柚木微繁方法
2023-05-02 06:08:06 1
專利名稱：柚木微繁方法
技術領域：
本發明屬於植物組織培養方法，特別是一種通過生物技術達到柚木良種快速繁殖和規模化生產的柚木微繁方法。
背景技術：
柚木(Tectona grandis L.)屬馬鞭草科柚木屬，為熱帶高大闊葉半落葉喬木。柚木材質堅韌、結構緻密、紋理美觀、耐腐抗蟲、加工性能優良，廣泛用於建造艦船、港口、橋梁、車廂、房屋、高級地板、家具、以及鑲貼板和貼面板等，是世界著名商品材，在國際上被譽為重要的熱帶硬木用材樹種之一。柚木是異花授粉樹種。
由於柚木的特性隨著地理種源的差異變化很大，具有豐富的遺傳多樣性，雖提供十分有利的可選擇性，為良種選育提供遺傳基礎，然而，我國至今廣為種植的幾乎全是由種子育成的實生苗。這類有性後代，其特性分離嚴重，林相不整齊，可用原木產量不高。
嚴重製約著我國柚木業的發展。雖引種百餘年，終未形成產業化推廣。世界上主要柚木種植國對實現柚木的良種化均十分重視，努力尋求良種克隆方法，隨著生物技術學科的發展，二十世紀八十年代在國內外相繼開展了柚木的組織培養研究，並已取得十分可喜的進展，但國內未形成規模化生產，國外也很少報導，未能滿足柚木大規模生產的需求。
發明內容
本發明旨在運用生物工程技術，在較短時期內快速大量繁殖良種種苗，建立優良個體的自根無性系，形成成套的柚木良種微繁方法。
發明的目的是通過以下方案實現的外殖體供體的選定——外殖體採集——外殖體消毒滅菌——初代(啟動)培養——繼代培養(增殖培養)——壯苗與煉苗——催根處理——試管苗移植(袋苗或盤苗——袋苗)——供大田生產定植。下面進一步祥述本發明1、選定外殖體供體植株，選取符合生產要求良種單株，採集枝芽作培養之用。
2、外殖體採集後帶回組培工廠，先用清水洗淨，無菌環境中用0.15～0.25％升汞消毒15～20分鐘，再用無菌水清洗乾淨備用。
3、初代培養(啟動誘芽培養)將消毒並清洗乾淨的外殖體(頂芽或帶有腋芽的莖段)接種於改良MS培養基為基本培養基，附加細胞分裂素6-BA(0.5～2mg/l)的培養基上進行培養，培養室溫度為25～28℃，自然散射光加日光燈輔助光照12～16小時，光強度2000±100Lux。
4、繼代增殖培養當初代培養獲得的無菌芽長6～7cm時，可以進入繼代增殖，將其分段切割，逐段轉入新鮮的增殖培養基中培養，每30天左右繼代轉接一次，繼代培養基為MS+6-BA(0.1～2mg/l)+KT(0～1mg/l)。
5、壯苗與煉苗當試管苗高達1.5～5cm，從培養室移至煉苗室，進行光溫煉苗，控制光照強度在5000～15000Lux。使試管苗健壯，苗高達到8cm左右時可供移栽。
6、催根處理煉苗20天左右，選取壯苗進行移栽前催根處理，催根劑採用由IBA、NAA、IAA等生長素組成的水劑或粉劑催根處理，濃度各為100～150ppm。水劑需先浸後移植，粉劑隨粘隨種。
7、試管苗移栽催根處理過的柚木無根試管苗移栽至黃心土和沙等的混合基質中栽培，可直接移栽於裝有基質的塑膠袋中成為袋裝苗；也可先用塑料盤裝基質移栽，等盤苗生根長高后再移入塑膠袋，移後加強管理，待苗高15～40cm時可提供大田生產定植。本發明的優點1、月增殖率由2～3倍提高到4倍，加大了增殖力度，達到快繁要求，實現大規模推廣種植的目標。
2、無根試管苗在高效催根粉劑作用下，直接移栽，省工省時，大規模移苗成活率達到98％以上。
本發明的技術達到低成本、低能耗、高工效、規模化生產的目的，具有實用價值與推廣價值，有著廣闊的應用前景。
具體實施例方式
1、從柚木林中選定速生、抗病、抗逆能力表現好的健康單株作為採集外植體母株。
2、採集有休眠芽的枝條，作為外植體。
3、用清水洗淨外植體，在超淨工作檯上，用0.2％的升汞溶液消毒(浸泡)10-20分鐘，要充分消毒。用無菌水清洗。
4、將消毒好的枝條(頂芽或分枝)分段接入誘芽培養基(MS+6BA2ppm)，在26±2℃的培養室中，光照2000Lux左右。
5、培養10天左右，萌出新芽，20-30天，枝芽長6-7cm時，進入繼代培養。
6、將上述枝芽切段，每段帶1-2對芽，接入繼代培養基(MS+6BA0.8ppm)一個月左右，再進行繼續轉接，直至夠量，進入壯苗、煉苗階段。
7、選高達1.5-5cm的試管苗，從培養室移至煉苗室在自然光下(5000-15000Lux)煉苗，使試管苗健壯，葉色青綠，莖幹挺拔。
8、煉苗20天左右，用濃度各為100ppm的IBA、NAA、IAA催根粉處理，隨粘隨種，種在裝有黃心土和沙等的混合基質的育苗袋中育苗，苗高15-40cm時可提供大田生產定植。
權利要求
1.一種柚木微繁方法，其特徵在於1)選定外殖體供體植株，選取符合生產要求良種單株，採集枝芽作培養之用，2)外殖體採集後帶回組培工廠，先用清水洗淨，無菌環境中用0.15～0.25％升汞消毒15～20分鐘，再用無菌水清洗乾淨備用，3)初代培養即啟動誘芽培養，將消毒並清洗乾淨的外殖體，即頂芽或帶有腋芽的莖段接種於改良MS培養基為基本培養基，附加細胞分裂素6-BA(0.5～2mg/l)的培養基上進行培養，培養室溫度為25～28℃，自然散射光加日光燈輔助光照12～16小時，光強度2000±100Lux，4)繼代增殖培養當初代培養獲得的無菌芽長6～7cm時，可以進入繼代增殖，將其分段切割，逐段轉入新鮮的增殖培養基中培養，每30天左右繼代轉接一次，繼代培養基為MS+6-BA(0.1～2mg/l)+KT(0～1mg/l)，5)壯苗與煉苗當試管苗高達1.5～5cm，從培養室移至煉苗室，進行光溫煉苗，控制光照強度在5000～15000Lux，使試管苗健壯，苗高達到8cm左右時可供移栽，6)催根處理煉苗20天左右，選取壯苗進行移栽前催根處理，催根劑採用由IBA、NAA、IAA等生長素組成的水劑或粉劑催根處理，濃度各為100～150ppm，水劑需先浸後移植，粉劑隨粘隨種，7)試管苗移栽催根處理過的柚木無根試管苗移栽至黃心土和沙等的混合基質中栽培，可直接移栽於裝有基質的塑膠袋中成為袋裝苗；也可先用塑料盤裝基質移栽，等盤苗生根長高后再移入塑膠袋，移後加強管理，待苗高15～40cm時可提供大田生產定植。
全文摘要
本發明屬於植物組織培養方法，特別是一種通過生物技術達到柚木良種快速繁殖和規模化生產的柚木微繁方法。本發明的目的是通過以下方案實現的外殖體供體的選定—外殖體採集—外殖體消毒滅菌—初代(啟動)培養—繼代培養(增殖培養)—壯苗與煉苗—催根處理—試管苗移植(袋苗或盤苗—袋苗)—供大田生產定植。本發明的優點1.月增殖率由2～3倍提高到4倍，加大了增殖力度，達到快繁要求，實現大規模推廣種植的目標。2.無根試管苗在高效催根粉劑作用下，直接移栽，省工省時，大規模移苗成活率達到98％以上。本發明的技術達到低成本、低能耗、高工效、規模化生產的目的，具有實用價值與推廣價值，有著廣闊的應用前景。
文檔編號A01H4/00GK1471812SQ0314937
公開日2004年2月4日 申請日期2003年6月25日 優先權日2003年6月25日
發明者樊雲芳, 曾憲松, 丁勤, 黃瑩, 賴齊賢 申請人:海南華翠棕櫚園有限公司