單細胞原位雜交玻片的製作方法

2023-09-18 16:26:40 2

專利名稱：單細胞原位雜交玻片的製作方法
技術領域：
本實用新型屬於一種應用於醫學分子生物學實驗室的單個細胞原位雜交專用玻璃片。
背景技術：
單個細胞原位雜交技術是分子生物學中常用的一種技術，主要用於標本量少或者標本獲取困難的實驗操作，在醫用臨床診斷方面有極其重要的應用前景，尤其對於近年來開展的遺傳性疾病在胚胎時期進行單個胚胎卵裂球的診斷方面，應用廣泛。目前應用的雜交玻璃片是對常規診斷用玻璃片進行去油處理後直接使用的，在樣本標記時，採用鑽石筆在玻片背面畫圈的方法，不但畫圈不規則，且產生大量玻璃碎渣；將單個待診斷細胞放入玻片正面的圈中進行固定操作時，會造成細胞隨固定液向周圍擴散，導致細胞漂至圈外和丟失，由於每個胚胎只能獲取1～2個細胞，可能會喪失寶貴的診斷標本來源，給病人造成嚴重的經濟和精神損失。同樣，在對固定後的細胞標本進行雜交試驗時，由於採用的雜交液中含有進口的螢光物標記的昂貴探針，如果採用目前用的玻片會造成雜交液擴散嚴重，不但浪費，而且含探針的雜交液容易因稀薄而揮發，影響雜交結果，導致診斷的誤差。
本實用新型設計了雜交淺槽，避免了待診斷細胞和雜交液的丟失，標記清楚，提高了雜交效率，且成本低廉，容易被技術人員和病人接受。

發明內容
本實用新型的主要任務是為醫學分子生物學實驗室提供一種使用方便，標記清楚，減少標本丟失，提高雜交成功率的可重複使用雜交玻片。
本實用新型是這樣實現的，本單細胞原位雜交玻片是在常用的診斷用去油載玻片(7.62cm×2.54cm×0.1cm)基礎上，在玻片正面左上方距離左側邊緣1cm處設計一個圓柱形凹槽，直徑0.5cm，深50um，容量為1ul。可以在細胞固定時讓單個細胞或者卵裂球局限在槽內，防止隨固定液漂走，有利於雜交後標本的定位和分析。同時可以節約雜交液，雜交時含探針的雜交液混合物可以集中在槽中，減少雜交時蒸發。蓋玻片時不會因為液體擴散導致標本周圍雜交液量的降低和乾燥。深度的設計保證轉移單個細胞時既可以局限細胞，又不影響轉移細胞時吸管的深入。圓面積足夠顯微鏡頭能夠伸展到其周圍，保證分析的順利。
玻片正面右上角有方形的數字標記區，可設計成雕刻數字。數字永遠在玻片正面右上角，這樣就不會將片子弄反。只要保證數字在右上角時，即是玻片正面面對操作者。雜交槽的設計保證靠近玻片正面左側，這樣在進行雜交液洗脫等操作垂直放玻片於洗液缸時，可以保證標本充分接觸洗液。


圖1、圖2是本實用新型的結構原理圖(立體、平面)。
附圖中1是玻片，2是雜交槽，3是數字標記區。
具體實施方式
結合附圖對本實用新型的實施方式做進一步說明玻片在使用前先用酸和酒精等去油處理，使用時，先在玻片正面右上角數字標記區標記數字，既能區別玻片次序，又能確定玻片正反面。將通過顯微技術獲取的單個細胞標本在解剖顯微鏡下轉移至玻片的雜交槽中，雜交槽有一定深度，保證細胞不會擴散至槽外。在雜交槽中加固定液進行細胞固定後，過酒精時，由於雜交槽靠近左側邊緣，可將玻片垂直放入酒精缸中，保證標本充分接觸酒精。標本處理完畢，按照要求濃度加配好的雜交液，用加樣槍吸取1ul雜交液加於雜交槽中，加蓋普通蓋玻片即可。由於雜交槽有一定深度，雜交液不會向周圍擴散，既節省雜交液，又保證標本周圍足夠反應體系。同時從根本上避免在雜交結束後，移去蓋玻片時將單細胞標本粘在蓋玻片上帶走的問題，能極大提高雜交的成功率。
權利要求1.單細胞原位雜交玻片，其特徵在於玻片(1)為7.62cm×2.54cm×0.1cm的去油玻璃片，玻片(1)正面左上方距離左側邊緣1cm處，有一圓柱形雜交槽(2)，直徑0.5cm，深50um。
2.根據權利要求1所述的單細胞原位雜交玻片，其特徵在於玻片(1)正面右上角有方形的數字標記區(3)。
專利摘要本實用新型是一種應用於醫學分子生物學實驗室的單個細胞原位雜交專用玻璃片。由玻片(1)和雜交槽(2)和數字標記區(3)三部分組成。玻片(1)為7.62cm×2.54cm×0.1cm的去油玻璃片，玻片(1)正面左上方距離左側邊緣1cm處，有一圓柱形雜交槽(2)，直徑0.5cm，深50um。數字標記區(3)位於玻片(1)正面右上角，為一方形區域。
文檔編號A01H1/02GK2764146SQ200520081428

公開日2006年3月15日 申請日期2005年1月31日 優先權日2005年1月31日
發明者顏軍昊, 陳子江, 胡京美, 顏軍堯, 冀學斌, 李麗珍 申請人:顏軍昊