭羽200-400重量份桑枝200-400重量份。
2.如權利要求1所述的一種治療糖尿病的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物是由如下原料藥製成的黃芪600重量份葛根400重量份山 藥400重量份蒼朮300重量份知母300重量份天花粉300重量份地黃400重量份齒莧300重量份丹參300重量份鬼箭羽300重量份 桑枝300重量份。
3.如權利要求1或2所述的一種治療糖尿病的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物原料藥可以製成任何臨床可接受的劑型，如片劑，膠囊，顆粒劑，口服液體製劑，皮下給藥製劑，栓劑。
4.如權利要求5所述的一種治療糖尿病的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物的製備方法為取蒼朮、丹參二味用4-8倍量85-95％乙醇回流提取1-2小時，濾過，藥渣與葛根合併，用60-80％乙醇回流提取2-4次，每次4-7倍量，分別提取0.5-2小時，濾過，合併濾液，減壓回收乙醇，水液備用；取黃芪等八味藥加水煎煮2-3次，每次加8-12倍水，煎煮1-2小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度1.10~1.12/60℃，兌入上述醇提濃縮液，噴霧乾燥，製成臨床可接受的劑型，如片劑，膠囊，顆粒劑，口服液體製劑，皮下給藥製劑，栓劑。
5.如權利要求4所述的一種治療糖尿病的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物的製備方法為取蒼朮、丹參二味用6倍量95％乙醇回流提取1小時，濾過，藥渣與葛根合併，用70％乙醇回流提取三次，每次5倍量，分別提取2小時，1小時，0.5小時，濾過，合併濾液，60~70℃，-0.08Mpa減壓回收乙醇，水液備用；取黃芪等八味藥加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時，第二次加8倍水煎煮1.5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度1.10~1.12/60℃，兌入上述醇提濃縮液，加入糊精攪勻，噴霧乾燥，進風180~200℃，出風80~85℃，乾粉加蛋白糖，並加糊精至1000重量份，幹壓製成顆粒。
6.如權利要求5所述顆粒劑的質量控制方法，其特徵在於該方法中包括鑑別和/或含量測定，其中鑑別包括如下方法中的一種或幾種鑑別a.取本品粉末2g，加甲醇40ml超聲提取20-40分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水15ml使溶解，用乙醚分2-4次萃取，每次15-30ml，棄去乙醚液，取水層用水飽和正丁醇分2-4次萃取，每次15-30ml，合併正丁醇層用0.5～2％氫氧化鈉溶液分2-3次洗滌，每次10-20ml，棄去鹼液，正丁醇用正丁醇飽和的水洗至中性，取正丁醇液，濃縮至幹，殘渣加水5ml使溶解，加於已處理好的D101大孔樹脂柱，分別用水40-60ml，30-50％乙醇20-40ml，60-80％乙醇40-60ml洗脫，收集60-80％乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗；吸取供試品溶液8μl，黃芪甲苷對照品4μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以11-14∶6-9∶1-2氯仿—甲醇—水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，100-110℃加熱5-8min，至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。b.取本品3g，加乙醇30ml，超聲提取20-40分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取蒼朮對照藥材2g，同法製成對照藥材溶液，照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液4μl，對照藥材溶液2μl，分別點於同一矽膠G板上，以60-90℃石油醚為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；c.取鑑別b項下供試品溶液作為供試品溶液，另取丹參對照藥材2g，加乙醇30ml，超聲提取20-40分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為對照藥材溶液。再取丹參酮IIA對照品，加醋酸乙酯製成每1ml含2mg的溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各4μl，對照品溶液2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以16-19∶1-4苯—醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾乾；供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；d.取本品2g，用甲醇20ml超聲20-40分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水10ml使溶解，再加鹽酸0.5～2ml，沸水浴回流1-2小時，回流液用氯仿分2-3次萃取，每次20ml。合併氯仿液，水浴蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取山藥對照藥材2g同法製成對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以7-9∶1-3苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開劑展開，取出，晾乾，噴以5-10％硫酸乙醇溶液，100-110℃加熱3-8min至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；e.取鑑別d項下供試品液作為供試品液，另取菝葜皂苷元對照品，加苯製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以7-9∶1-3苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開劑展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇液，100-110℃加熱5min至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定，色譜條件與系統適用性試驗，用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；19-17∶79-82∶1-2甲醇—水—冰醋酸為流動相，檢測波長為250nm；理論塔板數按葛根素峰計算應不低於4000；對照品溶液的製備，精密稱取葛根素對照品10mg，置25ml量瓶中，加30％乙醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加20-40％乙醇至刻度，搖勻，即得，每1ml含葛根素80μg；取本品顆粒研細，稱取1.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲提取30-50分鐘，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法，分別精密吸取對照品與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測定，即得；本品每1g含葛根素(C21H20O9)，不得少於0.85mg。
7.如權利要求6所述顆粒劑的質量控制方法，其特徵在於該方法為鑑別a.取本品粉末2g，加甲醇40ml超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水15ml使溶解，30ml，30ml，15ml，15ml用乙醚分四次萃取，棄去乙醚液，30ml，30ml，15ml取水層用水飽和正丁醇分三次萃取，合併正丁醇層用1％氫氧化鈉分兩次洗滌，每次15ml，棄去鹼液，正丁醇用正丁醇飽和的水洗至中性，取正丁醇液，濃縮至幹，殘渣加水5ml使溶解，加於內徑1.5cm，高10cm已處理好的D101大孔樹脂柱，分別用水50ml，40％乙醇30ml，70％乙醇50ml洗脫，收集70％乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每1ml含1mg的溶液作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗；吸取供試品溶液8μl，黃芪甲苷對照品4μl，分別點子同一矽膠G薄層板上，以13∶7∶2氯仿—甲醇—水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱5min，至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。b.取本品3g，加乙醇30ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取蒼朮對照藥材2g，同法製成對照藥材溶液，照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液4μl，對照藥材溶液2μl，分別點於同一矽膠G板上，以60-90℃石油醚為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。c.取鑑別b項下供試品溶液作為供試品溶液，另取丹參對照藥材2g，加乙醇30ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為對照藥材溶液。再取丹參酮IIA對照品，加醋酸乙酯製成每1ml含2mg的溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各4μl，對照品溶液2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以19∶1苯—醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾乾。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。d.取本品2g，用甲醇20ml超聲30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水10ml使溶解，再加鹽酸1ml，沸水浴回流1小時，回流液用氯仿分兩次萃取，每次20ml。合併氯仿液，水浴蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取山藥對照藥材2g同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以9∶1苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開劑展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱5min至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。e.取鑑別d項下供試品液作為供試品液，另取菝葜皂苷元對照品，加苯製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以9∶1苯—丙酮，氨蒸氣飽和，為展開劑展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇液，105℃加熱5min至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定，色譜條件與系統適用性試驗，用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；19∶81∶1甲醇—水—冰醋酸為流動相，檢測波長為250nm。理論塔板數按葛根素峰計算應不低於4000；對照品溶液的製備，精密稱取葛根素對照品10mg，置25ml量瓶中，加30％乙醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加30％乙醇至刻度，搖勻，即得，每1ml含葛根素80μg；取本品顆粒研細，稱取1.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，250w，50kHz超聲提取40分鐘，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法，分別精密吸取對照品與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測定，即得；本品每1g含葛根素(C21H20O9)，不得少於0.85mg。
10.如權利要求1或2所述的藥物組合物在製備治療糖尿病的藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種治療糖尿病的藥物組合物，該藥物組合物是由如下原料藥製成的黃芪400－800重量份，葛根300－500重量份，山藥300－500重量份，蒼朮200－400重量份，知母200－400重量份，天花粉200－400重量份，地黃300－500重量份，馬齒莧200－400重量份，丹參200－400重量份，鬼箭羽200－400重量份，桑枝200－400重量份；該藥物組合物治療糖尿病有很好的療效。
文檔編號A61P3/10GK1511576SQ0215946
公開日2004年7月14日 申請日期2002年12月31日 優先權日2002年12月31日
發明者張紅, 張 紅 申請人:中國中醫藥科技開發交流中心