一種蛇皮活性肽的製備方法
2023-09-18 23:44:20 2
專利名稱：一種蛇皮活性肽的製備方法
技術領域：
本發明涉及一種蛇皮活性肽的製備方法，具體涉及利用生物蛋白酶水解蛇皮蛋白，再納濾脫鹽濃縮，超濾提純，冷凍乾燥。屬於生物技術領域。
背景技術：
蛇皮通常被用來製作二胡、京胡等樂器，製作提包、背包、腰帶、皮鞋等日用品，製作高檔工藝品，也被製作成美味食品、保健食品等。蛇皮中含有非常豐富的膠原蛋白、優質脂肪、多種礦物質、多種維生素等營養成分，具有修復皮膚、黏膜、血管、韌帶、骨骼的作用。由於膠原蛋白的分子量達 30000-200000DaltOn，甚至更大，因此很難被消化吸收、充分利用。極大地限制了蛇皮的利用效率和應用範圍，浪費了大量的優質資源。隨著現代生物技術和膜分離技術的飛速發展和日益成熟，利用這些技術製備蛇皮活性肽就成為可能。本發明旨在探索對蛇皮實現生物酶水解、膜技術分離，確定可工業化生產的工藝流程。
發明內容
本發明是探索提供一種採用生物蛋白酶水解一納濾脫鹽濃縮一超濾提純一冷凍乾燥等工藝流程製備蛇皮活性肽的方法，以期望得到一條可工業化的生產工藝路線。本發明的技術方案涉及一種蛇皮活性肽的製備方法，具體涉及以烏梢蛇、蝮蛇、 赤練蛇、銀環蛇、眼鏡蛇、大王蛇、五步蛇、松花蛇、虎尾蛇、中國水蛇等蛇類的鮮蛇皮為原料，經清洗一絞碎一磨漿一調整物料濃度一調整物料溫度一加入蛋白酶酶解一離心過濾一滅酶一納濾脫鹽濃縮一超濾提純一冷凍乾燥等工藝流程，得到蛇皮活性肽。產品分子量 90% 以上分布於 200-5000Dalton 之間，其中 200-2000Dalton (2-10 Ii )佔 75% 以上，還含有二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)等營養成分，具有良好的水溶性，優良的吸溼保溼功能，較好的酸、熱穩定性。可用於醫藥領域和保健食品生產領域。
具體實施例方式實施例1水解度(DH) = 15%的蛇皮活性肽粉的製備選用烏梢蛇、赤練蛇、大王蛇、松花蛇、虎尾蛇的鮮蛇皮各^(g，清水洗淨；用絞肉機絞碎，絞碎程度由Φ IOmm不鏽鋼孔板控制；用超微磨磨漿至細度20-30 μ m;置發酵罐內， 以1 1比例加入純淨水，加溫至45-55°C，加入537酸性蛋白酶在PH4. 0-5. 0、45-50°C條件下進行酶解反應，採用TNBS法控制水解度在15%，反應結束後離心過濾；加溫至90°C、保持10分鐘滅酶；用聚醯胺納濾膜進行納濾脫鹽、濃縮，截留分子量採用150DaltOn ；用超濾膜過濾，截留分子量採用100-5000Dalton ；經-10-_35°C冷凍乾燥，即得到蛇皮活性肽凍乾粉。
實施例2水解度(DH) = 25%的蛇皮活性肽粉的製備選用烏梢蛇、松花蛇、大王蛇、五步蛇、虎尾蛇的鮮蛇皮各^(g，清水洗淨；用絞肉機絞碎，絞碎程度由Φ8πιπι不鏽鋼孔板控制；用超微磨磨漿至細度15-25μπι;置發酵罐內，以1 1比例加入純淨水，加溫至50-60°C，加入Alcalase鹼性蛋白酶在ΡΗ8. 0-9. 0、 50-55°C條件下進行酶解反應，採用TNBS法控制水解度在25%，反應結束後離心過濾； 加溫至95°C、保持8分鐘滅酶；用聚乙烯醇納濾膜進行納濾脫鹽、濃縮，截留分子量採用 300Dalton ；用超濾膜過濾，截留分子量採用300-5000DaltOn ；經-10—35°C冷凍乾燥，即得到蛇皮活性肽凍乾粉。
權利要求
1.一種蛇皮活性肽的製備方法，其特徵在於利用生物蛋白酶水解蛇皮蛋白，再用納濾技術脫鹽濃縮，用超濾技術提純，經冷凍乾燥即得蛇皮活性肽粉。
2.一種實現權利要求1所述的蛇皮活性肽的製備方法，其特徵在於包括以下步驟和方法(1)以烏梢蛇、蝮蛇、赤練蛇、銀環蛇、眼鏡蛇、大王蛇、五步蛇、松花蛇、虎尾蛇、中國水蛇等蛇類的鮮蛇皮為原料，用清水洗淨；用絞肉機絞碎，絞碎程度由Φ6-10πιπι不鏽鋼孔板控制；用超微磨磨漿至細度10-30 μ m，所得即蛇皮漿。(2)蛇皮漿置發酵罐內，以1 1比例加入純淨水，加溫至50-65°C，加入537酸性蛋白酶、Alcalase鹼性蛋白酶、Protamex複合蛋白酶，酶解2_12小時，控制水解度DH為 10-40%，滅酶；離心過濾；即得酶解液。(3)酶解液用納濾膜進行納濾脫鹽、濃縮，納濾膜可選用聚醯胺納濾膜、聚醚碸納濾膜、 醋酸纖維素納濾膜、聚乙烯醇納濾膜等，截留分子量採用100-250DaltOn ；用超濾膜過濾， 截留分子量採用100-5000DaltOn ；所得即蛇皮活性肽溶液。(4)蛇皮活性肽溶液經-10--40°C冷凍乾燥，即得蛇皮活性肽凍乾粉。
3.一種實現權利要求1、2所述的蛇皮活性肽的製備方法，其特徵在於所得產品分子量 90% 以上分布於 200-5000Dalton 之間，其中 200-2000Dalton (2-10 Ii )佔 75% 以上，還含有二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)等營養成分。作為藥品、保健食品的功效成分進行開發利用，具有十分廣泛的前景。
全文摘要
本發明涉及一種蛇皮活性肽的製備方法，具體涉及以烏梢蛇、蝮蛇、赤練蛇、銀環蛇、眼鏡蛇、大王蛇、五步蛇、松花蛇、虎尾蛇、中國水蛇等蛇類的鮮蛇皮為原料，經清洗→絞碎→磨漿→調整物料濃度→調整物料溫度→加入蛋白酶酶解→離心過濾→滅酶→納濾脫鹽濃縮→超濾提純→冷凍乾燥等工藝流程，得到蛇皮活性肽。產品分子量90％以上分布於200-5000Dalton之間，其中200-2000Dalton(2-10肽)佔75％以上，還含有二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)等營養成分，具有良好的水溶性，優良的吸溼保溼功能，較好的酸、熱穩定性。可用於醫藥領域和保健食品生產領域。
文檔編號C12P21/06GK102277405SQ20111022507
公開日2011年12月14日 申請日期2011年8月2日 優先權日2011年8月2日
發明者唐作安 申請人:唐作安