一種治療急性痛風性關節炎的藥物的製作方法

2023-05-05 13:50:41

一種治療急性痛風性關節炎的藥物的製作方法
【專利摘要】本發明屬於藥品及其製備【技術領域】，涉及一種治療急性痛風性關節炎的藥物，藥物組份的重量百分比為：白藜蘆醇90～95%；藻酸鈉3～5%；澱粉2～3%；將上述三種原料混合均勻按常規的公知工藝方法製成片狀或粉狀產品，再加工成形即可；其組份簡單，加工成本低，療效明顯，安全可靠。
【專利說明】一種治療急性痛風性關節炎的藥物
【技術領域】:
[0001]本發明屬於藥品及其製備【技術領域】，涉及一種以白藜蘆醇為主要原料治療急性痛風性關節炎的藥物 。
【背景技術】:
[0002]痛風(GOUT)是一種與遺傳有關的長期嘌呤代謝障礙或尿酸排洩障礙，導致血尿酸持續增高和尿酸鹽結晶沉積，引起組織損傷的一組臨床症候群。痛風病臨床特點是高尿酸血症，以及由此引起的痛風性急性關節炎反覆發作、痛風石沉積、痛風石慢性關節炎和關節畸形，常累及腎臟引起慢性間質性腎炎和尿酸腎結石形成。隨著人們生活方式的改變，痛風患病率有明顯上升趨勢，痛風在我國發病率不斷上升，南方和沿海經濟發達地區發病率尤高，因此越來越受到醫學界的重視。痛風不僅能引起關節腫脹，而且可誘發和加重脂代謝紊亂、糖尿病及心血管疾病等，增加心腦血管疾病、代謝症候群及腎臟疾病病人的病死率。因此，痛風已成為嚴重威脅人類健康的常見病、多發病。目前，秋水仙鹼是臨床常用治療痛風的藥物，但其副作用(如噁心、嘔吐、水樣腹瀉、肝細胞損傷、骨髓抑制、脫髮和腎衰竭等)使臨床應用受到一定限制。非甾體抗炎藥、腎上腺糖皮質激素及別嘌呤醇等的副反應也較為明顯，如可引起發熱、過敏性皮疹、腹痛、腹瀉、白細胞及血小板減少，甚而肝腎功能損害等。而對高尿酸血症和痛風採取中西醫結合治療可使我國傳統醫學和西方先進醫療技術互為補充，達到標本兼治的目的越來越受到人們的重視。現有技術的中藥治療痛風主要分為內服和外敷，內服藥物大多以虎杖、牛膝、防風、土茯苓、蒼朮、羌活等為主要通過祛風除溼治療痛風；外敷藥物大多以黃柏、生大黃、生半夏、乳香、沒藥等為主組方通過清熱解毒、活血化瘀達到治療痛風的目的。但大多研究集中在抗炎、鎮痛、對急性痛風動物模型的治療作用等方面，深入的分子學和機制研究較少，故急需療效確切、作用機制明確、安全性高的藥物應用於臨床。在已公開的文獻中有記載，已研究發現白藜蘆醇具有抗氧化、抗菌消炎、抗血小板聚集，誘導細胞凋亡、抗腫瘤等活性，但其在急性痛風性關節炎中的應用還未見報導。

【發明內容】
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[0003]本發明的目的在於克服現有技術存在的缺點，尋求設計提供一種治療急性痛風性關節炎的新藥物，該組合藥物以白藜蘆醇為核心原料，輔助其他成份組合混合藥物，具有治療痛風的作用，可抑制局部滑膜組織炎症浸潤和增生，抑制關節液及血清中IL-1 β、CCR5、CXCLlO的分泌，減少關節滑膜中NF-κ B ρ65的表達，從而達到治療急性痛風性關節炎的效
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[0004]為了實現上述目的，本發明涉及的藥物組份的重量百分比為:白藜蘆醇90~95% ；藻酸鈉3~5% ;澱粉2~3% ;將上述三種原料混合均勻按常規的公知工藝方法製成片狀或粉狀產品，再加工成形即可。
[0005]本發明與現有技術相比，選用白藜蘆醇為主要原料，輔料可減少副作用，製成治療痛風性關節炎的藥物，其組份簡單，加工成本低，療效明顯，安全可靠。
【專利附圖】

【附圖說明】:
[0006]圖1為本發明對各組大鼠關節滑膜HE染色圖片，其中，A為空白對照組，B為陰性對照組，C為秋水仙鹼組，D為白藜蘆醇低劑量組，E為白藜蘆醇中劑量組，F為白藜蘆醇高劑量組。
[0007]圖2為本發明對各組大鼠血清中IL-1 β水平示意圖。 [0008]圖3為本發明對各組大鼠血清中CCR5水平示意圖。
[0009]圖4為本發明對各組大鼠血清中CXCLlO水平示意圖。
[0010]圖5為本發明對各組大鼠關節液中IL-1 β、CCR5水平示意圖。
[0011]圖6為本發明對各組大鼠關節液中CXCLlO水平示意圖。
[0012]圖7為本發明對各組大鼠關節腫脹度變化趨勢示意圖。
[0013]圖8為本發明對各組大鼠關節滑膜NF-K B p65的表達示意圖。
【具體實施方式】:
[0014]下面通過實施例並結合附圖作進一步說明。
[0015]實施例1:
[0016]本實施例涉及的藥物組份及各組份的重量百分比為:白藜蘆醇90~95% ;藻酸鈉3~5% ;澱粉2~3% ;將上述三種原料混合均勻按常規的工藝技術製成片狀或粉狀產品，再加工成形即可。
[0017]本實施例為急性痛風性關節炎的治療提供了一種新藥物，並證實白藜蘆醇的一種新用途，動物實驗中白藜蘆醇低劑量組的劑量為250mg/kg，白藜蘆醇中劑量組的劑量為500mg/kg,白藜蘆醇高劑量組的劑量為1000mg/kg
[0018]實施例2:
[0019]本實施例使用實施例1的藥物對治療痛風性關節炎進行實驗:
[0020](I)、實驗分組與給藥:60隻大鼠隨機分為6組，每組10隻，常規飼養一周，灌胃前稱取體質量，按體質量確定給藥劑量空白對照組、陰性對照組生理鹽水灌胃，秋水仙鹼組秋水仙鹼Img.kg—1.cT1，白藜蘆醇高、中、低劑量組分別為白藜蘆醇1000、500、250mg.kg-1.cf1 ；
[0021](2)、尿酸鈉溶液的製備:取194ml蒸餾水加6mlNa0H(lN)，煮沸後加Ig尿酸，用IN HCL調pH至7.2，攪拌冷卻，儲存於4°C冰箱中24h，去上清液，用濾紙過濾沉澱物，將沉澱物自然乾燥即可得到尿酸鈉結晶，用孔徑250um的金屬網篩過篩；實驗前尿酸鈉結晶180°C 3h，然後用體積分數95%乙醇洗滌，2000r/min離心15min3次，室溫自然乾燥，取250mg尿酸鈉晶體加9ml生理鹽水，Iml吐溫80,加熱攪拌,配成10ml25mg/ml尿酸鈉溶液；
[0022](3)、造模方法:灌胃第4天(造模前)再次稱取體質量，灌胃後Ih用縛線法測取右側踝關節周徑(取均值)，然後製備急性痛風性關節炎模型。陰性對照組、秋水仙鹼組和白藜蘆醇低、中、高劑量組大鼠均用75%酒精消毒右側踝關節，麻醉後用6號注射針在受試大鼠右側踝關節背側從45度方向插入脛骨肌腱內側，將質量濃度為25mg/ml (0.05ml)的尿酸鈉溶液注入踝關節腔，伸曲、旋轉運動lOmin，空白對照組大鼠關節腔注射0.05ml生理鹽水；
[0023](4)、觀察指標及檢測指標:先觀察大鼠活動、進食、精神情況，其關節腫脹度:用縛線法測定造模前及造模後0、l、2、3、4、5、6、24、48、72h右側踝關節同一部位周徑(取均值)，計算關節腫脹度，關節腫脹度=(測試時間點周徑一初始周徑)/初始周徑；再檢測指標，血清中IL-β、CCR5、CXC L10水平:造模後2、9、24、48、72h內眥取血，靜置4h後，3000r/min離心15min離心後，取上清液雙夾心酶免法檢測IL-β、CCR5、CXCLlO ;關節液中IL-1 β、CCR5、CXCLlO水平:造模72h後，麻醉狀態下，用500ul的無菌生理鹽水衝洗大鼠右側踝關節腔，收集衝洗液，3000r/min離心15min離心後，取上清液雙夾心酶免法檢測IL-β、CCR5、CXCLlO ；NF- κ B p65表達:冰浴中勻漿關節滑膜組織，提取蛋白，並以BCA法測定白蛋白濃度。進行12%SDS-PAGE電泳後轉至PVDF膜上，用5%脫脂奶粉封閉2h，然後與相應抗體NF-kB p65和β -actin孵育，4°C過夜，次日PBST、PBS洗膜後與相應二抗孵育Ih，電化學發光試劑(ECL)顯影,應用Quantity One軟體分析目標蛋白與內參β-actin蛋白灰度值，計算相對灰度值，進行組間比較；然後進行病理切片，踝關節滑膜病理切片:造模72h後，麻醉大鼠，取右側踝關節滑膜，置於10%中性福馬林溶液固定，5%的硝酸脫鈣，常規脫水，透明、包埋、切片和蘇木素-伊紅染色，光鏡下觀察局部病理組織學變化。
[0024]實施例3:
[0025]本實施例對藥物治療痛風性關節炎的結果進行分析:
[0026](I)、大鼠一般情況，60隻大鼠均進入結果分析，無脫失，造模後，大鼠右側踝關節明顯腫脹伴隨紅、熱表現，有的甚至將腫脹的關節抬離地面，大鼠煩躁不安，進食進水次數減少，在48、72h時上述症狀逐漸減輕，造模後大鼠體重有所下降，但各組之間差異比較無統計學意義，
[0027](2)、各組大鼠關節腫脹度變化見表1和圖7，造模後2h造模關節出現紅、腫、熱等表現，大鼠活動減少，有的大鼠右足不敢接觸地面，造模後腫脹度隨時間逐漸增長，以陰性對照組最明顯，空白對照組腫脹度變化較緩慢，且恢復較快，造模24h後，秋水仙鹼組、白藜蘆醇低、中、高劑量組關節腫脹度明顯低於陰性對照組(P < 0.05)，造模72h後，各組關節腫脹度明顯降低，且各組間的差異沒有統計學意義；
[0028](3)、各組大鼠血清IL-1 β、CCR5、CXCLlO水平見表2、3、4和圖2、3、4，與陰性對照組比較，秋水仙鹼組、白藜蘆醇低、中、高劑量組2h、9h血清IL-Ιβ的含量明顯下降(P
<0.05)，在秋水仙鹼組、白藜蘆醇高劑量組24h、48h血清中CCR5的含量顯著低於陰性對照組(P<0.05)，72h後各組無明顯差異，與陰性對照組比較，秋水仙鹼組、白藜蘆醇中、高劑量組24h、48h、72h血清CXCLlO水平明顯降低；
[0029](4)、各組大鼠關節液IL-1 β、CCR5、CXCLlO水平見表5、6和圖5、6，與陰性對照組相比，秋水仙鹼組、白藜蘆醇中、高劑量組關節液中IL-1 β、CCR5、CXCLlO水平明顯下降(P
<0.05)；
[0030](5)、ffestern-blot檢測結果見表7和圖8,實驗結果顯示急性痛風性關節炎發病過程中關節滑膜NF- κ B p65蛋白表達明顯增加，白藜蘆醇可抑制關節滑膜NF- κ B ρ65的表達且抑制作用具有劑量依賴性；
[0031](6)、白藜蘆醇對急性痛風性關節炎大鼠關節滑膜組織病理學的改變(HE染色，200倍鏡下，見圖1)，陰性對照組關節滑膜病理切片顯示大量炎性細胞浸潤，秋水仙鹼組、白藜蘆醇低、中、高劑量組炎症細胞浸潤減少，其中以白藜蘆醇高劑量組最顯著。
[0032]表1:各組大鼠關節腫脹度變化(X土s，n=6)
[0033] [0034]
【權利要求】
1.一種治療急性痛風性關節炎的藥物，其特徵在於藥物組份的重量百分比為:白藜蘆醇90~95% ;藻酸鈉3~5% ;澱粉2~3% ;將上述三種原料混合均勻按常規的公知工藝方法製成片狀或粉狀產品， 再加工成形即可。
【文檔編號】A61P19/02GK103536584SQ201310483325
【公開日】2014年1月29日 申請日期:2013年10月16日 優先權日:2013年10月16日
【發明者】王顏剛, 王鵬 申請人:青島大學醫學院附屬醫院