一種杯莧甾酮的純化方法
2023-05-11 10:13:46
專利名稱:一種杯莧甾酮的純化方法
技術領域:
本發明涉及一種杯莧留酮的純化方法,特別是涉及一種採用高速逆流色譜純化杯莧甾酮的方法。
背景技術:
杯莧甾酮(Cyasterone)無色針狀結晶(甲醇),熔點164 166 V,CAS號 17086-76-9,分子式C29H44O8,分子量520,分子結構
杯莧甾酮是莧科植物川牛膝中的有效成分。川牛膝為莧科植物川牛膝眾 officinalis Kuan的乾燥根,傳統醫學認為川牛膝具有逐瘀通經,通利關節,利尿通淋作用。現代藥效學研究表明,杯莧留酮對去勢小鼠的體重和子宮係數有增加趨勢,子宮溼重有顯著增長,提示其為川牛膝的雌激素樣活性的有效成分,杯莧留酮能增加提示其有蛋白質同化作去勢大鼠提肛肌重量用,實驗結果表明杯莧留酮的藥理活性與川牛膝強筋健骨其滋補之功與中醫臨床用藥功能主治基本吻合。 現有提取純化杯莧甾酮的方法,多為矽膠柱分離法。如劉晶晶等採用的方法是以川牛膝為原料,經乙醇提取,大孔樹脂純化,矽膠柱分離、結晶得高純度杯莧留酮。在高純度的杯莧留酮分離多採用矽膠柱,洗脫試劑用量大、周期長、樣品損失嚴重和重現性差是矽膠柱分離的短處,而且很難放大生產。本發明的目的是克服現有方法的不足和技術缺陷,提供一種杯莧留酮的純化方法。本發明的目的是通過以下技術方案來實現的一種杯莧留酮的純化方法,其特徵在於以下步驟
a.川牛膝藥材粉碎,加入3-7倍量丙酮溶液超聲提取2-3次,提取液回收丙酮後用適量熱水溶解過濾,濾液加入聚醯胺吸附,取40-60%甲醇溶液洗脫,收集高濃度流分,減壓濃縮
得浸膏;
b.取氯仿、甲醇、水溶液混合充分分層後,取上相做流動相,下相做固定相,採用高速逆流色譜分離上述浸膏,紫外檢測器在線監測,收集目標流分,減壓濃縮結晶,乾燥得高純度
發明內容杯莧甾酮。所述步驟b中的氯仿、甲醇、水溶液混合比例為3-6:2-5:1-2。所述的步驟b中的高速逆流色譜分離主機轉速600-1000rpm,流動相流速1_細1/
mirio本發明的優勢是方法採用高逆流色譜方法純化杯莧留酮,是一種液液分配色譜法,對分離樣品無吸附,分離速度快,製備量大,溶劑用量小而可以循環利用,克服了矽膠柱分離方法的缺陷,降低了產品生產成本,減少了汙染。
具體實施例方式下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明。實施例1
川牛膝藥材粉碎,取10kg,加入5倍量80%丙酮溶液超聲提取2次,每次30分鐘,提取液回收丙酮後用適量熱水溶解過濾,濾液加入聚醯胺柱吸附吸附,取60%甲醇溶液洗脫,收集高濃度流分,減壓濃縮得浸膏。取氯仿、甲醇、水溶液按3:2:1比例混合,充分分層後,取下相注入高速逆流色譜柱做固定相,轉動主機700rpm,泵入上相做流動相,動態平衡後,流動相流速調整為2ml/min,同時用流動相溶解浸膏,由進樣閥進樣,紫外檢測器在線監測,收集目標流分,減壓濃縮,結晶,乾燥得杯莧留酮200mg,含量98. 8%。實施例2:
川牛膝藥材粉碎,取10kg,加入4倍量70%丙酮溶液超聲提取3次,每次30分鐘,提取液回收丙酮後用適量熱水溶解過濾,濾液加入聚醯胺柱吸附吸附,取40%甲醇溶液洗脫,收集高濃度流分,減壓濃縮得浸膏。取氯仿、甲醇、水溶液按6:5:2比例混合,充分分層後,取下相注入高速逆流色譜柱做固定相,轉動主機lOOOrpm,泵入上相做流動相,動態平衡後,流動相流速調整為3ml/min,同時用流動相溶解浸膏,由進樣閥進樣,紫外檢測器在線監測,收集目標流分,減壓濃縮,結晶,乾燥得杯莧留酮230mg,含量98. 1%。
權利要求
1.一種杯莧留酮的純化方法,其特徵在於以下步驟a.川牛膝藥材粉碎,加入3-7倍量丙酮溶液超聲提取2-3次,提取液回收丙酮後用適量熱水溶解過濾,濾液加入聚醯胺吸附,取40-60%甲醇溶液洗脫,收集高濃度流分,減壓濃縮得浸膏;b.取氯仿、甲醇、水溶液混合充分分層後,取上相做流動相,下相做固定相,採用高速逆流色譜分離上述浸膏,紫外檢測器在線監測,收集目標流分,減壓濃縮結晶,乾燥得高純度杯莧甾酮。
2.如權利要求1所述的杯莧留酮的純化方法,其特徵在於所述步驟b中的氯仿、甲醇、 水溶液混合比例為3-6:2-5:1-2。
3.如權利要求1所述的杯莧留酮的純化方法,其特徵在於所述步驟b中的高速逆流色譜分離主機轉速600-1000rpm,流動相流速Uml/min。
全文摘要
本發公開了一種杯莧甾酮的純化方法。方法步驟如下a.川牛膝藥材粉碎,加入3-7倍量丙酮溶液超聲提取2-3次,提取液回收丙酮後用適量熱水溶解過濾,濾液加入聚醯胺吸附,取40-60%甲醇溶液洗脫,收集高濃度流分,減壓濃縮得浸膏;b.取氯仿、甲醇、水溶液混合充分分層後,取上相做流動相,下相做固定相,採用高速逆流色譜分離上述浸膏,紫外檢測器在線監測,收集目標流分,減壓濃縮結晶,乾燥得高純度杯莧甾酮。本發明的方法操作簡單,生產周期短,效率高,所得產品含量不低於95%。
文檔編號C07J17/00GK102276676SQ20111026413
公開日2011年12月14日 申請日期2011年9月8日 優先權日2011年9月8日
發明者劉東鋒, 楊成東 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司