鹽酸多西環素脂質體及其製備方法
2023-04-26 17:40:06 1
專利名稱：鹽酸多西環素脂質體及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種鹽酸多西環素脂質體及其製備方法。
背景技術：
鹽酸多西環素(doxycycline hydrochloride，鹽酸強力黴素)為四環素類抗生素。其可廣泛用於呼吸、泌尿及生殖系統和膽道感染，對皮膚軟組織感染、敗血症、痤瘡、布氏桿菌病、沙眼、淋病等也有一定療效，並能有效控制牙周袋的齦下菌斑，抑制牙周病致病菌。但目前的鹽酸多西環素原料藥對光、熱不穩定，不易儲存。而且目前鹽酸多西環素製劑主要有片劑和膠囊劑，由於鹽酸多西環素的水溶性較好製備成局部用藥製劑則對皮膚、黏膜的滲透性較差，局部藥物作用時間及抗菌效果均不理想。
將一些不穩定異氧化的藥物包封在脂質體中，藥物因受到脂質體雙層膜的保護，在很大程度上提高了藥物的穩定性。另外，脂質體作為藥物載體已越來越受到重視並得已廣泛應用。利用脂質體與生物細胞膜親合力強的特性，將抗生素包裹在脂質體內可提高抗菌效果。通過脂質體的類脂與角質層脂質相互作用，促進藥物的透過，並達到組織深部，由於透過量與黏膜中滯留量的增加，延緩了藥物的釋放，延長了藥物作用的時間。但具體藥物的局部作用時間和效果，與脂質體的製備方法，脂質體的組成成份等有關；而針對不同藥物活性成分，特別是針對鹽酸多西環素水溶性藥物，提高其脂質體的包封率，增加載藥量也是一難題。
發明內容
本發明要解決的技術問題就是上述課題，提供一種滲透能力強的鹽酸多西環素脂質體。
本發明的技術方案為一種鹽酸多西環素脂質體，其包括下列重量份的組分5-1000份磷脂、0.5-100份膽固醇、1-200份鹽酸多西環素和50-700份乳化劑。
在本發明一較佳實施例中，本發明鹽酸多西環素脂質體包括下列重量份的組分5-10份磷脂、0.5-2份膽固醇、1份鹽酸多西環素和0.5-100份乳化劑。
其中，所述的磷脂可以是卵磷脂(包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂)、腦磷脂等天然磷脂，以及二月桂醯磷脂醯膽鹼、二豆蔻醯磷脂醯膽鹼、二棕櫚醯磷脂醯膽鹼、二硬脂醯磷脂醯膽鹼、二油醯磷脂醯膽鹼、二豆蔻醯磷脂醯乙醇胺、二棕櫚醯磷脂醯乙醇胺、二棕櫚醯磷脂醯甘油、二豆蔻醯磷脂酸、二棕櫚醯磷脂酸、二棕櫚醯鞘磷脂、1-硬脂酸-2-棕櫚醯磷脂醯膽鹼和聚乙二醇-2-硬脂醯磷脂醯乙醇胺等合成磷脂中的一種或幾種，它們均具有兩條疏水鏈，在水中能自發的形成脂質雙分子層，而構成一個封閉的小室。本發明優選大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、二棕櫚醯磷脂醯膽鹼、磷脂酸(PA)與磷脂醯絲氨酸(PS)中的一種或幾種。
而膽固醇的使用，能影響膜的流動性、通透性進而影響膜的穩定性。
本發明所述的乳化劑主要是對脂質體混懸液的均勻性和穩定性有一定作用，並在使用逆向蒸發法時可以得到穩定的初乳。本發明優選泊洛沙姆或吐溫80。
上述磷脂、膽固醇、乳化劑與藥物的含量配比太小，則影響脂質體的穩定性、包封率和載藥量；反之，如磷脂、膽固醇、乳化劑的用量過多，則造成原料浪費且增加成本，其中乳化劑用量過多，還會增加毒性。
本發明的鹽酸多西環素脂質體還可以包括常規用量的相當於脂質體總重量約0.1％的水溶性抗氧化劑和約0.1％的脂溶性抗氧化劑，以防止其在常溫下儲存時被氧化。
所述的水溶性抗氧化劑可選用但不僅限於亞硫酸鹽，如亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉或硫代硫酸鈉等。
而所述的脂溶性抗氧化劑可選用但不僅限於維生素C棕櫚酸酯或維生素E。
本發明還提供上述鹽酸多西環素脂質體的製備方法，其可以採用常規的脂質體製備方法，諸如採用注入法、超聲分散法、逆相蒸發法或薄膜分散法等，具體方法可參照《藥物新技術與新技術》(陸彬主編.北京人民衛生出版社，2002.116)。
本發明的薄膜分散法具體包括如下步驟1)將磷脂和膽固醇溶於可揮發有機溶劑中，並在30-50℃下旋轉蒸發成膜；2)將乳化劑溶於pH為6.0-7.3的緩衝液中，再將鹽酸多西環素溶於該緩衝液；3)將步驟2)所得的溶液加入步驟1)製得的膜中，混合攪拌得鹽酸多西環素脂質體混懸液。
其中，步驟3)中可以採用渦旋混合，使瓶壁的薄膜完全脫落於緩衝液中形成混懸液；另外還可加以攪拌，如磁力攪拌，其時間視形成的混懸液的形態而定，一般不超過120分鐘。
本發明的注入法包括如下步驟1)將磷脂和膽固醇溶於可揮發有機溶劑中；2)將乳化劑溶於pH為6.0-7.3的緩衝液中，再將鹽酸多西環素溶於該緩衝液；3)將步驟1)所得的溶液在攪拌及30℃～50℃恆溫條件下，勻速滴加入步驟2)製得的溶液中，滴加完畢後繼續攪拌以揮盡有機溶劑，得到鹽酸多西環素脂質體混懸液。
而逆相蒸發法包括如下步驟1)將磷脂和膽固醇溶於可揮發有機溶劑中；2)將乳化劑溶於pH為6.0-7.3的緩衝液中，再將鹽酸多西環素溶於該緩衝液；3)將步驟2)所得的溶液加入到步驟1)所得的溶液中，進行超聲或使用高速剪切機使其形成初乳；4)將步驟3)得到的初乳減壓蒸發以除去有機溶劑而得到鹽酸多西環素脂質體混懸液。
本發明上述各種方法的步驟1)為常規方法，其中的可揮發有機溶劑可以是可揮發醇類，如甲醇、乙醇；滷代烴，如氯仿；以及乙醚等有機溶劑中的一種或幾種。步驟2)中的緩衝液採用常規的磷酸鹽緩衝液(PBS)。
如需加入抗氧劑，則在上述各種方法的步驟1)中還包括將佔脂質體總重量0.1％的脂溶性抗氧化劑與磷脂和膽固醇共溶於該有機溶劑中，以及在最後步驟中得到的鹽酸多西環素脂質體混懸液中加入佔脂質體總重量0.1％的水溶性抗氧化劑。
本發明的積極進步效果在於本發明的產品粒徑在80-500nm之間，使現有鹽酸多西環素對光和熱具有更佳的穩定性。而且本發明的脂質體，特別是通過薄膜分散法製備的產品具有較好的包封率；另外，本發明通過將藥物鹽酸多西環素包裹進具有特定組分(如膜材具有荷電性)的脂質體中，脂質體與生物膜具有更好的粘附性，藥物不易流失，使藥物在局部維持較高的濃度。通過將藥物鹽酸多西環素製備成脂質體可以提高鹽酸多西環素透過皮膚、黏膜的能力，並在局部保持較高濃度，從而有效地增強抗菌效果，並由於皮膚和黏膜中藥物滯留量的增加而延長了藥物的作用時間。
圖1為本發明鹽酸多西環素脂質體和對照鹽酸多西環素水溶液的累計透皮量比較圖。
具體實施例方式
實施例1
將500mg大豆卵磷脂，100mg膽固醇和11mg維生素C棕櫚酸酯共溶於乙醇中，於50℃的水浴中通過旋轉蒸發成膜；將300mg泊洛沙姆溶於pH6.0的PBS緩衝液10ml中，再將鹽酸多西環素100mg溶於該溶液中；將製得的溶液加入上述膜中，渦旋振蕩分散得脂質體混懸液；最後在脂質體中加入重量百分比為0.1％的亞硫酸氫鈉。
所得到的鹽酸多西環素脂質體的粒徑用Nicomp 380ZLS(美國ParticleSizing Systems)粒徑測定儀測得在200-300nm之間；將產品用超濾離心法測定包封率為60％。
實施例2將900mg蛋黃卵磷脂，90mg膽固醇和6.3mg的維生素E共溶於乙醇中，於30℃的水浴中通過旋轉蒸發成膜；將100mg泊洛沙姆溶於pH7.3的磷酸鹽緩衝液5ml中，將鹽酸多西環素180mg溶於該緩衝溶液中；再將製得的溶液加入上述膜中，渦旋混合後磁力攪拌勻化1小時，得脂質體混懸液；在脂質體中加入重量百分比為0.1％的亞硫酸鈉。
所得到的鹽酸多西環素脂質體粒徑在80-200nm之間；將產品應用超濾離心法測定包封率為70％。
實施例3將總共為5mg的大豆卵磷脂與合成磷脂醯絲氨酸(重量比20∶1)和0.5mg膽固醇、2.1mg的維生素E溶於氯仿中，於40℃的水浴中通過旋轉蒸發成膜；將100mg吐溫80溶於pH6.5的磷酸鹽緩衝液2ml中，再將鹽酸多西環素1mg溶於上述溶液中；將製得的溶液加入上述膜中，振蕩分散後攪拌勻化1小時，得脂質體混懸液；在脂質體中加入重量百分比為0.1％的硫代硫酸鈉。
所得到的鹽酸多西環素脂質體粒徑在100-300nm之間；將產品應用超濾離心法測得包封率為80％。
實施例4將總共為50mg的腦磷脂與磷脂酸(重量比15∶1)，10mg膽固醇、2.3mg維生素C棕櫚酸酯溶於乙醚中，於30℃的水浴中通過旋轉蒸發成膜；將200mg泊洛沙姆溶於pH7.2的磷酸鹽緩衝液2ml中，將鹽酸多西環素5mg溶於上述緩衝溶液中；將製得的溶液加入上述膜中，振蕩分散後攪拌勻化一個小時得脂質體混懸液。在脂質體中加入重量百分比為0.1％的焦亞硫酸鈉。
所得到的鹽酸多西環素脂質體粒徑在100-200nm之間；將產品應用超濾離心法測定包封率為68％。
實施例5將1000mg合成二棕櫚醯磷脂醯膽鹼(DPPC)，100mg膽固醇和16mg維生素E溶於乙醚中，於30℃的水浴中通過旋轉蒸發成膜；將700mg吐溫80溶於pH6.8的磷酸鹽緩衝液14ml中，將鹽酸多西環素200mg溶於上述緩衝溶液中；將製得的溶液加入上述膜中，渦旋混合後磁力攪拌勻化1小時得脂質體混懸液。在脂質體中加入重量百分比為0.1％的亞硫酸氫鈉。
所得到的鹽酸多西環素脂質體粒徑在200-300nm之間；將產品應用超濾離心法測定包封率為50％。
上述實施例採用的是薄膜分散法。
另外，本發明鹽酸多西環素脂質體可採用注入法製備。
實施例6取20mg鹽酸多西環素溶於含有250mg的泊洛沙姆的5ml磷酸緩衝溶液(pH＝7.3)中，把80mg大豆卵磷脂、10mg膽固醇和5.4mg的維生素E共溶於10ml乙醇中，將含有藥物的緩衝溶液置於容器中，在恆溫50℃並攪拌下，勻速滴加上述乙醇溶液，加完後繼續攪拌1小時(揮盡乙醇)，通過高壓乳勻機2次，得到脂質體混懸液，在此混懸液中加入重量百分比為0.1％的亞硫酸氫鈉。
所得到的鹽酸多西環素脂質體粒徑在300-500nm之間；將產品應用超濾離心法測定包封率為40％。
實施例7取1mg鹽酸多西環素溶於含有50mg的吐溫80的2ml磷酸緩衝溶液(pH＝7.3)中，把總共為4mg的蛋黃卵磷脂和磷脂酸(重量比18∶1)，以及0.5mg膽固醇共溶於10ml乙醚中，將含有藥物的緩衝溶液置於容器中，在恆溫30℃並攪拌下，勻速滴加上述乙醚溶液，加完後繼續攪拌0.5小時(揮盡乙醚)，得到脂質體混懸液。
所得到的鹽酸多西環素脂質體粒徑在300-500nm之間；將產品應用超濾離心法測定包封率為50％。
實施例8取200mg鹽酸多西環素溶於含有500mg的泊洛沙姆的10ml磷酸緩衝溶液(pH＝7.2)中，把總共為1000mg的大豆卵磷脂和磷脂醯絲氨酸(重量比15∶1)、100mg膽固醇和11.8mg的維生素C棕櫚酸酯共溶於10ml甲醇中，將含有藥物的緩衝溶液置於容器中，在恆溫50℃並攪拌下，勻速滴加上述甲醇溶液，加完後繼續攪拌1.5小時(揮盡甲醇)，得到脂質體混懸液，在此混懸液中加入重量百分比為0.1％的亞硫酸氫鈉。
所得到的鹽酸多西環素脂質體粒徑在200-500nm之間；將產品應用超濾離心法測定包封率為55％。
實施例9取100mg鹽酸多西環素溶於含有250mg的吐溫80的8ml磷酸緩衝溶液(pH＝7.0)中，把總共為800mg的合成磷脂(二棕櫚醯鞘磷脂)和磷脂酸(重量比20∶1)、80mg膽固醇和9.2mg的維生素C棕櫚酸酯共溶於15ml氯仿中，將含有藥物的緩衝溶液置於容器中，在恆溫60℃並攪拌下，勻速滴加上述氯仿溶液，加完後繼續攪拌(揮盡氯仿)，得到脂質體混懸液，在此混懸液中加入重量百分比為0.1％的亞硫酸氫鈉。
所得到的鹽酸多西環素脂質體粒徑在100-500nm之間；將產品應用超濾離心法測定包封率為60％。
另外，本發明鹽酸多西環素脂質體可採用逆相蒸發法製備。
實施例10取100mg蛋黃卵磷脂和8mg膽固醇以及5.4mg維生素E共溶於5ml乙醇中，將10mg的鹽酸多西環素溶於250mg泊洛沙姆的5ml磷酸緩衝溶液(pH＝7.0)中，將含有鹽酸多西環素的溶液加入到乙醇溶液中，進行超聲使形成初乳，初乳經減壓蒸發以除去乙醇而得到水性混懸液，此脂質體混懸液中加入脂質體總重量0.1％的亞硫酸氫鈉。
所得到的鹽酸多西環素脂質體粒徑在100-400nm之間；將產品應用超濾離心法測定包封率為60％。
實施例11取總共為1000mg的二棕櫚醯磷脂醯膽鹼、磷脂酸和磷脂醯絲氨酸的混合物(摩爾比12∶1∶1)，以及100mg膽固醇和14.3mg維生素E共溶於12ml乙醚中，將200mg的鹽酸多西環素溶於500mg泊洛沙姆的12.5ml磷酸緩衝溶液(pH＝6.8)中，將含有鹽酸多西環素的溶液加入到乙醚溶液中，用高速剪切機剪切使形成初乳，初乳經減壓蒸發以除去乙醚而得到水性混懸液，此脂質體混懸液中加入佔脂質體總重量0.1％的亞硫酸鈉。
所得到的鹽酸多西環素脂質體粒徑在200-400nm之間；將產品應用超濾離心分離脂質體和未包封的游離藥物，測得包封率為60％。
實施例12取10mg二硬脂醯磷脂醯膽鹼和1mg膽固醇共溶於1ml氯仿中，將2mg的鹽酸多西環素溶於50mg吐溫80的1ml磷酸緩衝溶液(pH＝7.3)中，將含有鹽酸多西環素的溶液加入到氯仿溶液中，混合溶液進行高速剪切使形成初乳，初乳經減壓蒸發以除去氯仿而得到水性混懸液，此脂質體混懸液中加入脂質體總重量0.1％的焦亞硫酸鈉。
所得到的鹽酸多西環素脂質體粒徑在100-400nm之間；將產品應用超濾離心法測定包封率為40％。
為更利於保存和運輸，上述實施例得到的脂質體混懸液還可經常規的噴霧乾燥或冷凍乾燥等工藝，進一步得到其粉劑。
上述實施例中的各種磷脂為上海太偉藥業有限公司生產、膽固醇為上海源聚生物科技有限公司產品、鹽酸多西環素為揚州華曙威斯曼製藥有限公司生產、泊洛沙姆和吐溫80為南京威爾化工有限公司生產；磷酸鹽緩衝液按中國藥典自配；餘試劑均為常規市售產品。
效果實施例1 熱穩定性將同濃度(16.7mg/ml)同體積(100ml)的本發明鹽酸多西環素脂質體混懸液和現有的鹽酸多西環素水溶液加入到無色透明容量瓶中，並放置在25℃環境下，24小時後用高效液相色譜法分別測定各溶液濃度。結果顯示鹽酸多西環素脂質體混懸液中的鹽酸多西環素的含量為14.2mg/ml，鹽酸多西環素水溶液中的鹽酸多西環素的含量為8.9mg/ml。
效果實施例2 光穩定性將同濃度(16.7mg/ml)同體積(100ml)的本發明鹽酸多西環素脂質體混懸液和現有的鹽酸多西環素水溶液加入到無色透明容量瓶中，開口放置在光照強度為4000Lx的環境下，24小時後用高效液相色譜法分別測定各溶液濃度。結果顯示鹽酸多西環素脂質體混懸液中的鹽酸多西環素的含量為12.3mg/ml，鹽酸多西環素水溶液中的鹽酸多西環素的含量為6.6mg/ml。
上述效果實施例的結果表明鹽酸多西環素被脂質體包封后，可以有效地提高藥物對光和熱的穩定性。
效果實施例3 體外透皮實驗採用TK-12A型藥物透皮擴散實驗儀(上海鍇凱科技貿易有限公司生產)，考察2％(2g/100ml)鹽酸多西環素脂質體(實施例8製得)和2％(2g/100ml)鹽酸多西環素水溶液對離體鼠皮的透皮作用和體外釋放規律。具體方法將製得的新鮮皮膚置於擴散池的接合部(表皮層面向供給池，真皮層面向接受池)，剪去多餘的皮膚。接受池容積6.5ml，內盛接受液，有效擴散面積為2.8cm2。將皮膚置於擴散池上後，分別將含相同體積的脂質體和藥物的水溶液置於表皮上，夾緊兩池口密封，排盡氣泡。開啟磁力攪拌(200rpm)，系統保持恆溫(32±0.2)℃。在0、0.5、1、1.5、2、4、6、10、14、24h(小時)分別將接受池內液體取出，再加入相同體積的接受液。應用高效液相色譜法測定接受液中鹽酸多西環素的量，結果表明鹽酸多西環素脂質體的透過率明顯加快，24小時累計透皮百分率是普通水溶液的1.4倍(n＝3)(結果見圖1)。透皮實驗進行24h後，將皮取下，用生理鹽水洗去表面的脂質體，重新固定，更換接受液，於7h後取樣，測定接受液中藥物的濃度。洗去脂質體皮膚接收液中含鹽酸多西環素的量平均為70ug(n＝3)，洗去水溶液皮膚接收液中含鹽酸多西環素的量平均為25ug(n＝3)，結果表明24h透皮實驗結束後鹽酸多西環素脂質體存留於皮膚中的藥物濃度高於鹽酸多西環素水溶液。由此表明了鹽酸多西環素脂質體具有良好的經皮滲透速率，並有延長藥物作用時間的效果。
效果實施例4 牙周炎臨床試驗將本發明實施例2的鹽酸多西環素脂質體與卡泊姆(carbopol)凝膠基質(市售carbopol 934P與水以重量比1∶6溶脹，加入三乙胺調節基質pH為9左右)以重量比為7∶3的混合成凝膠劑。取該凝膠劑與臺氏液用於治療患者口腔牙周炎。選取牙周炎患者30例，男性13例，女性17例，年齡24～66歲，每個患者的檢測牙位在口內2個不同象限，隨機分為實驗組患牙和對照組患牙。病人均採用自身對照方法，經齦上潔治，齦下刮治，根面平整後二周，牙周袋用生理鹽水衝洗後，試驗組患牙用鹽酸多西環素脂質體凝膠劑注滿牙周袋，至溢出為止。對照組患牙隔溼後，用探針蘸取臺氏液置予牙周袋內。7d就診一次，4次為一個療程，停藥一周後再複查一次。
觀察指標觀察用藥前後各項牙周指數的變化，包括牙齦指數(GI)、菌斑指數(PLI)、齦溝出血指數(SBI)、牙周袋深度(PD)、附著水平(AL)、牙齒鬆動度(MD)。細菌學檢查，用暗視野顯微鏡法評價按Mous分類法，將齦下微生物分為以下4類球菌(C)、能動菌(M)、螺旋體(S)和其它菌(O)。於暗視野顯微鏡下放大1000倍，隨機選擇三個視野，按上述4類分類計數細菌後相加統計下降百分率。
療效判斷標準痊癒臨床症狀完全消失，GI、PLI、SBI、MD恢復正常；顯效臨床症狀明顯減輕，GI、PLI、SBI比治療前明顯改善1/2以上，牙周袋變淺(≥1mm)，牙齒鬆動度減小(≤1)。好轉臨床症狀減輕，各項牙周指數下降。無效症狀及各項牙周指數均無改善。有效率(％)＝(痊癒人數+顯效人數)/受檢人數×100％。結果詳見下表1～3。
表1 用藥前、後試驗組與對照組患牙各項牙周指數的比較
* p＜0.05vs對照組表2 用藥後試驗組與對照組患牙療效比較
注試驗組有效率為82％，對照組有效率為26.5％，兩者間有顯著性差異(p＜0.01)。
牙周炎病人的試驗組與對照組患牙各項牙周指數PLI、GI、SBI、PD、AL經統計學秩和檢驗，在用藥前顯示兩組無顯著性差異(P＞0.05)。用藥4周及停藥1周後兩組有顯著性差異(P＜0.05)，但MD停藥1周後試驗組與對照組患牙無顯著性差異(P＞0.05)，說明牙周炎病人的患牙在牙周袋內局部使用多西環素脂質體凝膠後對牙齒鬆動度無改善。兩組療效比較用卡方檢驗，試驗組與對照組比較有顯著性差異(P＜0.01)。
表3 兩組微生物組成變化的比較(x±SD)
結果表明治療前後比較發現用藥組與對照組的球菌、能動菌及螺旋體的百分比在治療前後有顯著性改變，變化趨勢為球菌比例上升，能動菌、螺旋體比例下降，統計學上有顯著性差異。桿菌的百分比在治療前後無顯著性變化。組間比較發現治療前，兩組的微生物組成均無顯著性差異。治療後，兩組的螺旋體百分比統計學上有高度顯著性差異，而兩組球菌、桿菌及能動菌的百分比無顯著性差異。
經體內外實驗表明，本發明的將鹽酸多西環素製備成脂質體促進了藥物活性成分鹽酸多西環素透過黏膜，到達更深的組織，且作用時間較長，故當本發明的鹽酸多西環素脂質體製成外用製劑，在皮膚、黏膜等局部用藥時，較現有製劑具有更佳的抗菌效果。
權利要求
1.一種鹽酸多西環素脂質體，其包括下列重量份的組分5-1000份磷脂、0.5-100份膽固醇、1-200份鹽酸多西環素和50-700份乳化劑。
2.根據權利要求1所述的鹽酸多西環素脂質體，其特徵在於其包括下列重量份的組分5-10份磷脂、0.5-2份膽固醇、1份鹽酸多西環素和0.5-100份乳化劑。
3.根據權利要求1或2所述的鹽酸多西環素脂質體，其特徵在於其還包括各佔脂質體總重量0.1％的水溶性抗氧化劑和脂溶性抗氧化劑。
4.根據權利要求3任一項所述的鹽酸多西環素脂質體，其特徵在於所述的水溶性抗氧化劑選自亞硫酸鹽，所述的脂溶性抗氧化劑是維生素C棕櫚酸酯或維生素E。
5.根據權利要求1或2所述的鹽酸多西環素脂質體，其特徵在於所述的磷脂選自大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、腦磷脂、二棕櫚醯磷脂醯膽鹼、磷脂酸與磷脂醯絲氨酸中的一種或幾種，所述的乳化劑是泊洛沙姆或吐溫80。
6.一種權利要求1或2所述的鹽酸多西環素脂質體的製備方法，其特徵在於採用薄膜分散法，該薄膜分散法包括如下步驟1)將磷脂和膽固醇溶於可揮發有機溶劑中，並在30-50℃下旋轉蒸發成膜；2)將乳化劑溶於pH為6.0-7.3的緩衝液中，再將鹽酸多西環素溶於該緩衝液；3)將步驟2)所得的溶液加入步驟1)製得的膜中，混合攪拌得鹽酸多西環素脂質體混懸液。
7.根據權利要求6所述的鹽酸多西環素脂質體的製備方法，其特徵在於在步驟1)中還包括將佔脂質體總重量0.1％的脂溶性抗氧化劑與磷脂和膽固醇共溶於該有機溶劑中，以及在步驟3)得到的鹽酸多西環素脂質體混懸液中加入佔脂質體總重量0.1％的水溶性抗氧化劑。
8.根據權利要求7所述的鹽酸多西環素脂質體的製備方法，其特徵在於所述的水溶性抗氧化劑選自亞硫酸鹽，所述的脂溶性抗氧化劑是維生素C棕櫚酸酯或維生素E。
9.一種權利要求1或2所述的鹽酸多西環素脂質體的製備方法，其特徵在於採用注入法，該注入法包括如下步驟1)將磷脂和膽固醇溶於可揮發有機溶劑中；2)將乳化劑溶於pH為6.0-7.3的緩衝液中，再將鹽酸多西環素溶於該緩衝液；3)將步驟1)所得的溶液在低速攪拌及30℃～50℃恆溫條件下，勻速滴加入步驟2)製得的溶液中，滴加完畢後繼續攪拌以揮盡有機溶劑，得到鹽酸多西環素脂質體混懸液。
10.一種權利要求1或2所述的鹽酸多西環素脂質體的製備方法，其特徵在於採用逆相蒸發法，該逆相蒸發法包括如下步驟1)將磷脂和膽固醇溶於可揮發有機溶劑中；2)將乳化劑溶於pH為6.0-7.3的緩衝液中，再將鹽酸多西環素溶於該緩衝液；3)將步驟2)所得的溶液加入到步驟1)所得的溶液中，進行超聲或使用高速剪切機使其形成初乳；4)將步驟3)得到的初乳減壓蒸發以除去有機溶劑而得到鹽酸多西環素脂質體混懸液。
全文摘要
本發明公開了一種鹽酸多西環素脂質體及其製備方法，該鹽酸多西環素脂質體包括下列重量份的組分5－1000份磷脂、0.5－100份膽固醇、1－200份鹽酸多西環素和50－700份乳化劑。其製備方法可以採用薄膜分散法、注入法或逆相蒸發法。本發明的產品對光、熱穩定性高，可有效延長藥物的作用時間，提高藥物局部透過皮膚、黏膜的能力，從而提高藥物的抗菌效果。
文檔編號A61P31/00GK1853640SQ200610059088
公開日2006年11月1日 申請日期2006年3月1日 優先權日2005年3月2日
發明者蘆潔, 金鴻萊, 胡純貞, 奉建芳, 肖忠革 申請人:上海醫藥工業研究院, 上海交通大學醫學院附屬第九人民醫院