一種快速乳酸檢測卡的製作方法

2023-05-09 21:29:01 1

專利名稱：一種快速乳酸檢測卡的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種乳酸檢測卡，尤其是涉及一種測定血液中乳酸含量的快速乳酸檢 測卡。
背景技術：
乳酸(lactic acid)是糖酵解途徑的終產物。當機體缺氧時，細胞通過無氧代謝 生成ATP。為了能再生成足夠的NAD，使糖代謝作用得以繼續，乳酸脫氫酶通過將糖酵解途 徑產生的丙酮酸還原為乳酸，使NADH氧化。在組織缺氧期間肌肉累積的乳酸釋放在血循環 中，通過肝臟代謝。血清乳酸的正常值為1.0士0. 5mmol/L，小於2mmol/L均可視為正常，大於此值即
可診斷為「高乳酸血症」。乳酸升高見於糖尿病酮症酸中毒、腎衰竭、循環衰竭等缺氧和低灌 注狀態。乳酸酸血症的嚴重程度常提示病症的嚴重性，當乳酸水平10. 5mmol/L時，存活率 僅有30%。對於血氣分析無法解釋的代謝性酸中毒及陰離子隙升高，必須考慮檢測乳酸，吸 人大量丙二醇導致乳酸酸中毒。乳酸廣泛運用於臨床醫學，產房現場檢測，及時發現和診斷新生兒宮內缺氧；急 診現場、急診病人的血氣檢測；手術現場，麻醉病人的氧氣供應及酸中毒監測的指標；病床 前，高能輸液的酸中毒症監測及糖原性疾病患者的代謝監測；醫院內，高血壓及糖尿病等慢 性病人的運動監護。同時廣泛應用於體育界(運動醫學)判斷個性化的體內乳酸代謝狀 態，科學選拔體育人才；運動中多採點間隔性乳酸測定，為科學合理的強度訓練提供重要依 據。指導練就選手體內耐乳酸環境，為提高運動成績提供客觀條件。近年來，也應用於康復 醫學。乳酸測定方法有化學法和酶法，化學法準確性差，操作煩雜，不能自動化。酶法有 脫氫酶法和氧化酶法，脫氫酶法紫外法和偶連四氮唑鹽的比色法，脫氫酶法還存在諸多問 題，不能解決。如用乳酸脫氫酶將乳酸氧化成丙酮酸的同時NAD還原成NADH，但需要偶聯 ALT和穀氨酸將底物丙酮酸除去以加速反應，或偶聯PMS和NBT用比色測定，但反應無終點。 乳酸氧化酶法靈敏度高，精確度和準確性均很好，適合自動分析，但該方法存在的問題是需 要使用大型血液生化分析儀或紫外分光光度計等特殊裝置，測定所需血量較多、時間較長， 價格昂貴，適合在大型醫院或實驗室中進行。近年出現了不需生化分析儀等特殊裝置的乳酸檢測試紙，例如專利號為 03129094. 9的中國專利公開了一種全血乳酸濃度檢測試紙，用波長590nm的光源照射顏色 區，用光電轉換器接收來自顏色區的反射光，反射光的強度與顏色的深淺成反比，而顏色的 深淺反應被測血液樣品中乳酸的濃度。專利號為200410048302. 2的中國專利公開了一種 全血乳酸檢測試條，是一種電化學生物傳感器，其以一絕緣基片做基底，在基底上縱向有一 對互相平行的金屬薄膜導電帶，兩導電帶的一端為接入端，在兩導電帶上覆有隔離片；隔離 片與基底同寬，但短於基底，以露出兩接入端；隔離片上有一個槽，並露出部分絕緣基片和 其上的兩部分導電帶，暴露的兩部分導電帶形成工作電極和對電極，在工作電極和對電極上覆設有反應試劑層，隔離片上固接一上絕緣基片，其與隔離片同寬，上絕緣基片將隔離片 上的槽覆蓋，圍成一兩端敞口的毛細管腔體，腔體為傳感器的反應區。該發明的反應區在不 需要人工幹預的情況下即可固定被檢測血液的體積，並使微量血液快速進入與反應試劑反 應，在短時間內測出血液中乳酸的含量。這些乳酸檢測試紙雖然不需要配套特殊裝置，但仍 需要配套小型的光學檢測或傳感檢測裝置，生產成本較高，價格較昂貴
發明內容

本發明所要解決的技術問題是為病人居家、小型診所提供一種無需依賴任何裝 置、方便、快速、廉價測定血液乳酸含量的快速乳酸檢測卡。本發明為解決其技術問題所採取的技術方案是一種快速乳酸檢測卡，包括殼 體、試紙系統、溶液體系、加液機構，其特徵是殼體包括上蓋和下蓋，殼體上設有採血孔， 殼體內設有接收墊；試紙系統包括一套置於殼體腔室內的引液試紙、反應試紙與顯色試紙； 溶液體系中所含溶液的主要成分是過氧化物酶溶液。為了使在測量結束的時候能夠顯示結果，所述殼體近頂端處設有結束指示孔，指 示孔下方的顯色試紙上含有水溶性終點指示劑。為了能夠過濾全血得到血漿，所述採血孔上覆蓋有至少兩層過濾網。所述接收墊有兩個工作位置，當接收墊處於採血位時，接收墊位於採血孔的正下 方；當接收墊處於層析位時，所述接收墊位於引液試紙及反應試紙的下方，其兩端承接於兩 側試紙，且重疊0. 5mm 1. 5mm ；所述接收墊定量吸收的血漿體積彡10 μ L。所述的反應試紙上包含有乳酸氧化酶，乳酸氧化酶的濃度為> 2U/cm2。為了能夠方便讀出所要的結果，所述顯色試紙上方的上殼體設有觀察窗，觀察窗 上標設有刻度線，並有刻度標識。所述的過氧化物酶濃度彡0. 6U/mL。為了溶液體系用起來方便，所述的溶液體系置於殼體腔內或者殼體腔外。為了方便加液，所述的加液機構包括在殼體內設有帶針刺部的滑動件。由於上述技術方案運用，本發明與現有技術相比具有下列優點1、本發明結合了血液過濾、酶反應和層析顯色技術，因此可以實現對血液中的乳 酸的即時測定。2、本發明結構簡單，無須配套儀器使用，使用方便，成本低，符合POCT(point of care testing，即時檢測)的應用趨勢。


圖1是本發明實施例一的結構示意圖；圖2是本發明實施例一的後視圖；圖3是本發明實施例一在打開上蓋後的示意圖；圖4是本發明實施例一中的檢測結果圖。1、上蓋2、採血孔3、溶液孔4、觀察窗5、結束指示孔6、下蓋7、滑動件8、接收墊9、引液試紙10、反應試紙11、顯色試紙
具體實施例方式下面結合附圖及實施例對本發明作進一步描述實施例一如圖1、圖2和圖3所示，一種快速乳酸檢測卡，包括殼體、試紙系統、溶液體系、 加液機構，殼體包括上蓋1和下蓋6，殼體上設有採血孔2、溶液孔3和結束指示孔5，殼 體內 設有接收墊8和帶尖刺的滑動件7 ；試紙系統包括一套置於殼體腔室內的引液試紙9、反應 試紙10與顯色試紙11 ；溶液體系中所含溶液的主要成分是過氧化物酶溶液，過氧化物酶濃 度> 0.6U/mL，所述溶液體系可置於殼體腔室內或殼體腔室外。在殼體內設有一帶有針刺 部的滑動件7，拉動滑動件7刺破溶液包，釋放溶液與引液試紙9接觸或者加一個溶液注入 孔，將溶液管中的溶液通過注入孔注入，與弓I液試紙9接觸。所述採血孔2上覆蓋有至少兩層過濾網，可過濾全血得到血漿；對應於顯色試紙 11上方的上殼體設有觀察窗4，觀察窗4上標設有刻度線，並有刻度標識；所述殼體近頂端 處設有結束指示孔5，結束指示孔5下方的顯色試紙11上含有水溶性終點指示劑，當顯色試 紙11顯色完畢後，剩餘溶液層析至結束指示孔5處，結束指示孔5處將出現指示劑顏色，表 明檢測已經結束並可以進行結果讀取。所述接收墊8設有兩個工作位，採血位和層析位，當接收墊8處於採血位時，接收 墊8位於採血孔2的正下方；當接收墊8處於層析位時，所述接收墊8位於引液試紙9及反 應試紙10的下方，其兩端承接於兩側試紙，且重疊1mm，該接收墊8所吸收的血漿體積定量 為 15μ L ；所述反應試紙10的製備方法為按下表配方配製溶液，將試紙蘸取酶溶液，反覆 蘸取後，40°C乾燥。 所述顯色試紙11的製備方法為採用溴化氫或者⑶I活化載體，待共價固定的試 劑優選N-烷基苯胺類物質，固定後該試劑不隨展開液擴散，濃度優選2-20mmol/L。顯色系 統還包括另一個組分苯並噻唑酮腙類，濃度優選0. 01-lmg/mL。快速乳酸檢測卡的工作過程為當全血滴加到殼體上的採血孔2時，採血孔2可將 全血過濾得到血漿；血漿被接收墊8定量吸收；溶液盒中的溶液釋放，引液試紙9通過毛細 作用將溶液依次層析至接收墊8、反應試紙10和顯色試紙11 ；顯色試紙11呈現一定高度的 藍紫色色帶，通過色帶高度指示全血中乳酸的濃度。快速乳酸檢測卡的使用方法為①平放置檢測卡，用採血針將手指刺破，滴一到兩滴血到採血孔2中，血液沒過採 血孔2的刻度線，接收墊8位於採血孔2的正下方，定量採集15 μ L的血漿；②等待2分鐘，拉動撥塊，將接收墊8置於層析位，啟動反應；③等待10-12分鐘，當結束指示孔5中指示劑變綠時反應結束；
④讀出顯色高度，在結果對照表中找出相應的乳酸濃度。人基質校準血清乳酸檢測結果，如下表和圖4所示
權利要求
一種快速乳酸檢測卡，包括殼體、試紙系統、溶液體系、加液機構，其特徵是殼體包括上蓋(1)和下蓋(6)，殼體上設有採血孔(2)、溶液孔(3)和結束指示孔(5)，殼體內設有接收墊(8)；試紙系統包括一套置於殼體腔室內的引液試紙(9)、反應試紙(10)與顯色試紙(11)；溶液體系中所含溶液的主要成分是過氧化物酶溶液。
2.根據權利要求1所述的快速乳酸檢測卡，其特徵是所述殼體近頂端處設有結束指 示孔(5)，結束指示孔(5)下方的顯色試紙(11)上含有水溶性終點指示劑。
3.根據權利要求1所述的快速乳酸檢測卡，其特徵是所述採血孔(2)上覆蓋有至少 兩層過濾網。
4.根據權利要求1所述的快速乳酸檢測卡，其特徵是所述接收墊(8)設有兩個工作 位，採血位和層析位，當接收墊(8)處於採血位時，接收墊(8)位於採血孔(2)的正下方；當 接收墊(8)處於層析位時，所述接收墊(8)位於引液試紙(9)及反應試紙(10)的下方，其兩 端承接於兩側試紙，且重疊0. 5mm 1. 5mm ；所述接收墊(8)定量吸收的血漿體積彡10 u L。
5.根據權利要求1所述快速乳酸檢測卡，其特徵在於，所述的反應試紙(10)上包含有 乳酸氧化酶成分。
6.根據權利要求5所述的快速乳酸檢測卡，其特徵是所述的乳酸氧化酶的濃度為 彡 2U/cm2。
7.根據權利要求1所述的快速乳酸檢測卡，其特徵是顯色試紙(11)上方的上殼體設 有觀察窗⑷。
8.根據權利要求1所述快速乳酸檢測卡，其特徵是所述的過氧化物酶濃度>0. 6U/mL0
9.根據權利要求1所述的快速乳酸檢測卡，其特徵是所述的溶液體系置於殼體腔內 或者殼體腔外。
10.根據權利要求1所述的快速乳酸檢測卡，其特徵是所述的加液機構包括在殼體內 設有帶針刺部的滑動件(7)。
全文摘要
本發明涉及一種快速乳酸檢測卡，包括殼體、試紙系統、溶液體系、加液機構，殼體包括上蓋和下蓋，殼體上設有採血孔、溶液孔和結束孔，殼體內設有接收墊；試紙系統包括一套置於殼體腔室內的引液試紙、反應試紙與顯色試紙；溶液體系中所含溶液的主要成分是過氧化物酶溶液。本發明結合了血液過濾、酶反應和層析顯色技術，因此可以實現對血液中的乳酸的即時測定，結構簡單，無須配套儀器使用，使用方便，成本低，符合POCT(point of care testing，即時檢測)的應用趨勢。
文檔編號G01N33/52GK101865851SQ20101012520
公開日2010年10月20日 申請日期2010年3月16日 優先權日2010年3月16日
發明者鄒麗萍, 顧瑜 申請人:蘇州市瑋琪生物科技有限公司