一種治療骨科疾病的注射用組合物的質量控制方法

2023-09-18 12:28:45 3

專利名稱：一種治療骨科疾病的注射用組合物的質量控制方法
技術領域：
本發明屬於藥物分析領域，具體地說是涉及一種治療骨科疾病的注射用組合物的質量控制方法。
背景技術：
骨瓜提取物注射液含有多種活性多肽和游離胺基酸，具有調節骨代謝，刺激成骨細胞增殖，促進新骨形成，調節鈣、磷代謝，增加骨鈣沉積，防止骨質疏鬆等作用。多肽類骨代謝因子的作用多肽類骨代謝因子可有效促進機體內影響骨形成和吸收的骨源性生長因子的合成，包括骨形態發生蛋白(BMPs)，β-轉化生長因子(TGF-β)，成纖維細胞生長因子(FGF)等，從而具有多種生物活性，其主要藥理作用有:促進細胞有絲分裂、分化作用、趨化作用和溶骨活性。其中BMPs是一組酸性低分子量糖蛋白，作為一種高效骨誘導物質，BMPs是間充質細胞向骨系細胞分化的最初信號分子，能誘導血管周圍遊動的間充質細胞轉化為不可逆性的骨系細胞，即軟骨細胞和成骨細胞，從而促進骨痂形成，誘導新骨形成，促進骨折修復；此外，BMPS還可調節細胞外基質成分的改變，並通過與TGF-β和FGF相互之間的協調作用更好地誘導新骨形成，使骨組織更成熟。TGF-β則是一組具有多種功能的蛋白多肽，對成骨細胞及成軟骨細胞具有促進分化或降低分化的雙重調節作用，與多種因子如細胞外基質和其他分化調節生長因子一起協同參與對細胞分化的調節；TGF-β可促進細胞外基質合成，可以直接刺激成纖維細胞外基質的合成，並對其新合成的基質降解有顯著抑制作用；對於成骨細胞，TGF-β可促進其合成I型膠原、骨粘連素和骨折蛋白；同時，TGF-β對淋巴細胞和巨噬細胞的作用表明，它既能緩解炎性反應的破壞性，又能協助巨噬細胞來源的某些細胞因子在組織修復中發揮作用。FGF是一組肝素黏合多肽，可刺激細胞的趨向移動、增殖和分化，增加合成膠原細胞的數量，促進骨膠原蛋白及非膠原蛋白的合成，增加骨鈣素的合成。甜瓜籽提取物的作用甜瓜籽提取物是從葫蘆科植物甜瓜(CucumismeloL.)的成熟乾燥的種子經特殊工藝提取而成的，能降低骨折局部毛細血管通透性，減少炎性滲出，促進局部血運障礙的恢復；同時還能降低全血黏度及細胞聚集程度，改善骨痂局部的血液循環，為骨細胞提供一個良好的血供環境，另外還能抑制前列腺素的釋放，達到止痛效果；在促進骨折早期癒合中，甜瓜籽提取物與補充的多肽類骨代謝因子具有協同作用，促進骨源性生長因子的合成。其他成分的作用骨瓜提取物注射液富含的多種游離胺基酸，為骨細胞合成BMPs、TGF-β、FGF等骨源性生物因子提供原料，促進骨源性生物因子的合成。有機鈣、磷因子可參與鈣磷代謝，維持骨容量。

發明內容
發明的目的是通過 以下技術方案實現的:一種治療骨科疾病的注射用組合物，原料包括以下成分:豬四肢骨提取液和甜瓜籽提取物溶液。
豬後脛骨(注釋:豬後脛骨相當於人的小腿骨中的內側的骨)與豬的前肢骨的多肽含量有所不同，豬四肢骨含有的多肽類成分的紫外吸收峰在240-250nm左右，而豬後脛骨提取液含有的多肽類成分的紫外吸收峰在258nm左右，而甜瓜籽提取物溶液的多肽類成分的紫外吸收峰也在258nm左右。因此，本發明對治療骨科疾病的注射用組合物的質量標準要求中的多肽的紫外吸收峰確定為258nm，且在兩種溶液合併成藥的前後，均對258nm進行監控，加強藥物製備的過程監控，保證了藥品的安全和有效性，提高了藥品指控的目的性和準確性。尤其值得關注的是，本發明原料中優選採用豬後脛骨，其提取液含有的多肽類成分的紫外吸收峰在258nm左右，普通豬四肢骨含有的多肽類成分的紫外吸收峰在240-250nm左右。實驗證明，採用豬後脛骨作為藥品原料，能夠更好地發揮治療效果。且通過製備過程中，分別對甜瓜籽提取物溶液和豬後脛骨提取液的多肽類成分在紫外258nm進行監控，前置藥品標準監控環節，提高了藥品標準，更加有效地保證了藥品的有效性和安全性。治療骨科疾病的注射用組合物是複方製劑，其組份為新鮮或冷凍的豬四肢骨和甜瓜的成熟乾燥種子，經分別提取製成的滅菌水溶液。主要含有多肽類骨代謝因子、甜瓜籽提取物、多種游離胺基酸以及有機鈣、無機鈣、無機鹽及微量元素。本發明的治療骨病的治療骨科疾病的注射用組合物，原料包括以下成分:豬四肢骨的提取液10-100重量份，甜瓜籽的提取液10-30重量份。本發明的治療骨科疾病的注射用組合物，其中，原料含有如下輔料:緩衝液，選自:磷酸鹽緩衝液或甘氨酸-HCl緩衝溶液 1-10重量份pH調節劑，選自:碳酸氫鈉，碳酸鈉或醋酸鈉1-4重量份穩定劑、選自:乙二胺四乙酸二鈉，甘露糖醇，乳糖 0.05-5重量份。本發明治療骨科疾病的注射用組合物，按照如下方法製備:(1)豬骨提取液的製備:檢疫合格的豬的四肢骨，剪去殘肉，斷開去脂，粉碎，按照骨渣1: 2量純化水，1200C熱壓2小時，過濾，沉渣同法再次提取2次，合併濾液，2-80C，冷藏24小時，離心15分鐘，脫脂，上清液，用超濾器超濾，濃縮原體積1/4，調節PH5.9-6.3，超濾，收集濾液，得到豬骨提取液，備用；(2)甜瓜籽提取物溶液的製備:漂洗2-3次，漂洗淨的甜瓜籽1: 2量純化水，120°C熱壓2小時，過濾，沉渣同法再次提取2次，合併濾液，2-8度，冷藏24小時，離心15分鐘，脫脂，上清液，用超濾器超濾，濃縮原體積1/4，調節PH5.9-6.3，超濾，收集濾液，得到甜瓜籽提取物溶液；(3)將豬骨提取液、甜瓜籽提取物溶液混合，121°C滅菌30分鐘，灌裝，檢驗，包裝，得到成品。本發明的治療骨科疾病的注射用組合物，還可以按照如下方法製備:(1)豬骨提取液的製備:採集檢疫合格的豬的四肢骨，保持新鮮或於_20°C條件下冷凍保存。取四肢骨，用剪刀剪去殘肉，斷開去脂，無菌水衝洗，控去水分，置粉碎機中粉碎。骨渣置加熱鍋中，按1:1量加無菌水，121°C熱壓60分鐘，2 3層紗布過濾，沉渣同法再次提取2次，合併三次濾液。低溫靜置，脫脂。向溶液中加入乙醇使醇濃度達到80%，調節pH值為4.5 5.0，低溫靜置24小時，過濾，藥液再次加乙醇沉澱2次，加熱回收乙醇，調節pH值至6.5 7.1。藥液濃縮，用超濾器超濾，膜相對分子量優選為1X104。121°C滅菌30分鐘。(2)甜瓜籽提取物溶液取乾燥成熟甜瓜種子，置粉碎機中粉碎。粉碎物置加熱鍋中，按1:1量加無菌水，121°C熱壓30分鐘，2 3層紗布過濾，沉渣同法再次提取2次，合併三次濾液。向濾液中加入乙醇使醇濃度達到80%，調節pH值為4.5 5.0，低溫靜置24小時，過濾，藥液再次加乙醇沉澱2次，加熱回收乙醇，調節pH值至6.5 7.1。藥液濃縮，用超濾器超濾，膜 相對分子量優選為1X104。121°C滅菌30分鐘。質控要求:按甜瓜籽提取物溶液質控要求進行檢查，應符合規定。治療骨科疾病的注射用組合物生產工藝:將檢測合格的骨提取物溶液和甜瓜籽提取物溶液混合，加注射用水稀釋，優選至80%處方量，調節pH值，pH優選為6.0 6.5，補充注射用水至全量，測定半成品含量，灌裝於安瓿中，優選為2、5、10ml，熔封，121°C滅菌30分鐘。燈檢。取樣全檢。合格品包裝。治療骨科疾病的注射用組合物優選生產工藝:將豬骨提取液、甜瓜籽提取物溶液混合，加入本發明的輔料，加注射用水稀釋，優選至80 %處方量，調節pH值，pH優選為
6.0 6.5，補充注射用水至全量，測定半成品含量，灌裝於安瓿中，優選為2、5、10ml，熔封，121°C滅菌30分鐘。燈檢。取樣全檢。合格品包裝。新生豬四肢骨的原料標準:所選用原料是優選健康新生豬(出生12個月內)四肢骨，應根據下列原料的質量標準選取和處理。原料來源於豬科、豬屬、豬種的新生豬。健康新生豬由動脈放血處死後立即取出四肢骨，整個過程於I小時內完成。健康新生豬四肢骨，處著附肉，呈鮮紅色，骨質潔白，無腐臭，骨端軟，骨質豐滿，骨端較大，骨長適度(20 40cm)。四肢骨用潔淨塑膠袋包裝，_18°C冷凍保存，備用。使用期限為一年。檢查:布魯氏桿菌虎紅平板凝集試驗在陰、陽性血清對照成立的條件下，受檢血清不得出現陽性反應。輪狀病毒酶聯免疫吸附試驗(ELISA)在陰、陽性血清對照成立的條件下，受檢血清不得出現陽性反應。口蹄疫液相阻斷-酶聯免疫吸附試驗對照組成立的條件下受檢血清不得出現陽性反應。流行性乙型腦炎血凝抑制試驗對照組成立的條件下受檢血清不得有流行性乙型腦炎汙染。偽狂犬病膠乳凝集試驗對照組成立的條件下受檢血清不得出現陽性反應。豬瘟過氧化物酶聯中和試驗受檢血清不得出現陽性反應。所選用原料優選採用健康新生豬(出生12個月內)，優選豬後脛骨，優選健康新生豬的後脛骨。後脛骨經過提取所得豬骨提取液，其紫外特徵吸收峰為258nm。
甜瓜籽的原料標準:本品為葫蘆科植物甜瓜CucumismeloL.的乾燥成熟種子。性狀:本品呈扁平長卵形，長5 7mm，寬2 4mm。表面黃色或淺棕紅色，平滑，微有光澤，一端稍尖，另端鈍圓。種皮較硬而脆，內有膜質胚乳及子葉2片。氣微，味淡。鑑別:(I)取本品粉末5g，加水50ml，加熱30分鐘，濾過，取濾液2ml，加雙縮脲試劑(取硫酸銅0.75g和酒石酸鉀鈉3.0g，加水250ml使溶解，在攪拌下加入10%氫氧化鈉溶液150ml,加水至500ml) 4ml,室溫放置15分鐘,溶液應顯藍紫色至紫紅色。忙藏:置乾燥處，防蛀。本發明所得的甜瓜籽提取物溶液，其紫外特徵吸收峰為258nm。將甜瓜籽提取物溶液和豬骨提取液合併而成的本發明的治療骨科疾病的注射用組合物，其多肽的紫外吸收峰優選為258nm。上述的治療骨科疾病的注射用組合物，可以製成注射液、大輸液和粉針。治療骨科疾病的注射用組合物的製藥用途:在製備治療骨科疾病的藥物中的應用。在製備治療增生性骨關節、·骨關節炎疾病風溼、類風溼性關節炎、促進骨折的早期癒合、治療創傷、恢復、調節骨代謝，刺激成骨細胞增殖，促進新骨形成，以及調節鈣、磷代謝，增加骨鈣沉積，防治骨質疏鬆、抗炎、鎮痛，股骨頭缺血性壞死的藥物中的應用。本發明的豬骨提取液質量標準本品由新鮮或冷凍的豬四肢骨骼提取製備，每Iml中含多肽類物質以牛血清白蛋白計，不得低於15.0mg0性狀本品為黃色的澄明液體。鑑別取本品0.5ml，加雙縮脲試劑(取硫酸銅0.75g和酒石酸鉀鈉3.0g,加水250ml使溶解，在攪拌下加入10%氫氧化鈉溶液150ml，加水至500ml) 4ml，室溫放置15分鐘，溶液顯紫紅色。檢查pH值應為6.5 7.1(中國藥典2005年版二部附錄VI H)。蛋白質取本品1ml，加磺基水楊酸溶液(3 — 10) 3ml，不得發生渾濁。高分子量物質取本品適量，加水製成每Iml中含多肽Img的溶液，作為供試品溶液；另取細胞色素C注射液適量，加水製成每Iml中含5mg的溶液，作為對照溶液。照高效液相色譜法(中國藥典2005年版二部附錄V D)測定。採用凝膠色譜柱(如TSKgelG2000SW，PROTEN PAK60);以磷酸氫二鉀13.93g、磷酸二氫鉀5.32g，加異丙醇50ml，加水至1000ml，用磷酸調節PH值至7.0為流動相；流速為每分鐘0.8ml，檢測波長為280nm。對照溶液和供試品溶液各20 μ 1，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中，各峰的保留時間均應大於對照溶液主峰的保留時間。異常毒性取本品，加氯化鈉注射液製成每Iml中含多肽5mg的溶液，依法檢查(中國藥典2005年版二部附錄XIC)，按靜脈注射給藥，應符合規定。熱原取本品，依法檢查(中國藥典2005年版二部附錄XI D)，劑量按家兔體重每Ikg注射0.3ml,應符合規定。過敏試驗取本品，加氯化鈉注射液製成每Iml中含多肽5mg的溶液，取體重250 350g的健康合格豚鼠6隻，連續3次隔日腹腔注射0.5ml, 14天後，再自靜脈注射2ml，注射後15分鐘內，均不得出現過敏反應。如有豎毛、呼吸困難、乾嘔、咳嗽三聲等現象中出現兩種或兩種以上者，或有囉音、搐抽、虛脫或死亡現象之一者，應判為陽性。降壓物質取本品，加0.9%氯化鈉注射液製成每Iml中含多肽5mg的溶液,依法檢查(中國藥典2005年版二部附錄XI G)，應符合規定。無菌取本品，依法檢查(中國藥典2005年版二部附錄XI H)，應符合規定。含量測定精密量取本品1ml，置IOOml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，照福林酚測定法(見附件一)測定。貯藏_20 O冷凍本發明的甜瓜籽提取液質量標準本品由葫蘆科植物甜瓜Cucumis melo L.的乾燥成熟種子提取製備，每Iml中含多肽類物質以牛血清白蛋白計，不得低於15.0mg0性狀本品為黃色的澄明液體。鑑別(I)取本品0.5ml，加雙縮脲試劑(取硫酸銅0.75g和酒石酸鉀鈉3.0g，加水250ml使溶解，在攪拌下加入10%氫氧化鈉溶液150ml，加水至500ml) 4ml，室溫放置15分鐘，溶液
顯紫紅色。(2)取本品0.3ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，照分光光度法(中國藥典2005年版二部附錄IV)測定，在258nm的波長處有最大吸收。
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檢查pH值應為6.5 7.1(中國藥典2005年版二部附錄VI H)。蛋白質取本品1ml，加磺基水楊酸溶液(3 — 10) 3ml，不得發生渾濁。高分子量物質取本品適量，加水製成每Iml中含多肽Img的溶液，作為供試品溶液；另取細胞色素C注射液適量，加水製成每Iml中含5mg的溶液，作為對照溶液。照高效液相色譜法(中國藥典2005年版二部附錄V D)測定。採用凝膠色譜柱(如TSKgelG2000SW，PROTEN PAK60);以磷酸氫二鉀13.93g、磷酸二氫鉀5.32g，加異丙醇50ml，加水至1000ml，用磷酸調節PH值至7.0為流動相；流速為每分鐘0.8ml，檢測波長為280nm。對照溶液和供試品溶液各20 μ I，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中，各峰的保留時間均應大於對照溶液主峰的保留時間。異常毒性取本品，加氯化鈉注射液製成每Iml中含多肽5mg的溶液，依法檢查(中國藥典2005年版二部附錄XIC)，按靜脈注射給藥，應符合規定。熱原取本品，依法檢查(中國藥典2005年版二部附錄XI D)，劑量按家兔體重每Ikg注射0.3ml,應符合規定。過敏試驗取本品，加氯化鈉注射液製成每Iml中含多肽5mg的溶液，取體重250 350g的健康合格豚鼠6隻，連續3次隔日腹腔注射0.5ml, 14天後，再自靜脈注射2ml，注射後15分鐘內，均不得出現過敏反應。如有豎毛、呼吸困難、乾嘔、咳嗽三聲等現象中出現兩種或兩種以上者，或有囉音、搐抽、虛脫或死亡現象之一者，應判為陽性。降壓物質取本品，加0.9%氯化鈉注射液製成每Iml中含多肽5mg的溶液，依法檢查(中國藥典2005年版二部附錄XI G)，應符合規定。無菌取本品，依法檢查(中國藥典2005年版二部附錄XIH)，應符合規定。含量測定精密量取本品1ml，置IOOml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，照福林酚測定法測定。貯藏-20°C冷凍保存。本發明治療骨科疾病的注射液的質量標準本品為新鮮或冷凍的豬四肢骨骼和葫蘆科植物甜瓜CucumismeloL.的乾燥成熟種子，經單獨提取後製成的滅菌水溶液。每Iml中含多肽類物質以牛血清白蛋白計，不得低於5.0mg。性狀本品為微黃色至淡黃色的澄明液體。鑑別:(I)取本品2ml，加雙縮脲試劑(取硫酸銅0.75g和酒石酸鉀鈉3.0g,加水250ml使溶解，在攪拌下加入10 %氫氧化鈉溶液150ml，加水至500ml) 4ml，室溫放置15分鐘，溶液
顯紫紅色。(2)取本品1ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，照分光光度法(中國藥典2005年版二部附錄IVA)測定，在258nm的波長處有最大吸收。檢查pH值應為5.5 7.0(中國藥典2005年版二部附錄VIH)。蛋白質取本品1ml，加磺基水楊酸溶液(3 — 10) 3ml，不得發生渾濁。異常毒性取本品，依法檢查(中國藥典2005年版二部附錄XIC)，按靜脈注射給藥，應符合規定。熱原取本品，依法檢查(中國藥典2005年版二部附錄XID)，劑量按家兔體重每Ikg注射Iml,應符合規定。過敏試驗取體重250 350g的健康合格豚鼠6隻，連續3次隔日腹腔注射本品
0.5ml，14天後，再自靜脈注射本品2ml，注射後15分鐘內，均不得出現過敏反應。如有豎毛、呼吸困難、乾嘔、咳嗽三聲等現象中出現兩種或兩種以上者，或有囉音、搐抽、虛脫或死亡現象之一者，應判為陽性。降壓物質取本品，依法檢查(中國藥典2005年版二部附錄XIG)，應符合規定。其他應符合注射劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版二部附錄I B)。含量測定精密量取本品1ml，置25ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，照福林酚測定法(見附件一)測定。類別消炎鎮痛藥。規格(I)5ml:25mg (2) IOml:50mg貯藏密閉，25 °C以下保存。有效期18個月本發明製備的治療骨科疾病的注射用組合物與原骨瓜提取物注射液相比，有以下優勢:藥材的利用率高，成本少，活性成分高、療效確切、安全性好。本發明治療骨科疾病的注射用組合物，採用超濾技術，多肽含量達到50-100mg，鹿瓜多肽注射液中多肽含量是16-24mg，每日用量中骨瓜中多肽含量是鹿瓜多肽的3-5倍，而多肽含量的多少與臨床療效是正相關的，本發明治療骨科疾病的注射用組合物的療效要明顯優於鹿瓜多肽。穩定性高，本品經過24個月的穩定性試驗研究，結果表明本品穩定性良好。質量可控，豬後脛骨(注釋:豬後脛骨相當於人的小腿骨中的內側的骨)與豬的其它四肢骨的多肽含量有所不同 ，豬四肢骨含有的多肽類成分的紫外吸收峰在240-250nm左右，而豬後脛骨含有的多肽類成分的紫外吸收峰在258nm左右，因此，本發明對治療骨科疾病的注射用組合物的質量標準要求中的多肽的紫外吸收峰確定為258nm，增強了藥品的安全性，提高了藥品指控的目的性和準確性。
具體實施例方式以下實施例進一步說明本發明的內容，但不應理解為對本發明的限制。在不背離本發明精神和實質的情況下，對本發明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬於本發明的範圍。實施例1(I)豬骨提取液的製備:檢疫合格的豬的四肢骨，剪去殘肉，斷開去脂，粉碎，按照骨渣1: 2量純化水，120°C熱壓2小時，過濾，沉渣同法再次提取2次，合併濾液，5攝氏度，冷藏24小時，離心15分鐘，脫脂，上清液，用超濾器超濾，濃縮原體積1/4，調節PH6.0,超濾，收集濾液，得到豬骨提取液，備用；紫外吸收峰為240-250nm。(2)甜瓜籽提取物溶 液的製備:漂洗2-3次，按照洗淨的甜瓜籽1: 2量純化水，120°C熱壓2小時，過濾，沉渣同法再次提取2次，合併濾液，5攝氏度，冷藏24小時，離心15分鐘，脫脂，上清液，用超濾器超濾，濃縮原體積1/4，調節PH6.0，超濾，收集濾液，得到甜瓜籽提取物溶液；紫外特徵吸收峰為 258nm。(3)將50重量份豬骨提取液、10重量份甜瓜籽提取物溶液混合，加20重量份注射用水稀釋，加入碳酸氫鈉適量，調節PH值為6.2，121°C滅菌30分鐘，灌裝，檢驗，包裝，得到成品。實施例2在實施例1的基礎上:將50重量份豬骨提取液、10重量份甜瓜籽提取物溶液混合，加20重量份注射用水稀釋，加入5重量份磷酸鹽緩衝液，加入碳酸氫鈉I重量份，加入乙二胺四乙酸二鈉0.1重量份，121 °C滅菌30分鐘，灌裝，檢驗，包裝，得到成品。實施例3在實施例1的基礎上:將50重量份豬骨提取液、10重量份甜瓜籽提取物溶液混合，加20重量份注射用水稀釋，加入5重量份甘氨酸-HCl緩衝溶液，加入醋酸鈉2重量份，加入甘露糖醇0.2重量份,121°C滅菌30分鐘,灌裝,檢驗,包裝,得到成品。實施例4(I)豬骨提取液的製備:採集檢疫合格的豬後脛骨(豬後脛骨相當於人的小腿骨中的內側的骨)，保持新鮮或於-20°C條件下冷凍保存，取豬後脛骨，用剪刀剪去殘肉，斷開去脂，無菌水衝洗，控去水分，置粉碎機中粉碎，骨渣置加熱鍋中，按1:1量加無菌水，121°C熱壓60分鐘，3層紗布過濾，沉渣同法再次提取2次，合併三次濾液，低溫靜置，脫脂，向溶液中加入乙醇使醇濃度達到80%，調節pH值為4.8，低溫靜置24小時，過濾，藥液再次加乙醇沉澱2次，加熱回收乙醇，調節PH值至6.8，藥液濃縮，用超濾器超濾，膜相對分子量為I X IO4,121°C滅菌30分鐘。質控要求:按說明書所述「本發明的豬骨提取液質量標準」質控要求進行檢查，應符合規定，紫外特徵吸收峰為258nm。(2)甜瓜籽提取物溶液取乾燥成熟甜瓜種子，置粉碎機中粉碎，粉碎物置加熱鍋中，按1:1量加無菌水，121°C熱壓30分鐘，2 3層紗布過濾，沉渣同法再次提取2次，合併三次濾液，向濾液中加入乙醇使醇濃度達到80%，調節pH值為4.8，低溫靜置24小時，過濾，藥液再次加乙醇沉澱2次，加熱回收乙醇，調節pH值至6.8，藥液濃縮，用超濾器超濾，膜相對分子量為I X IO4,121°C滅菌30分鐘，質控要求:按說明書所述「本發明的甜瓜籽提取液質量標準」質控要求進行檢查，應符合規定，紫外特徵吸收峰為258nm。(3)合併:將50重量份豬骨提取液、20重量份甜瓜籽提取物溶液混合，加20重量份注射用水稀釋，加入碳酸氫鈉適量，調節PH值為6.2，121°C滅菌30分鐘，灌裝，檢驗，包裝，得到成
品O質控要求:按說明書所述「治療骨科疾病的注射液的質量標準」質控要求進行檢查，應符合規定，紫外特徵吸收峰為258nm。實施例5在實施例4的基礎上:將50重量份豬骨提取液、20重量份甜瓜籽提取物溶液混合，加20重量份注射用水稀釋，加入5重量份磷酸鹽緩衝液，加入碳酸氫鈉I重量份，加入甘露糖醇0.1重量份，121°C滅菌30分鐘,灌裝,檢驗,包裝,得到成品。

質控要求:同實施例4實施例6在實施例4的基礎上:將50重量份豬骨提取液、20重量份甜瓜籽提取物溶液混合，加20重量份注射用水稀釋，加入5重量份甘氨酸-HCl緩衝溶液，加入醋酸鈉2重量份，加入乳糖0.5重量份,121°C滅菌30分鐘,灌裝,檢驗,包裝,得到成品。質控要求:同實施例4實施例7:本發明治療骨科疾病的注射用組合物的臨床驗證本發明製劑治療骨性關節炎的效果方法:70例骨性關節炎患者(符合骨性關節炎診斷標準)隨機分為7組。本發明第I組，本發明治療骨科疾病的注射用組合物I本發明第2組，本發明治療骨科疾病的注射用組合物2本發明第3組，本發明治療骨科疾病的注射用組合物3本發明第4組，本發明治療骨科疾病的注射用組合物4本發明第5組，本發明治療骨科疾病的注射用組合物5本發明第6組，本發明治療骨科疾病的注射用組合物6本發明第1-6組，每例患者用治療骨科疾病的注射用組合物連續7天治療，每天12mg靜脈滴注。對照組，用鈣片和維生素D治療，療程7天，療效評價標準:疼痛觀察指標用視覺比量表(VAS)表示。
壓痛、腫脹、功能障礙觀察，每天評價I次。具體計分方法按內容計分。顯效:腫脹及壓痛明顯減輕，關節活動改善明顯，治療後總計分下降> 2/3 ；有效:腫脹及壓痛減輕，關節活動有明顯，治療後總計分下降> 1/3 ；無效:症狀無改善，治療後總計分下降< 1/3。統計學處理計量資料採用t檢驗，計數資料採用方差分析，等級資料用Ridit檢驗，所有資料用SPSS6.0處理。壓痛、腫脹、功能障礙計分標準:
權利要求
1.一種治療骨科疾病的注射用組合物質量控制方法，其特徵在於含有以下成分:其特徵在於，各成分的重量配比為:豬四肢骨的提取液10-100重量份，甜瓜籽的提取液10-30重量份，其多肽的紫外吸收峰為258nm。
2.一種治療骨科疾病的注射用組合物質量控制方法，其特徵在於含有以下成分:其特徵在於，各成分的重量配比為:豬四肢骨的提取液10-100重量份，甜瓜籽的提取液10-30重量份，其中所述豬骨提取液和甜瓜籽提取物溶液的多肽的紫外吸收峰均為258nm。
全文摘要
本發明屬於藥物分析領域，具體地說是涉及一種治療骨科疾病的注射用組合物的質量控制方法。其原料為豬四肢骨和甜瓜籽經分別提取製成的。其主要含有多肽類骨代謝因子、甜瓜籽提取物、多種游離胺基酸以及無機鹽及微量元素，含多種骨代謝的活性肽類，具有治療多種骨科疾病的作用。尤其值得關注的是，本發明原料中優選採用豬後脛骨，其提取液含有的多肽類成分的紫外吸收峰在258nm左右，普通豬四肢骨含有的多肽類成分的紫外吸收峰在240-250nm左右。且通過製備過程中，分別對甜瓜籽提取物溶液和豬後脛骨提取液的在紫外258nm進行監控，前置藥品標準監控環節，提高了藥品標準，更加有效地保證了藥品的有效性和安全性。
文檔編號A61K36/42GK103070906SQ201310023580
公開日2013年5月1日 申請日期2011年12月8日 優先權日2011年12月8日
發明者趙聯華 申請人:趙聯華