清除人體羥自由基的活性肽水解液的製法及活性肽口服液的製作方法

2023-05-23 21:40:01 3

專利名稱：清除人體羥自由基的活性肽水解液的製法及活性肽口服液的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種活性肽水解液的製備方法；特別是一種清除人體羥自由基的活性肽水解液的製備方法；本發明還涉及用前述活性肽水解液製成的活性肽口服液。
背景技術：
近年來，隨著養殖規模的日益擴大和養殖技術的不斷完善，養殖魚類的產量提高很快。中國的水產品產量一直保持著高速增長勢頭，水產品產量2005年已經達到約4900 萬t，佔世界水產品產量35%，位居世界第一位。隨著我國水產業的發展，水產加工也越來越受到人們的重視，加工的同時產生出大量下腳料，佔魚體總重的30% 50%，其中約5%是魚鱗。然而，這些魚鱗沒有被充分利用，大部分作為廢棄物丟棄了。據統計，我國每年廢棄的魚鱗達到30萬t以上。魚鱗含有豐富的蛋白質和多種礦物質，主要由膠原蛋白和羥基磷灰石組成。其中有機物佔41% 55%，魚鱗的有機組成中除生膠質外，大部分為魚類特有的魚鱗硬蛋白及少量角質蛋白、脂肪、色素和粘液質等。魚鱗灰分含量較高，約佔30%，主要成分是羥基磷灰石，絕大部分集中在骨質層，脂質含量少，相對於目前生產膠原蛋白的主要原料皮和骨而言，這更有利於膠原的提取和純化。經常食用含膠原蛋白豐富的食品，能有效地增加皮膚組織細胞的儲水能力，增強和維持肌膚良好的彈性，強化肌膚的韌性，延緩肌體的衰老。同時，膠原蛋白可以作為補鈣成分用於保健食品，因為血漿中來自膠原蛋白的羥基脯氨酸是將血漿中的鈣運輸到骨細胞的運載工具，骨細胞中的骨膠原則是羥基磷灰石的黏合劑，它與羥基磷灰石共同構成了骨骼的主體。此外，膠原蛋白還能降低血甘油三酯和膽固醇，用於製作減肥降血脂食品。蛋白肽由二個或二個以上胺基酸組成。人體的吸收是以肽的方式進行，食用蛋白肽的吸收利用率可達100%。肽的分子量、胺基酸排列順序不同所表現的功能就不同。膠原蛋白肽是膠原或明膠經蛋白酶降解處理後製成的，具有較高的消化吸收性， 分子量大約在3000道爾頓，膠原蛋白肽可促進骨的形成，增強低鈣水平下的骨膠原結構， 從而提高了骨強度，即達到了預防骨質疏鬆症的作用；另外膠原蛋白肽還具有其它許多特殊的生理功能如保護胃黏膜和抗潰瘍作用，抗過敏作用等，特別需要提出的是，膠原蛋白在美容方面的功效，因為，皮膚中膠原蛋白佔72%，真皮中80%是膠原蛋白，膠原蛋白在皮膚中構成了一張細密的彈力網，鎖住水分，支撐著皮膚。膠原蛋白的流失，導致支撐皮膚的彈力網斷裂，皮膚組織萎縮、塌陷，肌膚就會顯現乾燥、粗糙、鬆弛、皺紋、毛孔粗大、暗淡、色斑等衰老現象」。因此，及時補充膠原蛋白，對於改善肌膚問題，延緩衰老，有非常好的功效。生物活性肽生產製備方法和途徑有三條一是從自然界生物體中提取其本身固有各種天然活性肽類。二是通過蛋白質降解途徑可獲得具有各種生理功能活性肽。三是合成方法製備生物活性肽，包括化學合成法、酶合成法和重組技術合成法。從天然生物體提取生物活性肽，生物體含量很低，加工成本卻很高，且大量提取會造成物種資源萎縮。另外，提取生物活性肽殘存有機溶劑又會帶來毒性問題。化學合成法常用於合成高營養價值、中等長度的醫藥用肽，但採用這種方法製取活性肽反應底物和反應劑價格高，反應過程中能產生有害物質。酶合成法相對有很多優點，如反應溫和，酶催化位置有方向性等， 但反應副產物多，最適酶缺乏及產率過低等因素都制約著其發展。目前最基本方法是使用蛋白酶進行簡單水解，此種方法不僅可製取具有功能性食品蛋白且不會損壞其營養價值。除可釋放出各種為人類所需要生物活性肽之外，將食物降解為不同鏈長的肽還可使其更易消化。但這種酶解法不利方面是產品其它功能如粘性、 乳化力和吸水性會受到影響，需要通過調整水解參數改善產品特殊性能和去除不良味覺成分。在實際生產中，對一些特殊肽類生產需要對反應底物、酶、反應條件作特殊要求。目前，它成為全世界研究的熱點、大量的國內外研究結果表明生物活性肽是涉及生物體內多種細胞功能的生物活性物質，在生物體內已發現幾百種，不同的生物肽具有不同的結構和生理功能，如抗病毒、抗癌、抗血栓、抗高血壓、免疫調節、激素調節、抑菌、降膽固醇等作用。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的不足，提供一種新的、水解過程簡單、可以酶解魚鱗膠原蛋白來生產活性肽水解液的方法，所製備的活性肽水解液具有較高的清除羥自由基的的能力。本發明所要解決的另一個技術問題是提供了一種以上述方法製得的活性肽水解液製成的活性肽口服液。本發明所要解決的技術問題是通過以下的技術方案來實現的。本發明是一種清除人體羥自由基的活性肽的製備方法，其特點是，其步驟如下
(1)清洗烘乾取海洋魚鱗，清洗到無雜物和血汙，將清洗後的魚鱗在55_65°C烘乾至含水量為10%以下；
(2)酸鹼脫鹽處理分別用2N的鹽酸和質量百分比濃度為10%的NaOH溶液進行脫鹽處理後，水洗至PH為5. 5-6. 5，得水與魚鱗的混合物，且魚鱗佔混合物的重量百分比為5-7% (底物濃度)；
(3)酶水解向水與魚鱗的混合物中加入木瓜蛋白酶與胃蛋白酶的混合酶，混合酶中木瓜蛋白酶佔其總重量的60-70%，所加入的混合酶佔水與魚鱗的混合物重量的4. 5-5. 5% (加酶量)；然後在45-50pH5. 5-6. 5水解1. 8-2. 2小時，得酶解液；
(4)滅酶和離心在90-100°C下對酶解液進行滅活處理，然後進行離心，去除沉澱物， 離心液即為活性肽水解液。以上所述的清除人體羥自由基的活性肽的製備方法的步驟( 酸鹼脫鹽處理中， 優選的技術方案是水洗至PH為6. 0，得水與魚鱗的混合物，且魚鱗佔混合物的重量百分比為6%。以上所述的清除人體羥自由基的活性肽的製備方法的步驟(3)酶水解中，優選的技術方案是混合酶中木瓜蛋白酶佔其總重量的65%，所加入的混合酶佔水與魚鱗的混合物重量的5. 0% ；然後在48°C、pH6. 0水解2. 0小時，得酶解液。以上所述的清除人體羥自由基的活性肽的製備方法的步驟(4)滅酶和離心中，優選的技術方案是在95°C下對酶解液進行滅活處理。
以上任何一項技術方案所述的清除人體羥自由基的活性肽的製備方法中，進一步優選的技術方案是向活性肽水解液中加入重量濃度為2、的活性炭進行脫腥處理50min， 處理溫度為60°C，得脫腥活性肽水解液，濃縮至脫腥活性肽水解液中的活性肽重量含量為 3_5%，得濃縮活性肽水解液。本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步實現。本發明還提供了一種清除人體羥自由基的活性肽保健口服液，其特點是，它是由以下重量配比的原料製成
如以上任何一項技術方案中所述的濃縮活性肽水解液 85-90 ； 蜂蜜 4-6 白砂糖 7-9 ； 檸檬酸 0.08-0. 12。其中，各原料的優選重量配比為 濃縮活性肽水解液 86. 9 ；
蜂蜜5 白砂糖8;檸檬酸0.10 。本發明所述的活性肽保健口服液可以按現有技術中口服液的常規製備方法製成， 製備時可以將各原料進行混合，裝瓶後再進行殺菌處理即可。以下對本發明技術方案及相關技術參數進行進一步的闡述。以下各條件研究實驗中所涉及的清除羥自由基試驗的方法如下樣品對羥自由基的清除活性採用甲基紫褪色法，用分析天平分別稱取甲基紫0. 088g，七水硫酸亞鐵 0. 026g,均定容至IOOmL,用移液管吸取30%雙氧水1 mL，定容到100 mL,用HCl調水的pH 至3. 5。按一定的方法加上述離心液，使總體積為10mL。然後在580 nm波長下比色，測得吸光度值，按下式計算清除率
清除率=(A-A0) / (A1-A0) X 100%。清除羥自由基實驗加樣表見表1。表1清除羥自由基實驗加樣表
權利要求
1.一種清除人體羥自由基的活性肽的製備方法，其特徵在於，其步驟如下(1)清洗烘乾取海洋魚鱗，清洗到無雜物和血汙，將清洗後的魚鱗在55-65°C烘乾至含水量為10%以下；(2)酸鹼脫鹽處理分別用2N的鹽酸和質量百分比濃度為10%的NaOH溶液進行脫鹽處理後，水洗至PH為5. 5-6. 5，得水與魚鱗的混合物，且魚鱗佔混合物的重量百分比為5-7% ；(3)酶水解向水與魚鱗的混合物中加入木瓜蛋白酶與胃蛋白酶的混合酶，混合酶中木瓜蛋白酶佔其總重量的60-70%，所加入的混合酶佔水與魚鱗的混合物重量的4. 5-5. 5% ； 然後在45-500C、ρΗ5· 5-6. 5水解1. 8-2. 2小時，得酶解液；(4)滅酶和離心在90-100°C下對酶解液進行滅活處理，然後進行離心，去除沉澱物， 離心液即為活性肽水解液。
2.根據權利要求1所述的清除人體羥自由基的活性肽的製備方法，其特徵在於，步驟(2)的酸鹼脫鹽處理中水洗至pH為6.0，得水與魚鱗的混合物，且魚鱗佔混合物的重量百分比為6%。
3.根據權利要求1所述的清除人體羥自由基的活性肽的製備方法，其特徵在於，步驟(3)的酶水解中混合酶中木瓜蛋白酶佔其總重量的65%，所加入的混合酶佔水與魚鱗的混合物重量的5. 0% ；然後在48°C、pH6. 0水解2. 0小時，得酶解液。
4.根據權利要求1所述的清除人體羥自由基的活性肽的製備方法，其特徵在於，步驟(4)滅酶和離心中在95°C下對酶解液進行滅活處理。
5.根據權利要求1-4任何一項所述的清除人體羥自由基的活性肽的製備方法，其特徵在於向活性肽水解液中加入重量濃度為m的活性炭進行脫腥處理50min，處理溫度為 600C，得脫腥活性肽水解液，濃縮至脫腥活性肽水解液中的活性肽重量含量為3-5%，得濃縮活性肽水解液。
6.一種清除人體羥自由基的活性肽保健口服液，其特徵在於，它是由以下重量配比的原料製成如權利要求5所述的濃縮活性肽水解液 85-90 ； 蜂蜜 4-6 白砂糖 7-9 ； 檸檬酸 0.08-0. 12。
7.根據權利要求6所述的一種清除人體羥自由基的活性肽口服液，其特徵在於，各原料的重量配比為如權利要求5所述的濃縮活性肽水解液 86. 9 ； 蜂蜜5 白砂糖8;檸檬酸0.10 。
全文摘要
本發明公開了一種清除人體羥自由基的活性肽的製備方法，其特徵在於，它以海洋魚鱗為原料，經烘乾、酸鹼脫鹽處理後，加入木瓜蛋白酶與胃蛋白酶，然後在45-50℃、pH5.5-6.5水解1.8-2.2小時，得酶解液；再對酶解液進行滅活處理，然後進行離心，去除沉澱物，得活性肽水解液。本發明還公開了一種清除人體羥自由基的活性肽保健口服液，它以濃縮活性肽水解液、蜂蜜、白砂糖和檸檬酸為原料。本發明水解過程簡單，提取過程有效地利用了海產品加工下腳料魚鱗，製備過程節能環保。且其除腥和口服液的配方具有簡單實用、成本低廉的優點，容易在工業生產上推廣應用。
文檔編號A23L1/325GK102283377SQ20111015720
公開日2011年12月21日 申請日期2011年6月13日 優先權日2011年6月13日
發明者杜雲建, 趙玉巧 申請人:淮海工學院