一種海藻多糖的提取方法

2023-04-23 07:21:21 2

一種海藻多糖的提取方法
【專利摘要】一種海藻多糖的提取方法屬海洋生物醫藥領域。按照以下步驟進行：（1）將海藻去雜洗淨，乾燥後粉碎；（2）稱取100g海藻粉末,加70~90%乙醇回流提取4~6小時,過濾,藥渣乾燥後,加水超聲提取5次,每次10min過濾,合併濾液於80~90℃濃縮至比重為1.03，醇,18~24h?醇沉濃度為80%；離心過濾得沉澱物，沉澱物反覆水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次後得海藻多糖粗提物；（3）粗提物經活性碳脫色,Sevage法脫蛋白,流水透析法脫小分子,醇沉,真空乾燥得海藻多糖。本發明一種海藻多糖的提取方法，方法簡便快速,重現性好,回收率高。
【專利說明】一種海藻多糖的提取方法
【技術領域】
[0001]本發明屬海洋生物醫藥領域，特別涉及一種海藻多糖的提取方法。
【背景技術】
[0002]海藻為海產藻類植物的通稱。中藥海藻為馬尾藻科海蒿子或羊棲菜的乾燥藻體，具有軟堅散結，消痰利水的功能。臨床用於治療癭瘤，睪丸腫痛，痰飲水腫等症。現代研究表明，海藻具有增強免疫能力、抑制病毒和抗腫瘤的活性等作用。這些生物活性與其所含的海藻多糖密切相關。據報導海藻多糖是自然界廣泛分布的一種非還原性雙糖。其分子結構獨特，化學性質穩定。海藻多糖是一類高效的生物吸附劑，海澡多糖具有降血脂、抗氧化、免疫調節等作用，海藻多糖衍生物可作為細胞物質的寒冷保護介質。海藻糖這些奇妙的生物學特性，使其在醫藥、食品、化妝品、農業等方面具有廣闊的應用前景。海藻多糖的開發已成為國際範圍的研究熱點。

【發明內容】
[0003]本發明提供一種海藻多糖的提取方法，按照以下步驟進行:
(1)將海藻去雜洗淨，乾燥後粉碎；
(2)稱取100g海藻粉末，加70-90%乙醇回流提取4飛小時，過濾，藥渣乾燥後，加水超聲提取5次，每次IOmin過濾，合併濾液於80~90 °C濃縮至比重為1.03，醇，18~24h醇沉濃度為80% ;離心過濾得沉澱物，沉澱物反覆水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次後得海藻多糖粗提物；
(3)粗提物經活性碳脫色，Sevage法脫蛋白，流水透析法脫小分子，醇沉，真空乾燥得海藻多糖。
[0004]海藻多糖的含量測定按照以下方法進行:
標準曲線製作:精密稱取葡萄糖標準品12.50mg溶於100ml的容量瓶中，得到0.1250mg/ ml的葡萄糖標準溶液。從標準溶液中，分別吸取0.0,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8、0.9、1.0ml,加水至lml。再加10%的苯酹溶液lml、濃硫酸5ml,搖勻後放置5min,置沸水浴放置15min，取出冷卻至室溫。在490nm測其吸光度。得吸光度與濃度的回歸方程:A= 53186C+ 010108。 ( r= 019990)。
[0005]穩定性實驗稱取:取已知濃度的多糖溶液0.5ml,加水至lml,迅速加Iml 10%的苯酹溶液、5ml濃硫酸，搖勻後放置5min,置沸水浴放置15min,取出冷卻至室溫。在490nm測其吸光度。實驗中發現其吸光度在0- 25min內穩定。
[0006]回收率試驗:吸取5份已知濃度的海藻多糖溶液，各加標準葡萄糖溶液，依法測定吸光度，由回歸方程計算回收率。經計算，其回收率為95%以上，海藻多糖含量提取率為 4.26~4.36%ο
[0007]本發明從海藻中提取海藻多糖，並可根據其具有較強的生物吸附能力、降血脂、抗氧化、增強免疫調節活性等，將其開發成功能食品及藥品，或製備微膠囊。海藻多糖將可能成為人類主要的藥物資源。海藻多糖的含量測定採用傳統的苯酚-硫酸法，方法簡便，回收率高，重現性好，數據可信。
[0008]本發明一種海藻多糖的提取方法，方法簡便快速，重現性好，回收率高。
【具體實施方式】
[0009]本發明所用海藻為浙江象山產，所用化學試劑為市購。[0010]實施例1
一種海藻多糖的提取方法，按照以下步驟進行:
(1)將海藻去雜洗淨，乾燥後粉碎；
(2)稱取100g海藻粉末，加90%乙醇回流提取4小時，過濾，藥渣乾燥後，加水超聲提取5次，每次IOmin過濾，合併濾液於80~90 °C濃縮至比重為1.03，醇，24h醇沉濃度為80% ;離心過濾得沉澱物，沉澱物反覆水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次後得海藻多糖粗提物；
(3)粗提物經活性碳脫色，Sevage法脫蛋白，流水透析法脫小分子，醇沉，真空乾燥得海藻多糖4.36g.實施例2
一種海藻多糖的提取方法，按照以下步驟進行:
(1)將海藻去雜洗淨，乾燥後粉碎；
(2)稱取100g海藻粉末，加70%乙醇回流提取4小時，過濾，藥渣乾燥後，加水超聲提取5次，每次IOmin過濾，合併濾液於80 °C濃縮至比重為1.03，醇，18~24h醇沉濃度為80% ;離心過濾得沉澱物，沉澱物反覆水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次後得海藻多糖粗提物；
(3)粗提物經活性碳脫色，Sevage法脫蛋白，流水透析法脫小分子，醇沉，真空乾燥得海藻多糖4.34g。
[0011]實施例3
一種海藻多糖的提取方法，按照以下步驟進行:
(1)將海藻去雜洗淨，乾燥後粉碎；
(2)稱取100g海藻粉末，加80%乙醇回流提取5小時，過濾，藥渣乾燥後，加水超聲提取5次，每次IOmin過濾，合併濾液於85 °C濃縮至比重為1.03，醇，18~24h醇沉濃度為80% ;離心過濾得沉澱物，沉澱物反覆水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次後得海藻多糖粗提物；
(3)粗提物經活性碳脫色，Sevage法脫蛋白，流水透析法脫小分子，醇沉，真空乾燥得海藻多糖4.26g。
【權利要求】
1.一種海藻多糖的提取方法，其特徵在於按照以下步驟進行: (1)將海藻去雜洗淨，乾燥後粉碎； (2)稱取100g海藻粉末，加70-90%乙醇回流提取4飛小時，過濾，藥渣乾燥後，加水超聲提取5次，每次IOmin過濾，合併濾液於80~90 °C濃縮至比重為1.03，醇，18~24h醇沉濃度為80% ;離心過濾得沉澱物，沉澱物反覆水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次後得海藻多糖粗提物； (3)粗提物經活性碳脫色，Sevage法脫蛋白，流水透析法脫小分子，醇沉，真空乾燥得海藻多糖。
【文檔編號】C08B37/00GK103739726SQ201310622054
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年11月30日 優先權日:2013年11月30日
【發明者】陳宏 , 劉晶營, 時慧, 李朋 申請人:青島海之林生物科技開發有限公司