環丙氨嗪、三聚氰胺殘留二聯檢快速檢測試紙條及其製備方法
2023-05-21 14:37:31 2
專利名稱：環丙氨嗪、三聚氰胺殘留二聯檢快速檢測試紙條及其製備方法
技術領域：
本發明屬於食品藥物殘留免疫學快速檢測技術領域。具體涉及環丙氨嗪、三聚氰胺殘留二聯膠體金免疫層析快速檢測試紙條及其製備方法。
背景技術：
環丙氨嗪(cyromazine，CA)是一種高效的昆蟲生長調節劑。在養殖業中，它主要用做預混劑，通過飼料途徑殺滅蠅蛆。環丙氨嗪的主要功能就是控制動物廄舍內的蒼蠅、蠅蛆。環丙氨嗪作為預混劑拌入全價料中，通過飼餵方式進入動物體內，其絕大部分(約99 % ) 以原形及其代謝產物(三聚氰胺)的形式隨糞便排出體外並沉積在糞便中，從而在糞便中殺滅蠅蛆。環丙氨嗪急、慢性毒性均很低，而且無致畸、致癌、致突變作用，其主要代謝產物三聚氰胺毒性也特別低。環丙氨嗪在動物體內基本不被吸收。雞攝入環丙氨嗪後，有99. 1% 被排洩出體外。環丙氨嗪的殘留非常低。在雞體內，肝臟的殘留最高，為0.1 ppm，腎臟、肌肉、脂肪，包括雞蛋的殘留均低於0.05 ppm。在羊體內，肝臟、腎臟、肌肉、脂肪的最大殘留限制均低於0. 03 ppm。三聚氰胺(Melamine，ΜΑ)是一種三嗪類含氮雜環有機化合物，重要的氮雜環有機化工原料。由於其氮的含量很高，加之其生產工藝簡單、成本很低，被一些不法商人用作食品添加劑。2007年，美國爆發寵物食品受汙染事件，美國食品藥品管理局(FDA)查明參雜了低於6. 6%三聚氰胺的小麥蛋白粉是寵物食品導致中毒的原因。2008年9月，中國甘肅省有14名嬰兒患腎結石，導致嬰幼兒泌尿系統產生高度結石的罪魁禍首也是配方奶粉中添加了三聚氰胺。兩起事件發生後，世界各國和地方政府對於食品和飼料的三聚氰胺的檢測趨於高度重視。三聚氰胺是一種白色粉末狀物質，呈鹼性，ΡΗ8.0。與鹽酸、硫酸、草酸等都能形成三聚氰胺鹽。在中性或微鹼性情況下，與甲醛縮合而成羥甲基三聚氰胺，在微酸性中與羥甲基的衍生物進行縮聚反應而生成樹脂產物。遇強酸或強鹼水溶液水解，胺基逐步被羥基取代，先生成三聚氰酸二醯胺，進一步水解生成三聚氰酸一醯胺，最後生成三聚氰酸。 其結構式及化學反應關係式如下
權利要求
1.一種環丙氨嗪、三聚氰胺殘留二聯檢快速檢測試紙條，包括背板(2)、吸水墊(3)、硝酸纖維膜(4)、結合墊(7)、樣品墊(8)，其特徵在於所述背板(2)上依次連續粘附有吸水墊 (3)、硝酸纖維膜(4)、結合墊(7)和樣品墊(8)，所述樣品墊(8)靠結合墊(7)—端搭接在結合墊(7)上，所述吸水墊(3)上表面吸附有手控區封膜(1)，所述樣品墊(8)上表面吸附有樣品端封膜(9)，所述硝酸纖維膜(4)上包被有兔抗鼠的IgG質控線(5)和MA-BSA、CA-BSA 兩條檢測線(6)；結合墊(7)上包被有所述的抗MA藥物單克隆抗體-膠體金標記物和抗CA 藥物單克隆抗體-膠體金標記物。
2.—種權利要求1所述環丙氨嗪、三聚氰胺殘留二聯檢快速檢測試紙條的製備方法， 其特徵在於按如下步驟進行1)將半抗原MA、CA與牛血清白蛋白偶聯合成偶聯物MA-BSA、CA-BSA；2)將步驟1)合成的2種偶聯物免疫原免疫小鼠，通過細胞融合篩選得到分別抗MA單克隆細胞株、抗CA藥物單克隆細胞株，分別將得到單克隆細胞株注射小鼠腹腔，得到抗MA 藥物單抗、CA藥物單抗體；3)用檸檬酸三鈉與氯金酸反應製備膠體金；4)提取小鼠IgG免疫健康家兔，得到兔抗鼠IgG抗體；5)將步驟2)製成的分別抗MA、CA單克隆抗體加入步驟3)製備的膠體金中，得到抗MA 單克隆抗體-膠體金標記物、抗CA單克隆抗體-膠體金標記物；6)將抗MA單克隆抗體-膠體金標記物、抗CA單克隆抗體-膠體金標記物分別包被在結合墊上；7)將步驟1)合成MA-BSA、CA-BSA分別包被在硝酸纖維素膜(4)得到兩條檢測線(6)， 分別為T1、T2;8)將步驟4)兔抗鼠IgG包被在硝酸纖維素膜(4)得到質控線(5)；9)將手控區封膜(1)、吸水墊(3)、硝酸纖維素膜(4)結合墊(7)、樣品墊(8)和樣品端封膜(9 )依次粘貼在背板(2 )上。
全文摘要
本發明公開了環丙氨嗪、三聚氰胺殘留二聯檢快速檢測試紙條及其製備方法，硝酸纖維膜(4)上包被有兔抗鼠的IgG質控線(5)和MA-BSA、CA-BSA兩條檢測線(6)；結合墊(8)上包被有的抗MA藥物單克隆抗體-膠體金標記物、抗CA藥物單克隆抗體-膠體金標記物。本發明應用免疫學技術篩選出抗MA藥物單克隆抗體、抗CA藥物的單克隆抗體，通過膠體金的製備及膠體金標記條件的探索研究，在應用抗MA藥物單克隆抗體、抗CA藥物單克隆抗體和膠體金技術研究建立抗MA、CA藥物二聯檢測膠體金試紙條，並對其性能進行測定。試紙條檢測樣品範圍較寬，假陽性低，檢測靈敏、準確、可靠，適用於動物可食性組織如肌肉、肝臟和腎臟等組織及牛奶中CA、MA藥物殘留的二聯檢檢測。
文檔編號G01N33/577GK102297970SQ20111014002
公開日2011年12月28日 申請日期2011年5月27日 優先權日2011年5月27日
發明者樂濤, 魏啟明 申請人:重慶市科學技術研究院