一種冬凌草甲素靜脈乳及其製備方法

2023-05-18 10:03:56 1

專利名稱：一種冬凌草甲素靜脈乳及其製備方法
技術領域：
本發明涉及醫藥領域，具體涉及一種冬凌草甲素靜脈乳及其製備方法。
背景技術：
冬凌草甲素(Oridonin)是從唇形科(Labtea)香茶屬(i a^fos/")植物中分離出的一種 以貝殼杉烯為骨架的四環二萜類化合物。該成分具有較強的抗腫瘤活性，對多種腫瘤均具有 明顯的抑制作用。體外試驗表明，冬凌草甲素對多種腫瘤細胞如人體肝癌BEL7402、艾氏 腹水癌ECA、肉瘤S180、白血病Lmo、人白血病HL-60、 K562、 NB4、人體食道鱗癌細胞 株CAES-17、胃腺癌MGc80-3、鼻咽癌CNE、肺腺癌SPC-A-1、肺鱗癌LTEP-78、人子宮頸 癌HeLa細胞、人黑色素瘤A375-S2細胞等都有不同程度的抗腫瘤作用。臨床上用於實體瘤 如食道癌、胃癌、原發性肝癌的治療。此外，臨床研究證明冬凌草甲素對胰腺癌、賁門癌、 大腸癌、膀胱癌、乳腺癌也都有明顯療效。
冬凌草甲素為白色稜柱狀結晶，不溶於水，油溶性差，可溶於乙醇、乙醚、甲醇、乙酸 乙酯等有機溶劑。由於其水不溶、油不溶的特點，限制了製劑的開發的腳步。
冬凌草甲素注射液的抗癌臨床療效雖然高於口服製劑，但安全問題限制了其應用。為增 加冬凌草甲素的溶解能力，通常向注射液中添加非水性溶劑(如丙二醇)和表面活性劑(如 吐溫80)。長期靜脈滴注可引起血管發炎、疼痛等不良反應。臨床上為減小給藥時造成的刺 激性，給藥前需將注射液用5 10X葡萄糖溶液500ml進行稀釋。並緩慢滴注，延長了給藥 時間，降低了順應性。
納米混懸液是一種解決難溶性藥物給藥困難、提高其生物利用度的新型製劑。將藥物通 過沉澱或物理粉碎的方法製成納米級粒子，可加快藥物在胃腸道的溶解速度，促進吸收；控 制粒徑大小則可以達到直接靜脈給藥的目的。由於納米混懸液粒子是單純的藥物粒，避免了 載體給藥系統載藥量不高或載體本身引起的毒副作用等問題。但目前納米混懸液技術仍不成 熟，通常粒徑大小在200nm 2nm之間，添加的抑晶劑不被靜脈注射接受，高溫滅菌後存在 粒長大的現象。以上這些缺點均限制了納米混懸液在靜脈給藥途徑中的應用。

發明內容
本發明主要的目的在於克服現有技術的不足，提供一種載藥量大、副作用小、給藥方便、 適於工業生產的冬凌草甲素靜脈乳製劑。本發明的另 一 目的是提供該上述冬凌草甲素靜脈乳的製備方法。
本發明提供一種冬凌草甲素靜脈乳注射劑，該乳劑屬於水包油包固(s/o/w)型復乳， 由冬凌草甲素和藥學上可接受載體組成。所述藥學可接受的載體選自注射用溶劑、注射用油、 乳化劑、等滲調節劑、抗氧化劑、pH調節劑。
本發明所述冬陵草甲素靜脈乳注射劑，由下列重量/體積百分比(w/V)的組分製成
冬凌草甲素 0.01-5%
注射用油 5-40%
乳化劑 0.1-20%
助乳化劑 0.1-2%
等滲調節劑 0.01-15%
抗氧化劑 0.005-0.5%
非水性溶劑 0.1-20%
注射用溶劑和pH調節劑餘量加至100ml。
需要說明的是上述各組分除注射用溶劑和pH調節劑外，其餘均為重量單位，如克(g) 或千克(kg)等；製備得到的乳劑為體積單位，如ml或L等。所述重量/體積百分比(w/v)
的具體計算方式為將加入組分的重量除以成品乳劑的體積即得到相應組分的重量/體積百分 比(w/v)。例如，上述處方中，0.01-5g冬凌草甲素除以lOml為0.01-5% (w/v)。其中重量 /體積百分比的單位為ml/g或lVkg等。可以看出，前者分子和分母同時擴大IOO倍即為後 者，其比例值不會發生變化。
所述乳劑中，注射用油選自辛癸酸甘油酯、大豆油、紅花籽油、玉米油、橄欖油、注射 用薏苡仁油的一種或幾種；所述乳化劑選自注射用大豆磷脂、蛋黃磷脂中的一種或幾種；所 述的等滲調節劑選自甘油、山梨醇、木糖醇、葡萄糖、氯化鈉中的一種或幾種；所述抗氧化 劑選自乙二胺四乙酸二鈉、巰基乙酸、生育酚中的一種；所述的pH調節劑選&氫氧化鈉溶 液、鹽酸、醋酸及其鹽中的一種，優選濃度為0.001-5M的氫氧化鈉溶液或者濃度為0.001-5M 的鹽酸溶液，調節pH值為4.5-9.5;所述注射用溶劑為水。所述輔助乳化劑是指乳化能力一 般很弱或無乳化能力，但與乳化劑混合使用可以增加乳化劑的粘度，並能增強乳化膜的強度， 防止乳滴合併，從而增加乳劑穩定性的物質。本發明乳劑採用的輔助乳化劑為泊洛沙姆188
(F68)、甘油單油酸酯、油酸；所述非水性溶劑為乙醇、乙醚、甲醇、乙酸乙酯等低沸點、 冬凌草甲素溶解度高的有機溶劑，優選為乙醇，根據對注射用有機溶劑的限量要求，除去有 機溶劑。優選地，本發明所述冬凌草甲素靜脈乳注射劑，由下列重量/體積百分比(w/v)的組分 製成
冬凌草甲素 0.01-2% 注射用油 5-20% 乳化劑 0.5-10% 助乳化劑 0.1-2% 等滲調節劑 0.1-15% 抗氧化劑 0.005-0.5% 非水性溶劑 0.5-10% 注射用溶劑和pH調節劑餘量加至100ml。
需要說明的是上述各組分除注射用溶劑和pH調節劑外，其餘均為重量單位，如克(g) 或千克(kg)等；製備得到的乳劑為體積單位，如ml或L等。所述重量/體積百分比(w/V) 的具體計算方式為將加入組分的重量除以成品乳劑的體積即得到相應組分的重量/體積百分 比(w/v)。例如，上述處方中，0.01-2g冬凌草甲素除以100ml為0.01-2% (w/v)。其中重量 /體積百分比的單位為ml/g或L/kg等。可以看出，前者分子和分母同時擴大l倍即為後 者，其比例值不會發生變化。
所述乳劑中，注射用油選自辛癸酸甘油酯、大豆油、紅花籽油、玉米油、橄欖油、注射 用薏苡仁油的一種或幾種；所述乳化劑選自注射用大豆磷脂、蛋黃磷脂中的一種或幾種；所 述的等滲調節劑選自甘油、山梨醇、木糖醇、葡萄糖、氯化鈉中的一種或幾種；所述抗氧化 劑選自乙二胺四乙酸二鈉、巰基乙酸、生育酚中的一種；所述的pH調節劑選自氫氧化鈉溶 液、鹽酸、醋酸及其鹽中的一種，優選濃度為0.001-5M的氫氧化鈉溶液或者濃度為0.001-5M 的鹽酸溶液，調節pH值為4.5-9.5;所述注射用溶劑為水。所述輔助乳化劑是指乳化能力一 般很弱或無乳化能力，但與乳化劑混合使用可以增加乳化劑的粘度，並能增強乳化膜的強度， 防止乳滴合併，從而增加乳劑穩定性的物質。本發明乳劑採用的輔助乳化劑為泊洛沙姆188 (F68)、甘油單油酸酯、油酸；所述非水性溶劑為乙醇、乙醚、甲醇、乙酸乙酯等低沸點、 冬凌草甲素溶解度高的有機溶劑，優選為Zi醇，根據對注射用有機溶劑的限量要求，除去有 機溶劑。
本發明所述冬凌草甲素可以通過現有技術製備也可以市售獲得。
本發明的注射劑為白色或類白色乳狀液體，有乳光，載藥量為0.01-5% ，平均粒徑為100 500nm， pH為6.0~9.0。本發明提供了一種冬凌草甲素靜脈乳注射劑的製備方法。 方法一，包括如下步驟
1. 按照下述重量/體積百分比取組分冬凌草甲素0.01-5%、注射用油5-40%、乳化劑
0.1-20%、助乳化劑0.1-2%、等滲調節劑0.01-15%、抗氧化劑0.005-0.5%、非水性溶劑
0. 1.20%;
2. 將冬凌草甲素與乳化劑及抗氧化劑用非水性溶劑充分溶解，將上述有機相加入注射用 油中，形成油相；向稍少於處方量的注射用水中加入處方量等滲調節劑，攪拌混勻，得 水相；
3. 油相、水相加熱混合，攪拌乳化或剪切乳化2-300分鐘，得初乳
4. 將初乳進一步乳化，加入pH調節劑調pH，注射用水加至100%，分裝，充氮，消毒， 得冬凌草甲素靜脈乳注射液。
其中，歩驟2、 4中除去有機溶劑可以在油相製備完成後或乳劑進一步乳化完成後進行， 方法包括但不限於攪拌揮幹、減壓揮幹、加熱揮乾等。
歩驟4中選用微射流高壓均質機均化乳化時壓力為500-25000 psi;消毒的方法為常規力 法，包括但不限於高壓蒸汽消毒、流通蒸汽、過濾除菌等方法。
方法二，也可將藥物添加到水相中，包括如下步驟
1. 按照下述重量/體積百分比取組分冬凌草甲素0.01-5%、注射用油5-40%、乳化劑 0.1-20%、助乳化劑0.1-2%、等滲調節劑0.01-15%、抗氧化劑0.005-0.5%、非水性溶劑 0.卜20%;
2. 用非水性溶劑將冬凌草甲素及乳化劑充分溶解，在攪拌條件下將述有機相加入溶解有 處方量等滲調節劑的稍少於處方量的注射用水中，構成水相，向處方量的注射用油中加 入抗氧化劑，構成油相；
3. 油相、水相加熱混合，攪拌乳化或剪切乳化2-300分鐘，得初乳；
4. 將初乳進一步乳化，加入pH調節劑調pH,注射用水加至100%，分裝，充氮，消毒， 得冬凌草甲素靜脈乳注射液。
其中，除去有機溶劑可以在水相製備完成後或乳劑進一步乳化完成後進行，方法包括但 不限於攪拌揮幹、減壓揮幹、加熱揮幹。
本發明採用注射用溶劑、注射用油、乳化劑等藥用輔料，採用亞微乳製備技術，製備成 冬凌草甲素水包油包固(S/0/W)型靜脈乳注射液。本發明的冬凌草甲素水包油包固型靜脈 乳注射液為白色或類白色乳狀液體，有乳光，載藥量為0.01-5%，平均粒徑為100-500nm，pH為6.0-9.0。注射液經高壓蒸汽滅菌後無藥物粒析出，乳劑分層、乳滴合併現象出現，粒徑 大小及分布無顯著改變。
冬凌草甲素的水溶性較差，25'C在水中的平衡溶解度為0.75g/丄。為了克服上述缺陷， 現技術中通常將其製備成乳劑，但是冬凌草甲素在大豆油等乳劑常規的油相中的溶解度很低， 平衡溶解度為0.23 g./L，因此不能滿足直接做成注射液的要求，按照常規方法難以製備成注 射用乳劑(徐文，孫進，張婷婷，馬博，陳大為，何仲貴.HPLC法測定冬凌草甲素的平衡溶解 度和表觀油水分配係數。瀋陽藥科大學學報2007,24(4)220)。
本發明乳劑採用納米混懸技術，將冬凌草甲素製成S/0/W型復乳。與現有技術相比，該 乳劑具有下述優勢
1. 載藥量高，粒徑分布均勻，平均粒徑僅為100 500nm (見圖1);
2. 質量穩定，10(TC滅菌30分鐘粒徑無明顯變化，室溫放置1年後粒徑和藥物含量無明 顯變化。
本發明乳劑為新型的水包油包固(s/o/w)型乳劑，靜脈給藥系統中藥物納米粒存在於 亞微乳油滴內或油/水界面上，與普通靜脈製劑相比可大幅提高冬凌草甲素給藥濃度，減小給 藥體積。所有輔料、溶劑均符合靜脈給藥要求，降低了原有注射劑由於增溶劑所致的毒副作 用，極大地減少了病人注射時的痛苦，提高了用藥的順應性。冬凌草甲素在水包油包固型體 系中的分散度大，靜脈給藥後分布較快、藥效高、有靶向性，容易被淋巴系統攝取，在體內 可以被網狀內皮系統吞噬(如肝、脾、腎)。該乳劑穩定，製備工藝方法簡單易行，與普通靜 脈乳劑生產製備過程相似，沒有特殊設備要求，可適用於大量製備和工業化生產。


圖1、冬凌草甲素乳劑的冷凍蝕刻電鏡照片。用於說明本發明的水包油包固(s/o/w)型 乳劑實現了包裹目的。
具體實施例方式
下面通過實施例對本發明作進一歩說明，但不構成對本發明的限制。
實施例1
處方
冬凌草甲素 2g 大豆油 100g 大豆磷脂 12g 泊洛沙姆188 (F68) 12g甘油 22.5g 乙醇 60ml 生育酚 0.05g -
氫氧化鈉/鹽酸 適量
注射用水 至1000ml
製備工藝將處方量冬凌草甲素、大豆磷脂、生育酚以乙醇溶解，向大豆油中加入乙醇
溶液，加熱至7(TC得油相。另取注射用水860ml，加入甘油、泊洛沙姆188,攪拌使溶解， 加熱至7(TC得水相。將油相和水相在70'C溫度下混合，用組織搗碎機高速攪拌5分鐘(轉速 8000轉/分鐘)，得初乳。將初乳用微射流高壓均質機均化(壓力5000psi)三次。室溫攪拌乳 劑4h。用氫氧化鈉溶液或鹽酸調節其pH為8.5，注射用水定量，分裝，充氮，115'C滅菌30 分鐘，冷卻，取出。 含量測定
採用外標法測定上述乳劑中冬凌草甲素的含量，HPLC色譜條件色譜柱
Diamonsil-ODS(4.6mmxl50mm， 5pm);流動相甲醇-水=55: 45;檢測波長238nm;柱 溫40°C;流速1.0ml/min。樣品0.2ml，用乙醇配製成25ml，進樣20pl ;主峰保留時間 為6.47min;樣品冬凌草甲素含量為4.87%。 實施例2
處方
冬凌草甲素 2.5g 大豆油 100g 卵磷脂 12g 甘油 22.5g 乙醇 80ml 生育酚 0.05g 氫氧化鈉/鹽酸 適量 注射用水 至1000ml
製備工藝將處方量冬凌草甲素、卵磷脂、生育酚以乙醇溶解，向大豆油中加入乙醇溶 液，混勻後，減壓旋轉蒸發揮幹乙醇，得油相，加熱至70'C備用。另取注射用水860ml，加 入甘油，攪拌使溶解，加熱至7(TC得水相。將油相和水相在7(TC溫度下混合，用組織搗碎機 高速攪拌5分鐘(轉速8000轉/分鐘)，得初乳。將初乳用微射流高壓均質機均化(壓力5000psi)三次，用氫氧化鈉溶液或鹽酸調節其pH為8.5，注射用水定量，分裝，充氮，115'C滅菌30 分鐘，冷卻，取出。 含量測定
採用外標法測定上述乳劑中冬凌草甲素的含量，HPLC色譜條件色譜柱 Diamonsil-ODS(4.6mmxl50mm， 5pm);流動相甲醇-水=55: 45;檢測波長238nm;柱 溫4(TC;流速1.0ml/min。樣品0.2ml，用乙醇配製成25ml，進樣20pl ;主峰保留時間 為6.47min;樣品冬凌草甲素含量為4.65%。
實施例3
處方
冬凌草甲素5g
大豆油廳g
大豆磷脂12g
甘油22.5g
乙醇160ml
生育酚0.05g
氫氧化鈉/鹽酸適量
注射用水至1000ml
製備工藝將處方量冬凌草甲素、大豆磷脂以乙醇溶解，攪拌情況下加入溶解有處方量 甘油的注射用水860ml中，減壓旋轉蒸發除去乙醇，加熱至7(TC得水相。另取處方量生育酚 十大豆油中，加熱70'C溶解得油相。將油相和水相在7(TC溫度下混合，用組織搗碎機高速攪 拌5分鐘(轉速8000轉/分鐘)，得初乳。將初乳用微射流高壓均質機均化(壓力5000psi) 三次，用氫氧化鈉溶液或鹽酸調節其pH為8.5,注射用水定量，分裝，充氮，115t:滅菌30 分鐘，冷卻，取出。
含量測定
採用外標法測定上述乳劑中冬凌草甲素的含量，HPLC色譜條件色譜柱 Diamonsil-ODS(4.6mmxl50mm, 5pm);流動相甲醇-水=55: 45;檢測波長238nm;柱 溫40°C;流速1.0ml/min。樣品0.2ml,用乙醇配製成25ml，進樣20pl ;主峰保留時間 為6.42min;樣品冬凌草甲素含量為4.99%。
實施例4
處方冬凌草甲素 5g
大豆油 200g 大豆磷脂 15g 泊洛沙姆188 (F68) 12g
甘油 22.5g
乙醇 160ml
生ff酚 0.05g
氫氧化鈉/鹽酸 適量 注射用水 至1000ml
製備工藝將處方量冬凌草甲素、大豆磷脂以乙醇溶解，攪拌情況下加入溶解有處方量 甘油、泊洛沙姆188的注射用水860ml中，加熱至7(TC得水相。另取處方量生育酚於大豆油 中，加熱7(TC溶解得油相。將油相和水相在70'C溫度下混合，用組織搗碎機高速攪拌5分鐘 (轉速8000轉/分鐘)，得初乳。將初乳用微射流高壓均質機均化(壓力5000psi)三次，加 熱40'C減壓旋轉蒸發30分鐘，揮幹乙醇。用氫氧化鈉溶液或鹽酸調節其pH為8.5，注射用 水定量，分裝，充氮，115'C滅菌30分鐘，冷卻，取出。 含量測定-
採用外標法測定上述乳劑中冬凌草甲素的含量，HPLC色譜條件色譜柱 Diamonsil-ODS(4.6mmxl50mm， 5pm);流動相甲醇-水=55: 45;檢測波長238nm;柱 溫40°C;流速1.0ml/min。樣品0.2ml，用乙醇配製成25ml，進樣20pl ;主峰保留時間 為6.47min;樣品冬凌草甲素含量為4.%%。
實施例5
處方
冬凌草甲素2g
大豆油謂g
大豆磷脂12g
泊洛沙姆188 (F68)!2g
tr油23g
乙醚60ml
生育酚0.05g
氫氧化鈉/鹽酸適量注射用水 至1000ml
製備工藝將處方量冬凌草甲素、大豆磷脂、生育酚以乙醚溶解，向大豆油中加入乙醚 溶液，加熱至7(TC得油相。另取注射用水860ml，加入甘油、泊洛沙姆188，攪拌使溶解， 加熱至70'C得水相。將油相和水相在70'C溫度下混合，用組織搗碎機高速攪拌5分鐘(轉速 8000轉/分鐘)，得初乳。將初乳用微射流高壓均質機均化(壓力5000psi)三次。室溫攪拌乳 劑4h。用氫氧化鈉溶液或鹽酸調節其pH為8.5，注射用水定量，分裝，充氮，115。C滅菌30 分鐘，冷卻，取出。
含量測定.-
採用外標法測定上述乳劑中冬凌草甲素的含量，HPLC色譜條件色譜柱 Diamonsil-ODS(4.6mmxl50mm， 5pm);流動相甲醇-水=55: 45;檢測波長238nm;柱 溫40°C;流速1.0ml/min。樣品0.2ml，用乙醇配製成25ml，進樣20pl ;主峰保留時間 為6.47min;樣品冬凌草甲素含量為4.87%。
實施例6
處方
冬凌草甲素 2.5g
人豆油 100g
卵磷脂 12g
山梨醇 22.5g
乙醇 80ml
乙二胺四乙酸二鈉 0.05g
氫氧化鈉/鹽酸 適量
注射用水 至1000ml
製備工藝將處方量冬凌草甲素、卵磷脂、乙二胺四乙酸二鈉以乙醇溶解，向大豆油中 加入乙醇溶液，混勻後，減壓旋轉蒸發揮幹乙醇，得油相，加熱至7(TC備用。另取注射用水 860ml,加入山梨醇，攪拌使溶解，加熱至7(TC得水相。將油相和水相在7(TC溫度下混合， 用組織搗碎機高速攪拌5分鐘(轉速8000轉/分鐘)，得初乳。將初乳用微射流高壓均質機均 化(壓力5000psi)三次，用氫氧化鈉溶液或鹽酸調節其pH為9.5，注射用水定量，分裝，充 氮，115r滅菌30分鐘，冷卻，取出。
採用外標法測定上述乳劑中冬凌草甲素的含量，HPLC色譜條件色譜柱Diamonsil-ODS(4.6mmx 150mm， 5pm);流動相甲醇-水=55: 45;檢測波長238nm;柱 溫4(TC;流速1.0ml/min。樣品0.2ml,用乙醇配製成25ml，進樣20pl ;主峰保留時間 為6.47min:樣品冬凌草甲素含量為4.78%。
實施例7
處方
冬凌草甲素5g
紅花籽油100g
蛋黃磷脂12g
甘油22.5g
乙醇160ml
生育酚0.05g
氫氧化鈉/鹽酸適量
注射用水至1000ml
製備工藝將處方量冬凌草甲素、蛋黃磷脂以乙醇溶解，攪拌情況下加入溶解有處方量
甘油的注射用水860ml中，減壓旋轉蒸發除去乙醇，加熱至7(TC得水相。另取處方量生育酚 於紅花籽油中，加熱7(TC溶解得油相。將油相和水相在7(TC溫度下混合，用組織搗碎機高速 攪拌5分鐘(轉速8000轉/分鐘)，得初乳。將初乳用微射流高壓均質機均化(壓力5000psi) 三次，用氫氧化鈉溶液或鹽酸調節其pH為5.5，注射用水定量，分裝，充氮，115t:滅菌30 分鐘，冷卻，取出。 含量測定
採用外標法測定上述乳劑中冬凌草甲素的含量，HPLC色譜條件色譜柱
Diamonsil-ODS(4.6mmxl50mm， 5pm);流動相甲醇-水=55: 45;檢測波長238nm;柱 溫4(TC;流速1.0ml/min。樣品0.2ml,用乙醇配製成25ml，進樣20pl ;主峰保留時間 為6.40min;樣品冬凌草甲素含量為4.88%。
實施例8
處方
冬凌草甲素 5g
大豆油 200g
大豆磷脂 15g
甘油單油酸酯 12g甘油 22.5g
乙醇 160ml
巰基乙酸 0.05g
氫氧化鈉/鹽酸 適量
注射用水 至1000ml
製備工藝將處方量冬凌草甲素、大豆磷脂以乙醇溶解，攪拌情況下加入溶解有處方量 甘油、甘油單油酸酯的注射用水860ml中，加熱至70'C得水相。另取處方量巰基乙酸於大豆 油中，加熱7(TC溶解得油相。將油相和水相在7(TC溫度下混合，用組織搗碎機高速攪拌5分 鍾(轉速8000轉/分鐘)，得初乳。將初乳用微射流高壓均質機均化(壓力5000psi)三次， 加熱4(TC減壓旋轉蒸發30分鐘，揮幹乙醇。用氫氧化鈉溶液或鹽酸調節其pH為4.5，注射 用水定量，分裝，充氮，U5'C滅菌30分鐘，冷卻，取出。
含量測定
採用外標法測定上述乳劑中冬凌草甲素的含量，HPLC色譜條件色譜柱-
Diamonsil-ODS(4.6mmxl50mm， 5pm);流動相甲醇-水=55: 45;檢測波長238nm;柱 溫4CTC;流速1.0ml/min。樣品0.2ml,用乙醇配製成25ml，進樣20P1 ;主峰保留時間 為6.47min;樣品冬凌草甲素含量為4.90%。
實施例9
處方
冬凌草甲素 2g
玉米油 100g
大豆磷脂 12g
泊洛沙姆188 (F68) 12g
甘油 23g
乙醚 60ml
生育酚 0.05g
氫氧化鈉/鹽酸 適量 注射用水至1000ml
製備工藝將處方量冬凌草甲素、大豆磷脂、生育酚以乙醚溶解，向玉米油中加入乙醚 溶液，加熱至7(TC得油相。另取注射用水860ml，加入甘油、泊洛沙姆188，攪拌使溶解， 加熱至7(TC得水相。將油相和水相在7(TC溫度下混合，用組織搗碎機高速攪拌5分鐘(轉速8000轉/分鐘)，得初乳。將初乳用微射流高壓均質機均化(壓力5000psi)三次。室溫攪拌乳 劑4h。用氫氧化鈉溶液或鹽酸調節其pH為6.5,注射用水定量，分裝，充氮，115i:滅菌30 分鐘，冷卻，取出。 含量測定
採用外標法測定上述乳劑中冬凌草甲素的含量，HPLC色譜條件色譜柱 Diamonsil-ODS(4.6mmxl50mm， 5pn);流動相甲醇-水=55: 45;檢測波長238mn;柱 溫4(TC;流速1.0ml/min。樣品0.2ml，用乙醇配製成25ml，進樣20pl ;主峰保留時間 為6.47min;樣品冬凌草甲素含量為4.96%。
實施例10
處方
冬凌草甲素5g
紅花籽油100g
蛋黃磷脂12g
葡萄糖22.5g
甲醇160ml
生育酚0.05g
氫氧化鈉/鹽酸適量
注射用水至000ml
製備工藝將處方量冬凌草甲素、蛋黃磷脂以甲醇溶解，攪拌情況下加入溶解有處方量
葡萄糖的注射用水860ml中，減壓旋轉蒸發除去甲醇，加熱至7(TC得水相。另取處方量生育 酚於紅花籽油中，加熱70。C溶解得油相。將油相和水相在7(TC溫度下混合，用組織搗碎機高 速攪拌5分鐘(轉速8000轉/分鐘)，得初乳。將初乳用微射流高壓均質機均化(壓力5000psi) 三次，用氫氧化鈉溶液或鹽酸調節其pH為8.5，注射用水定量，分裝，充氮，115。C滅菌30 分鐘，冷卻，取出。 含量測定
採用外標法測定上述乳劑中冬凌草甲素的含量，HPLC色譜條件色譜柱.-
Diamonsil-ODS(4.6mmxl50mm, 5pm);流動相甲醇-水=55: 45;檢測波長238nm;柱 溫4CTC;流速1.0ml/min。樣品0.2ml，用乙醇配製成25ml，進樣20pl ;主峰保留時間 為6.40min;樣品冬凌草甲素含量為4.88°/。。 實施例11處方
冬凌草甲素 2g
注射用薏苡仁油 100g
大豆磷脂 12g
泊洛沙姆188 (F68) 12g
甘油 22.5g
乙醇 60ml
生育酚 0.05g
氫氧化鈉/鹽酸 適量
注射用水 至1000ml
製備工藝將處方量冬凌草甲素、大豆磷脂、生育酚以乙醇溶解，向注射用薏苡仁油中 加入乙醇溶液，加熱至7(TC得油相。另取注射用水860ml，加入甘油、泊洛沙姆188，攪拌 使溶解，加熱至7(TC得水相。將油相和水相在7(TC溫度下混合，用組織搗碎機高速攪拌5分 鍾(轉速8000轉/分鐘)，得初乳。將初乳用微射流高壓均質機均化(壓力5000psi)三次。 室溫攪拌乳劑4h。用氫氧化鈉溶液或鹽酸調節其pH為8.5，注射用水定量，分裝，充氮，115 'C滅菌30分鐘，冷卻，取出。
含量測定
採用外標法測定上述乳劑中冬凌草甲素的含量，HPLC色譜條件色譜柱 Diamonsil-ODS(4.6mmxl50mm， 5jim);流動相甲醇-水=55: 45;檢測波長238nm;柱 溫4(TC;流速1.0ml/min。樣品0.2ml，用乙醇配製成25ml，進樣20pl ;主峰保留時間 為6.47min;樣品冬凌草甲素含量為4.87%。
實施例12
處方
冬凌草甲素2.5g
注射用薏苡仁油雨g
卵磷脂12g
甘油22.5g
乙醇80ml
生育酚0.05g
氫氧化鈉/鹽酸適量注射用水 至1000ml
製備工藝將處方量冬凌草甲素、卵磷脂、生育酚以乙醇溶解，向注射用薏苡仁油中加 入乙醇溶液，混勻後，減壓旋轉蒸發揮幹乙醇，得油相，加熱至7(TC備用。另取注射用水860ml， 加入甘油，攪拌使溶解，加熱至7(TC得水相。將油相和水相在7(TC溫度下混合，用組織搗碎 機高速攪拌5分鐘(轉速8000轉/分鐘)，得初乳。將初乳用微射流高壓均質機均化(iii力 5000psi)三次，用氫氧化鈉溶液或鹽酸調節其pH為8.5，注射用水定量，分裝，充氮，115 'C滅菌30分鐘，冷卻，取出。
含量測定
採用外標法測定上述乳劑中冬凌草甲素的含量，HPLC色譜條件色譜柱
Diamonsil-ODS(4.6mmxl50mm， 5pm);流動相甲醇-水=55: 45;檢測波長238mn;柱 溫40。C;流速1.0ml/min。樣品0.2ml，用乙醇配製成25ml，進樣20pl ;主峰保留時間 為6.47min;樣品冬凌草甲素含量為4.65%。
實施例13
處方
冬凌草甲素 5g
注射用薏苡仁油 100g
大豆磷脂 12g
甘油 22.5g
乙醇 160ml
生育酚 0.05g
氫氧化鈉/鹽酸 適量
注射用水 至1000ml
製備工藝將處方量冬凌草甲素、大豆磷脂以乙醇溶解，攪拌情況下加入溶解有處方量 甘油的注射用水860ml中，減壓旋轉蒸發除去乙醇，加熱至7(TC得水相。另取處方量生育酚 於注射用薏苡仁油中，加熱70。C溶解得油相。將油相和水相在7(TC溫度下混合，用組織搗碎 機高速攪拌5分鐘(轉速8000轉/分鐘)，得初乳。將初乳用微射流高壓均質機均化(壓力 5000psi)三次，用氫氧化鈉溶液或鹽酸調節其pH為8.5，注射用水定量，分裝，充氮，115 t:滅菌30分鐘，冷卻，取出。
含量測定 ' 採用外標法測定上述乳劑中冬凌草甲素的含量，HPLC色譜條件色譜柱Diamonsil-ODS(4.6mmx 150mm， 5pm);流動相甲醇-水=55: 45;檢測波長238nm;柱 溫4CTC;流速1.0ml/min。樣品0.2ml，用乙醇配製成25ml，進樣20pl ;主峰保留時間 為6.42min;樣品冬凌草甲素含量為4.99%。
權利要求
1.一種冬陵草甲素靜脈乳注射劑，含有下列重量/體積百分比的組分冬凌草甲素 0.01-5％注射用油 5-40％乳化劑 0.1-20％助乳化劑 0.1-2％等滲調節劑 0.01-15％抗氧化劑 0.005-0.5％非水性溶劑 0.1-20％注射用溶劑和pH調節劑餘量加至100ml。
2. 根據權利要求1所述的靜脈乳注射劑，含有下列重量/體積百分比的組分冬凌草甲素 0.01-2%注射用油 5-20%乳化劑 0.5-10%助乳化劑 0.1-2%等滲調節劑 0.1-15%抗氧化劑 0.005-0.5%非水性溶劑 0.5-10%注射用溶劑和pH調節劑餘量加至100ml。
3. 根據權利要求2所述的靜脈乳注射劑，其中所述的助乳化劑為泊洛沙姆188 (F68)、甘油 單油酸酯、油酸；所述非水性溶劑為乙醇、乙醚、甲醇、乙酸乙酯的一種或幾種。
4. 根據權利要求2所述的靜脈乳注射劑，其中所述的助乳化劑為乙醇。
5. 根據權利要求1或2所述的靜脈乳注射劑，其中所述乳化劑選自注射用大豆磷脂、蛋黃 磷脂中的一種或幾種；其中注射用油選自辛癸酸甘油酯、大豆油、紅花籽油、玉米油、橄欖油的一種或幾種；所述乳化劑選自注射用大豆磷脂、蛋黃磷脂中的一種或兒種；所 述的等滲調節劑選自甘油、山梨醇、木糖醇、葡萄糖、氯化鈉中的一種或幾種；所述抗 氧化劑選自乙二胺四乙酸二鈉、巰基乙酸、生育酚中的一種；所述的pH調節劑選自氫氧 化鈉溶液、鹽酸、醋酸及其鹽中的一種；所述注射用溶劑為水。
6. 根據權利要求1或2所述的靜脈乳注射劑，其中所述的pH調節劑為0.001-5M的氫氧化 鈉溶液或者0.00卜5M的鹽酸溶液，調節pH值為4.5-9.5。
7. 權利要求1所述的靜脈乳注射劑的製備方法，由下述步驟組成a. 按照下述重量/體積百分比取組分冬凌草甲素0.01-5%、注射用油5-40%、乳化劑 0.1-20%、助乳化劑0.1-2%、等滲調節劑0.01-15%、抗氧化劑0.005-0.5%、非水性溶 齊!10.1-20%;b. 將冬凌草甲素與乳化劑及抗氧化劑用非水性溶劑充分溶解，將上述有機相加入注射用 油中，形成油相；向稍少於處方量的注射用水中加入處方量等滲調節劑，攪拌混勻， 得水相；c. 油相、水相加熱混合，攪拌乳化或剪切乳化2-300分鐘，得初乳；d. 將初乳迸一步乳化，加入pH調節劑調pH，注射用水加至100%，分裝，充氮，消毒， 得冬凌草甲素靜脈乳注射液。
8. 權利要求1所述的靜脈乳注射劑的製備方法，由下述步驟組成a. 按照下述重量/體積百分比取組分冬凌草甲素0.01-5%、注射用油5-40%、乳化劑 0.1-20%、等滲調節劑0.01-15%、抗氧化劑0.005-0.5%、非水性溶劑0.1-20%;b. 用非水性溶劑將冬凌草甲素及乳化劑充分溶解，在攪拌條件下將述有機相加入溶解有 處方量等滲調節劑的稍少於處方量的注射用水中，構成水相，向處方量的注射用油中 加入抗氧化劑，構成油相；c. 油相、水相加熱混合，攪拌乳化或剪切乳化2-300分鐘，得初乳；d. 將初乳進一步乳化，加入pH調節劑調pH，注射用水加至100%，分裝，充氮，消毒， 得冬凌草甲素靜脈乳注射液。
全文摘要
本發明提供了一種冬凌草甲素靜脈乳及其製備方法，該乳劑屬於水包油包固(S/O/W)型復乳，由冬凌草甲素和藥學上可接受載體組成。所述藥學可接受的載體選自注射用溶劑、注射用油、乳化劑、等滲調節劑、抗氧化劑、pH調節劑。
文檔編號A61P35/00GK101406451SQ20081011055
公開日2009年4月15日 申請日期2008年6月3日 優先權日2008年6月3日
發明者李大鵬, 梁文權 申請人:浙江康萊特集團有限公司