一種高效的馬藺子素製劑及其製備方法
2023-05-05 10:13:51 3
專利名稱：一種高效的馬藺子素製劑及其製備方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，確切地說它是一種高效的馬藺子素製劑及其製備方法。
背景技術：
馬藺子素的化學名稱為馬藺子甲素，6-甲氧基-2-Δ10′-順十七烯-1，4-苯醌。但也含有部分馬藺子乙素。
其結構式為 馬藺子甲素分子式C24H38O3分子量374.56 馬藺子乙素分子式C24H40O3分子量376.58馬藺子素的藥理作用為放射增敏劑，對人宮頸癌、小鼠艾氏腹水瘤、小鼠淋巴細胞白血病等細胞株、荷瘤動物腫瘤及乏氧細胞的生長有放射增敏作用。其作用機制為抑制惡性腫瘤細胞呼吸，降低耗氧量；選擇性降低惡性腫瘤細胞內穀胱甘肽含量；抑制惡性腫瘤細胞DNA合成及斷裂後的修復；阻滯惡性腫瘤細胞生長周期於對射線敏感的G1期。急性毒性馬藺子素一次灌胃LD50為2590.6mg/kg；小鼠一次腹腔注射LD50為35.06±0.99mg/kg。動物中毒症狀為毛松、厭食、稀便，屍檢可見胃腸脹氣。長期毒性1.每日灌胃給予大鼠馬藺子素62.5、125、250mg/kg三個月，結果表明肝功能外(SGPT略有馬藺子素升高)，血象和其它主要生化指標無明顯改變。2.每日灌胃給予狗馬藺子素30mg/kg、60mg/kg兩個月，結果表明主要臟器未見因藥物所導致的實質性損傷。主要毒性為胃腸道反應，且這種反應隨時間延長或減少劑量而自行恢復。致畸試驗結果表明孕鼠口服馬藺子素300mg/kg連續10天，可引起25％的動物死亡，並可引起嚴重的胚胎毒性反應，使大部分孕鼠流產、早期吸收胎，但對胎鼠骨骼臟器並不引起畸形；60mg/kg組動物灌胃10天除部分動物會陰處分泌物增多外，無明顯中毒症狀，停藥後症狀自動消失，胎鼠的骨骼和臟器均不引起畸形，表明馬藺子素為非致畸物。致突變試驗微生物回復突變試驗、姐妹染色體互換試驗、微核試驗表明馬藺子素為非致突變物。帶瘤小鼠口服本品後其血漿濃度呈雙室模型，t1/2α為0.096小時，t1/2β為73.72小時，Vd為0.150L，表明本品吸收速度快，消除時間長；組織分布情況表明，藥物在消化道內滯留時間長，12小時瘤體內放射性最高，24小時血藥濃度仍維持在該水平，肺和胸腺中也有較高放射性，腦和肌肉最低。本品一次給藥後，半小時後尿中已有較高放射性，24小時後糞及尿中的排出率分別為14.8％和30.3％。本品為放射增敏劑，用於放射治療的肺癌、食道癌和頭頸部癌等的放射治療。飯後口服，一日2次，一次2粒，分別於放療前、後服用。小兒酌減。本品應在接受放療前2-3日開始服用，連續服用直至放療結束。不良反應部分患者有輕度胃腸道反應，如噁心、嘔吐、腹瀉等，其發生率較單純放射治療時高，一般不影響繼續用藥，個別反應患者，可減量或對症治療，飯後服用可減少胃的反應。現有劑型為膠囊55mg(以馬藺子甲素和馬藺子乙素總量計)馬藺子素在水中難溶，同時穩定性較差，為了提高水中溶解性和穩定性，有作者將其製成環糊精包絡物(抗癌藥物馬藺子素的β-環糊精包絡物研究藥學學報2002，37(12)963～966)。另外，由於馬藺子素在水中難溶，其口服吸收少(可從灌胃LD50的2590.6mg/kg；小鼠一次腹腔注射LD50為35.06±0.99mg/kg，相差70餘倍)且個體差異大。為了說明注射可行性，有研究人員以小鼠急性累計死亡率法測定表觀藥動學參數，結果表明ip給藥途徑的表觀藥動學參數與灌胃給藥途徑相似，因此採取注射給藥是可行的(馬藺子素的小鼠急性累計死亡率法測定表觀藥動學參數的研究天津藥學2002，14(3)36～37)。
馬藺子素在臨床中應用廣泛(馬藺子素放射增敏的前瞻性研究(附120例臨床分析)中國腫瘤臨床2003，30(5)328～330；馬藺子素對耐順鉑人肺腺癌細胞系ADDP549□耐藥逆轉及可能的機制中華醫學雜誌2001，81(22)1392～1393；馬藺子素在鼻咽癌放療中增敏作用的臨床研究南京醫科大學學報(自然科學版)2001，21(4)328～330；馬藺子素與放療合用治療中晚期鼻咽癌療效分析中國腫瘤臨床2001，28(6)439～440；馬藺子素放射增敏治療食管癌的療效觀察臨床腫瘤學雜誌2000，5(4)272～274；馬藺子素對153SmEDTMP治療鼻咽癌骨轉移瘤的影響中山醫科大學學報1998，19(2)142～143，149)，而且臨床效果顯著，如聯合治療時有效率由10％提高到62.5％；放療全量時，腫瘤全消率由40％提高到80％(馬藺子素膠囊合併放射治療62例食管癌臨床觀察中國腫瘤臨床1999，26(8)639～640)，原發灶及轉移灶有效率，由78.6％，70.0％提高到94.3％，87.5％(安卡膠囊合併放射治療惡性腫瘤140例□期臨床觀察中國腫瘤臨床1999，26(7)547～548)。
血白蛋白在血液中有重要生理功能，和維持血液正常滲透壓有關，是血液總滲透壓的主要調節物質，缺少該白蛋白可能導致機體浮腫。人血白蛋白的另一作用是作為脂肪酸的載體參與運送脂肪酸。可以利用人血白蛋白作為藥物載體，製備納米製劑。
發明內容
本發明的目的是製備一種高效的馬藺子素製劑及其可工業化應用的製備方法。所說的高效馬藺子素製劑包括「脂質體」、「乳劑」、「納米粒」，及其噴霧乾燥或冷凍乾燥粉，所製備的製劑可以口服(根據需要，可以加入藥劑允許範圍的防腐劑、甜味劑、香精)或注射給藥。所說的防腐劑(抑菌劑)為苯甲醇、苯甲酸(及其鹽)、山梨酸(及其鹽)、尼泊金酯類。甜味劑為蔗糖、糖精、阿斯巴甜、蛋白糖等；香精為奶油香精、橘子香精、椰子香精、菠蘿香精等。所說的脂質體系由藥物與磷脂、膽固醇組成，藥物與磷脂、膽固醇組成的比例為1∶5-100∶0-50(W/W/W)，其pH範圍為4-8(在此範圍內藥物難溶解)，粒度範圍為10nm-5000nm。所說的磷脂為PC(磷脂醯膽鹼)含量大於40％的天然磷脂、半合成磷脂或合成磷脂。天然磷脂包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂；半合成磷脂包括氫化大豆卵磷脂(HSPC)、氫化蛋黃卵磷脂；合成磷脂包括DSPC(二硬脂醯磷脂醯膽鹼)、DPPC(二棕櫚醯磷脂醯膽鹼)、DMPC(二肉豆蔻醯磷脂醯膽鹼)、DLPC(二月桂醯磷脂醯膽鹼)、DSPG(二硬脂醯磷脂醯甘油)、DPPG(二棕櫚醯磷脂醯甘油)、DMPG(二肉豆蔻醯磷脂醯甘油)、DLPG(二月桂醯磷脂醯甘油)、PA(磷脂酸)、PI(磷脂醯肌醇)、PS(磷脂醯絲氨酸)。所說的乳劑由藥物與油相、乳化劑、助乳化劑組成，藥物與油相、乳化劑、助乳化劑的組成比例為1∶0.5-500∶1-50∶0-50(W/W/W)，其pH範圍為4-8(在此範圍內藥物難溶解)，粒度範圍為10nm-5000nm。所說的油相為C0-C18的植物油或動物油(包括經過結構改造和水解後的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯(Delios)(稱為中鏈三甘油酯MCT)；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯。乳化劑包括磷脂、HS15(聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660 hydroxystearate)、維生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、吐溫類中的一種或幾種混合物；助乳化劑包括乙醇、甘油、C8-C30的飽和或不飽和脂肪酸，如己酸、辛酸、葵酸、月桂酸、棕櫚酸、(亞)油酸、亞麻油酸、硬脂酸、二十二碳六烯酸(DHA)、膽酸(豬、鵝、熊去氧膽酸)、去氫膽酸及其鹽中的一種或幾種混合物；所說的納米粒包括「脂質納米粒」和「人血白蛋白(包括人血清白蛋白(HSA)、人血漿白蛋白)納米粒」。其中「脂質納米粒」由藥物與磷脂類物質組成，組成比例為1∶10-1000(是否可以改為1∶1-1000實施例11)(W/W)，也可根據需要加入其他合適的成分，如維生素E、HS15(聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660 hydroxystearate)、維生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、DSPE-PEG、Poloxamer 407；其pH範圍為3-9，粒度範圍為5nm-1000nm。「人血白蛋白(包括人血清白蛋白(HSA)、人血漿白蛋白)納米粒」由藥物與人血白蛋白組成，其中馬藺子素與人血白蛋白、油的比例為1∶1-100∶0-10，所說的油為C6-C18的植物油(包括經過結構改造和水解後的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯(Delios)(稱為中鏈三甘油酯MCT)，其pH範圍為3-9，粒度範圍為5nm-1000nm。所說的磷脂類物質包括PC(磷脂醯膽鹼)含量大於40％白蛋白組成，其中馬藺子素與人血白蛋白、油的比例為1∶1～100∶0～10，所說的油為C6～C18的植物油(包括經過結構改造和水解後的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯(Delios)(稱為中鏈三甘油酯MCT)，其pH範圍為3～9，粒度範圍為5nm～1000nm。所說的磷脂類物質包括PC(磷脂醯膽鹼)含量大於40％的天然磷脂、半合成磷脂或合成磷脂。天然磷脂包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂；半合成磷脂包括氫化大豆卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂；合成磷脂包括DSPC(二硬脂醯磷脂醯膽鹼)、DPPC(二棕櫚醯磷脂醯膽鹼)、DMPC(二肉豆蔻醯磷脂醯膽鹼)、DLPC(二月桂醯磷脂醯膽鹼)、DSPG(二硬脂醯磷脂醯甘油)、DPPG(二棕櫚醯磷脂醯甘油)、DMPG(二肉豆蔻醯磷脂醯甘油)、DLPG(二月桂醯磷脂醯甘油)、PA(磷脂酸)、PI(磷脂醯肌醇)、PS(磷脂醯絲氨酸)。所說的可注射給藥的馬藺子素製劑中可加入抗氧化劑，包括丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、維生素C、維生素C棕櫚酸酯、亞硫酸(氫)鈉、惰性氣體(氮氣、氬氣)、EDTA(2Na、或鈉鈣鹽)中的一種或幾種混合物。所說的冷凍乾燥粉針劑涉及的凍幹保護劑為葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、甘氨酸、琥珀明膠、人血白蛋白、氯化鈉等中的一種或幾種混合物，凍幹保護劑的含量為2％～20％(W/V，凍幹前溶液中保護劑的濃度)。所述的注射劑製備方法，以乳劑為例說明如下1)在配製罐中製備油相(藥物相)在配製罐中，將注射用油加熱至20-90℃(單純藥物時不加油)，加入乳化劑，20～80℃時強烈攪拌至溶解；再降溫至20～40℃，在攪拌中加入藥物。2)在配製罐中製備水相將水和甘油在20～90℃下攪拌5min，使之完全混溶。3)在20～50℃時，將水相加入油相中，強烈攪拌10～30min，形成初乳。4)將初乳過G3漏鬥抽濾，調節pH值到4～8。5)過均質儀，第一步調節勻化壓力至520～600kg/cm2，第二步再調節至100～140kg/cm2(或微射流儀，第一步調節勻化壓力至4000-8000psi，第二步再調節至10000-16000psi)，形成乳劑。過0.8um或0.8um以下的微孔濾膜，分裝(加入保護劑，進行冷凍乾燥，或進行噴霧乾燥)，即得乳劑。
本發明的優點是小鼠體內試驗結果表明，本發明所製備的製劑吸收速度和程度遠遠好於市售製劑，血藥濃度高於市售製劑(實施例2的脂質體、實施例7的乳劑、實施例14的納米粒，其相對於市售製劑的生物利用度均大於200％)，維持的時間亦長於市售製劑。抗小鼠艾氏腹水瘤的療效也優於市售製劑。
具體實施例方式本發明的詳細組分由下列實施例給出，但本發明的保護範圍，不僅局限於此。
粒度測定儀本實驗中應用PSS.NICOMPTM380作為測定粒徑的儀器。
微射流儀(Microfluidic公司，美國)，均質機等。
HPLC分析色譜柱ODS柱；流動相甲醇-水-乙腈-乙醚(65∶25∶20∶20)；檢測波長270nm；流速1mL/分鐘。50μl。
實施例1 馬藺子素脂質體組分重量(克)馬藺子素1大豆卵磷脂 5乙醇適量檸檬酸緩衝液加至100製備工藝稱取處方量的馬藺子素、大豆卵磷脂，用適量乙醇溶解後，加入檸檬酸緩衝液(0.01mol/L，pH4.0)，40℃下攪拌水化，過均質機(或微射流)(第一步調節勻化壓力520～600kg/cm2，第二步再調節100～140kg/cm2。微射流儀，第一步調節勻化壓力至4000-8000psi，第二步再調節至10000-16000psi)得馬藺子素脂質體，其粒度為15nm～550nm。所得脂質體液體可加入12％(W/V)的海藻糖進行冷凍乾燥，得凍幹脂質體。復溶後，其粒度為10nm～710nm。所得製劑可以口服或注射。
實施例2 馬藺子素脂質體組分 重量(克)馬藺子素 1大豆卵磷脂 50乙醇 適量α-生育酚0.1磷酸鹽緩衝液 加至1000製備工藝稱取處方量的馬藺子素、大豆卵磷脂、α-生育酚，用適量乙醇溶解後，加入磷酸鹽緩衝液(0.01mol/L，pH5.0)，40℃下攪拌水化，過均質機(或微射流)，第一步調節勻化壓力520kg/cm2，第二步再調節100kg/cm2(或微射流儀，第一步調節勻化壓力至4000psi，第二步再調節至10000psi)，得馬藺子素脂質體，過0.22um微孔濾膜，其粒度為25nm～430nm，包封率大於90％。所得脂質體液體可加入6％(W/V)的甘露醇和1％(W/V)的葡萄糖進行冷凍乾燥，得凍幹脂質體，每支5mg馬藺子素(或真空壓蓋)。復溶後，其粒度為20nm～710nm。所得製劑可以口服(可以加入0.1％的苯甲酸鈉)或注射。
實施例3馬藺子素脂質體組分 重量(克)馬藺子素 1蛋黃卵磷脂20膽固醇1α-硫辛酸 0.5乙醇 適量醋酸鹽緩衝液 加至1000
製備工藝稱取處方量的馬藺子素、蛋黃卵磷脂、膽固醇、α-硫辛酸，用適量乙醇溶解後，採用乙醇注入法加入磷酸鹽緩衝液(0.03mol/L，pH6.0)中，50℃下攪拌水化，過均質機(或微射流)，第一步調節勻化壓力至600kg/cm2，第二步再調節至100kg/cm2(或微射流儀，第一步調節勻化壓力至5000psi，第二步再調節至10000psi)，得馬藺子素脂質體，其粒度為10nm～820nm，過0.22um微孔濾膜，包封率大於90％。所得脂質體液體可加入10％(W/V)的蔗糖、5％(W/V)的乳糖進行冷凍乾燥，即得凍幹脂質體；或進行噴霧乾燥，得前體脂質體。分裝充氮氣，得脂質體製劑，每支5mg馬藺子素(或真空壓蓋)。復溶後，其粒度為20nm～780nm。所得製劑可以口服(可以加入0.1％的苯甲酸鈉、0.05％尼泊金乙酯)或注射。
實施例4馬藺子素脂質體組分 重量(克)馬藺子素1DSPG100膽固醇 50維生素C棕櫚酸酯 0.2乙醇適量磷酸鹽緩衝液加至5000製備工藝稱取處方量的馬藺子素、DSPG、膽固醇維生素C棕櫚酸酯，用適量乙醇溶解後，採用乙醇注入法加入磷酸鹽緩衝液(0.03mol/L，pH7.0)中，50℃下攪拌水化，過均質機(或微射流)，第一步調節勻化壓力至600kg/cm2，第二步再調節140kg/cm2(或微射流儀，第一步調節勻化壓力至8000psi，第二步再調節至16000psi)，得馬藺子素脂質體，過0.3um微孔濾膜，其粒度為20nm～900nm，包封率大於80％。所得脂質體液體可加入20％(W/V)的蔗糖進行冷凍乾燥，即得凍幹脂質體；或進行噴霧乾燥，得前體脂質體。分裝充氮氣，得脂質體製劑，每支10mg馬藺子素(或真空壓蓋)。復溶後，其粒度為20nm～800nm。所得製劑可以口服或注射。
實施例5馬藺子素脂質體組分重量(克)馬藺子素1HSPC10DMPC20乙醇適量注射用水加至1000ml製備工藝稱取處方量的馬藺子素、HSPC、DMPC，用適量乙醇溶解後，加入注射用600ml，無菌環境中，50℃下攪拌水化，得馬藺子素脂質體，其粒度為362nm～5000nm，包封率大於90％。分裝充氮氣，得脂質體製劑，每支5mg含馬藺子素(或真空壓蓋)。
實施例6馬藺子素乳劑組分重量(克)馬藺子素1大豆油 0.5磷脂10油酸0.05甘油2.4注射用水加至200ml製備工藝1)在配製罐中製備油相(藥物相)在配製罐中，加入(注射用)大豆油、油酸(20℃)，加入乳化劑磷脂，50℃時強烈攪拌至溶解；再降溫至40℃，在攪拌中加入藥物。2)在配製罐中製備水相將水和甘油在90℃下攪拌5min，使之完全混溶。3)在50℃時，將水相加入油相中，強烈攪拌30min，形成初乳。4)將初乳過G3漏鬥抽濾。5)過均質儀，第一步調節勻化壓力至520kg/cm2，第二步再調節140kg/cm2(或微射流儀，第一步調節勻化壓力4000psi，第二步再調節至10000psi)，形成乳劑，調節pH值至4。過0.3um微孔濾膜，分裝、充氮氣，每支1ml(含藥物5mg)、每支2ml(含藥物10mg)或每支10ml(含藥物50mg)，滅菌，即得(注射用)乳劑。粒度為10nm～1000nm，平均粒度152nm。加入20％(W/V)乳糖，溶解後進行冷凍乾燥，即得凍幹乳劑；或進行噴霧乾燥，得前體乳劑。分裝充氮氣，每支5mg馬藺子素。所得製劑可以口服或注射。
實施例7馬藺子素乳劑組分重量(千克)馬藺子素1辛葵酸甘油酯20HS152磷脂10甘油12注射用水加至1000製備工藝1)在配製罐中製備油相(藥物相)在配製罐中，加入(注射用或口服級)辛葵酸甘油酯(50℃)，加入乳化劑磷脂、HS15，80℃時強烈攪拌至溶解；再降溫30℃，在攪拌中加入藥物。2)在配製罐中製備水相將水和甘油在90℃下攪拌5min，使之完全混溶。3)在40℃時，將水相加入油相中，強烈攪拌30min，形成初乳。4)將初乳過G3漏鬥抽濾，調節pH值到6。5)過均質儀，第一步調節勻化壓力至450kg/cm2，第二步再調節至120kg/cm2(或微射流儀，第一步調節勻化壓力至6000psi，第二步再調節12000psi)，形成乳劑。過0.3um微孔濾膜，分裝、充氮氣，每支3ml(含藥物3mg)或每支6ml(含藥物6mg)，滅菌，即得注射用乳劑。粒度為50nm～700nm，平均粒度178nm。所得乳劑中可加入20％(W/V)的蔗糖進行冷凍乾燥，即得凍幹乳劑；或進行噴霧乾燥，得前體乳劑。分裝充氮氣，每支5mg馬藺子素。復溶後，其粒度為65nm～960nm。所得製劑可以口服(可以加入0.1％的苯甲酸鈉、0.05％尼泊金乙酯、奶油香精)或注射。
實施例8馬藺子素乳劑組分重量(克)馬藺子素1椰子油 10TPGS10甘油12α-生育酚 1注射用水加至1000製備工藝操作同實施例7，粒度為20nm～750nm，平均粒度89nm。每支5ml(含藥物5mg)或每支10ml(含藥物10mg)(充氬氣)。所得乳劑中可加入8％(W/V)的甘露醇、2％木糖醇進行冷凍乾燥，即得凍幹乳劑；或進行噴霧乾燥，得前體乳劑。分裝充氮氣，每支5mg馬藺子素。復溶後，其粒度為15nm～680nm。所得製劑可以口服(0.1％尼泊金乙酯、0.05％尼泊金丙酯、蛋白糖、椰子香精)或注射。
實施例9馬藺子素乳劑組分重量(克)馬藺子素0.1辛葵酸甘油酯50大豆油 0.5TPGS10Poloxamer 407 5甘油2.4α-硫辛酸 1注射用水加至200製備工藝操作同實施例7，粒度為50nm～1060nm。每支10ml(含藥物5mg)(氬氣)。所得製劑可以口服或注射。
實施例10馬藺子素乳劑組分重量(千克)馬藺子素1油酸乙酯10磷脂2HS152DHA 10
甘油1.2α-硫辛酸 0.2注射用水加至200製備工藝操作同實施例7，pH8，無菌操作，粒度為100nm～5000nm。每支1ml(含藥物5mg)或每支2ml(含藥物10mg)，(充氬氣)。加入6％甘露醇、6％木糖醇，凍幹或噴霧乾燥得固體粉末。所得製劑可以口服或注射。
實施例11馬藺子素納米粒組分重量(克)馬藺子素1大豆卵磷脂 10HS155乙醇適量α-硫辛酸 1甘油2水 加至1000製備工藝稱取處方量的馬藺子素、磷脂、HS15、α-硫辛酸，置於配料罐中，加入乙醇，於50℃加熱溶解後，加入水(含甘油)攪拌、分散，調pH至4，過均質機(或微射流)，第一步調節勻化壓力至600kg/cm2，第二步再調節至140kg/cm2(或微射流儀，第一步調節勻化壓力至8000psi，第二步再調節至16000psi)，得馬藺子素納米液體，過0.22μm微孔濾膜除菌，分裝，每支10ml(含藥物10mg)(充氬氣)。測定粒度為5nm～500nm。所得液體中加入10％蔗糖，進行噴霧乾燥或冷凍乾燥，得無菌粉末。噴霧乾燥或冷凍乾燥所得固體再水化後的粒度為10nm～1000nm。所得製劑可以口服或注射。
實施例12馬藺子素納米粒組分重量(克)馬藺子素 0.1蛋黃卵磷脂100氫化大豆卵磷脂1乙醇 適量維生素E 1甘油 30甘露醇50水加至1000製備工藝稱取處方量的馬藺子素、磷脂、維生素E、氫化大豆卵磷脂，置於配料罐中，加入乙醇，於60℃加熱溶解後，備用。另外稱取處方量的甘露醇、甘油，加入水溶解後，與上述馬藺子素磷脂溶液混合，攪拌水化，調pH至6，過均質機(或微射流)，第一步調節勻化壓力至500kg/cm2，第二步再調節至120kg/cm2(或微射流儀，第一步調節勻化壓力至6000psi，第二步再調節至13000psi)，得馬藺子素納米液體。其粒度為5nm～300nm。過0.22μm微孔濾膜除菌，分裝，充氮氣。所得液體進行噴霧乾燥或冷凍乾燥，得無菌粉末。再水化後的粒度為10nm～400nm。所得製劑可以口服或注射。
實施例13馬藺子素納米粒組分重量(克)馬藺子素0.1人血白蛋白 3二氯甲烷適量製備工藝稱取處方量的馬藺子素，用二氯甲烷溶解，製成100mg/ml的溶液，備用。取市售的人血白蛋白(25％)用注射用水稀釋成5％的溶液，並用鹽酸調節pH值為5.5，備用。於0℃下將馬藺子素二氯甲烷溶液與人血白蛋白溶液混合，過均質機(或微射流)，第一步調節勻化壓力至600kg/cm2，第二步再調節至140kg/cm2(或微射流儀，第一步調節勻化壓力至6000psi，第二步再調節至36000psi)，得馬藺子素納米液體。其粒度為5nm～550nm。過0.22μm微孔濾膜除菌，分裝，冷凍乾燥，得無菌粉末。再水化(生理鹽水或滅菌注射用水)後的平均粒度為170nm。可以用不同的比例，不同的酸，如檸檬酸、磷酸、酒石酸、醋酸代替鹽酸，pH值為3～8，可以得到類似結果。所得製劑可以口服或注射。
實施例14馬藺子素納米粒組分重量(克)馬藺子素 1蛋黃卵磷脂30乙醇 適量維生素E 1去氧膽酸 10甘露醇50葡萄糖10水加至1000製備工藝稱取處方量的馬藺子素、磷脂、維生素E、去氧膽酸，置於配料罐中，加入乙醇，於50℃加熱溶解後，備用。另外稱取處方量的甘露醇、葡萄糖，加入水溶解後，與上述馬藺子素磷脂溶液混合，攪拌水化，調pH至8，過均質機(或微射流)，第一步調節勻化壓力至600kg/cm2，第二步再調節至140kg/cm2(或微射流儀，第一步調節勻化壓力至7000psi，第二步再調節至26000psi)，得馬藺子素納米液體。其粒度為5nm～500nm。過0.22μm微孔濾膜除菌，分裝，每支5ml(含藥物(充氮氣)。所得液體進行噴霧乾燥或冷凍乾燥，得無菌粉末。再水化後的粒度為10nm～500nm。所得製劑可以口服或注射。
權利要求
1.一種高效的馬藺子素製劑，其特徵在於將馬藺子素製劑製成「脂質體」、「乳劑」、「納米粒」，及其噴霧乾燥或冷凍乾燥粉，製劑中可以加入藥劑允許範圍的防腐劑、甜味劑、香精，所製備的製劑可以口服或注射給藥。
2.根據權利要求1中所說的一種高效的馬藺子素製劑，其特徵在於防腐劑或稱抑菌劑為苯甲醇、苯甲酸或其鹽、山梨酸或其鹽、尼泊金酯類；甜味劑為蔗糖、糖精、阿斯巴甜、蛋白糖等；香精為奶油香精、橘子香精、椰子香精、菠蘿香精。
3.根據權利要求1中所說的一種高效的馬藺子素製劑，其特徵在於所說的脂質體系由藥物與磷脂、膽固醇組成，藥物與磷脂、膽固醇組成的比例為1∶5～100∶0～50(W/W/W)，其pH範圍為4～8，粒度範圍為5nm～5000nm，脂質體製備方法為乙醇注入法，或乙醇溶解分散法。
4.根據權利要求3中所說的一種高效的馬藺子素製劑，其特徵在於所說的磷脂為PC或稱磷脂醯膽鹼含量大於40％的天然磷脂、半合成磷脂或合成磷脂，天然磷脂包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂；半合成磷脂包括氫化大豆卵磷脂HSPC、氫化蛋黃卵磷脂；合成磷脂包括DSPC二硬脂醯磷脂醯膽鹼、DPPC二棕櫚醯磷脂醯膽鹼、DMPC二肉豆蔻醯磷脂醯膽鹼、DLPC二月桂醯磷脂醯膽鹼、DSPG二硬脂醯磷脂醯甘油、DPPG二棕櫚醯磷脂醯甘油、DMPG二肉豆蔻醯磷脂醯甘油、DLPG二月桂醯磷脂醯甘油、PA磷脂酸、PI磷脂醯肌醇、PS磷脂醯絲氨酸。
5.根據權利要求1中所說的一種高效的馬藺子素製劑，其特徵在於所說的乳劑由藥物與油相、乳化劑、助乳化劑組成，藥物與油相、乳化劑、助乳化劑的組成比例為1∶0.5～500∶1～50∶0～50(W/W/W)，其pH範圍為4～8，粒度範圍為10nm～5000nm。
6.根據權利要求1中所說的一種高效的馬藺子素製劑，其特徵在於所說的油相為C6～C18的植物油或動物油、甘油三酸酯，椰子油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯或稱為中鏈三甘油酯MCT；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯。乳化劑包括磷脂、HS15TPGS、DSPE-PEG、Poloxamer 407、吐溫類中的一種或幾種混合物；助乳化劑包括乙醇、甘油、C6～C30的飽和或不飽和脂肪酸，如己酸、辛酸、葵酸、月桂酸、棕櫚酸、油酸或亞油酸、亞麻油酸、硬脂酸、二十二碳六烯酸DHA、膽酸、去氧膽酸、去氫膽酸及其鹽中的一種或幾種混合物；
7.根據權利要求1中所說的一種高效的馬藺子素製劑，其特徵在於所說的納米粒包括「脂質納米粒」和「人血白蛋白納米粒」；其中「脂質納米粒」由藥物與磷脂類物質組成，組成比例為1∶1～1000(W/W)，也可根據需要加入維生素E、HS15即聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯、維生素E聚乙二醇琥珀酸酯即TPGS、DSPE-PEG、Poloxamer 407；其pH範圍為3～9，粒度範圍為5nm～1000nm；「人血白蛋白納米粒」由藥物與人血白蛋白組成，其中馬藺子素與人血白蛋白、油的比例為1∶1～100∶0～10，所說的油為C6～C18的植物油、甘油三酸酯，如椰子油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯或稱為中鏈三甘油酯MCT，其pH範圍為3～9，粒度範圍為5nm～1000nm。
8.根據權利要求7中所說的一種高效的馬藺子素製劑，其特徵在於所說的磷脂類物質包括磷脂醯膽鹼，含量大於40％的天然磷脂、半合成磷脂或合成磷脂；天然磷脂包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂；半合成磷脂包括氫化大豆卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂；合成磷脂包括DSPC二硬脂醯磷脂醯膽鹼、DPPC二棕櫚醯磷脂醯膽鹼、DMPC二肉豆蔻醯磷脂醯膽鹼、DLPC二月桂醯磷脂醯膽鹼、DSPG二硬脂醯磷脂醯甘油、DPPG二棕櫚醯磷脂醯甘油、DMPG二肉豆蔻醯磷脂醯甘油、DLPG二月桂醯磷脂醯甘油、PA磷脂酸、PI磷脂醯肌醇、PS磷脂醯絲氨酸。
9.根據權利要求1中所說的一種高效的馬藺子素製劑，其特徵在於所說的馬藺子素製劑中可加入抗氧化劑，包括丁基羥基茴香醚BHA、二丁基羥基甲苯BHT、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、維生素C、維生素C棕櫚酸酯、亞硫酸鈉或亞硫酸氫鈉、惰性氣體、EDTA 2Na、或鈉鈣鹽中的一種或幾種混合物；所說的噴霧乾燥或冷凍乾燥粉針劑涉及的凍幹保護劑為葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、甘氨酸、琥珀明膠、人血白蛋白、氯化鈉中的一種或幾種混合物，凍幹保護劑的含量為2％～20％(W/V)，凍幹前溶液中保護劑的濃度。
10.一種如權利要求1中所說的一種高效的馬藺子素製劑的製備方法，其特徵在於乳劑製備方法如下1)在配製罐中製備油相既藥物相，在配製罐中，將油加熱至20-90℃單純藥物時不加油，加入乳化劑，20～80℃時強烈攪拌至溶解；再降溫至20～40℃，在攪拌中加入藥物，2)在配製罐中製備水相將水和甘油在20～90℃下攪拌5min，使之完全混溶，3)在20～50℃時，將水相加入油相中，強烈攪拌10～30min，形成初乳；4)將初乳過G3漏鬥抽濾，調節pH值到3～9，5)過均質儀，第一步調節勻化壓力至520～600kg/cm2，第二步再調節至100～140kg/cm2或過微射流儀，第一步調節勻化壓力至4000-8000psi，第二步再調節至10000-16000psi，形成乳劑；過0.8um或0.8um以下的微孔濾膜，加入保護劑，進行冷凍乾燥，或進行噴霧乾燥，分裝，即得乳劑。
全文摘要
本發明是一種高效的馬藺子素製劑及其製備方法，它是將馬藺子素製劑製成「脂質體」、「乳劑」、「納米粒」，及其噴霧乾燥或冷凍乾燥粉，製劑中可以加入藥劑允許範圍的防腐劑、甜味劑、香精、所製備的製劑可以口服或注射給藥。脂質體系由藥物與磷脂、膽固醇組成，藥物與磷脂、膽固醇組成的比例為1∶5～100∶0～50(W/W/W)，其pH範圍為4～8，粒度範圍為5nm～5000nm。製備方法如下1.在配製罐中製備油相，2.在配製罐中製備水相，3.將水相加入油相中，形成初乳，4.將初乳過G
文檔編號A61K31/122GK1706371SQ20051004652
公開日2005年12月14日 申請日期2005年5月27日 優先權日2005年5月27日
發明者鄧意輝, 吳紅兵, 徐速, 吳瓊 申請人:瀋陽藥科大學