桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用的製作方法

2023-09-18 03:54:10 2

桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用的製作方法
【專利摘要】本發明公開了一種桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用；桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為30～90%（重量%），所述苯乙醇總苷包括毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷。桂花苯乙醇苷提取物中毛蕊花糖苷含量為25～80%（重量%），苯乙醇總苷中毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷的重量之比為48:1～300:1。
【專利說明】桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及農副產品精深加工及綜合利用領域。更具體地涉及一種從桂花中提取的苯乙醇苷提取物及其製法和用途一用於製備抗衰老藥物或保健品。
【背景技術】
[0002]桂花，又名木樨、巖桂，是中國傳統十大花卉之一，廣泛栽種於淮河流域及以南地區，目前我國已形成浙江杭州、安徽六安、湖北鹹寧、湖南桃源、江蘇蘇州、廣西桂林、湖北武漢和四川成都等幾大桂花商品生產基地。桂花品種繁多，大約有152個品種，可分為四個品系，即四季桂、丹桂、銀桂、金桂。桂花除了觀賞美化以外，還具有較高的營養和藥用價值。中醫認為桂花為百藥之長，用桂花釀製的酒開胃醒神、健胃補虛，能達到「飲之壽千歲」的功效，桂花茶具有美容養顏、舒緩喉嚨、改善多痰咳嗽等功效。桂花還被做成糯米桂花藕、桂花糕、桂花杏仁豆腐等美食，為廣大老百姓所喜歡。 [0003]然而，迄今為止人們對桂花中的許多功能成分的研究還非常少，主要集中在桂花賦香成分和少數幾個藥用成分，如芳樟醇、Y -癸內酯、β -紫羅蘭酮、4-氫-β -紫羅蘭酮、棕櫚酸、α-亞麻酸。還有部分對桂花中的黃酮類組分和多酚類組分進行分離提取純化的研究，但僅限於粗提物的研究，未見單體化合物的分析。
[0004]本發明人前期的發明專利201310169455.1公開了一種桂花多酚提取物，其酚酸的重量含量為0.5%~2%，苯乙醇苷的重量含量為50%~80%，其中綠原酸的重量含量為40%~70%，綠原酸、咖啡酸及對香豆酸質量比為25~50:5~15:6~10，苯乙醇苷中毛蕊花苷的重量含量為80%~95%;同時該專利還公開了一種製備方法-高壓微波提取法。但是隨著研究的深入，我們發現桂花中還含有除了毛蕊花糖苷之外的其他的苯乙醇苷類化合物。此外，傳統的桂花多酚提取中，沒有關注苯乙醇苷化合物的穩定性，因此對提取得率和提取物純度有所影響，因此，需要在提取過程中採取措施防止苯乙醇苷的氧化和分解。

【發明內容】

[0005]本發明要解決的技術問題是提供一種含有異毛蕊花糖苷的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗裳老藥物或保健品中的應用。
[0006]為了解決上述技術問題，本發明提供一種桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用。
[0007]作為本發明的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用的改進:
[0008]桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為30~90% (重量％)，所述苯乙醇總苷包括毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷。
[0009]作為本發明的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用的進一步改進:所述桂花苯乙醇苷提取物中毛蕊花糖苷含量為25~80% (重量％)，苯乙醇總苷中毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷的重量之比為48:1~300:1。[0010]備註說明:毛蕊花糖苷約佔苯乙醇總苷含量的90%左右。
[0011]作為本發明的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用的進一步改進:所述桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為40~80% ；
[0012]所述桂花苯乙醇苷提取物中毛蕊花糖苷含量為35~70%，苯乙醇總苷中毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷的重量之比為48:1~150:1 (例如為48:1，77:1，80~150:1)。
[0013]作為本發明的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用的進一步改進:桂花苯乙醇苷提取物的製備方法包括以下步驟:
[0014](a)、將桂花乾花(水分含量< 10%)破碎(約20~40目的粉末)，加入至乙醇水溶液中，再加入抗氧化劑或抗氧化劑的水溶液，然後加入弱酸直至pH為4~6，得提取溶液；
[0015]所述乙醇水溶液中乙醇的體積濃度為30~99.9% (v/v);上述濃度較佳為50~90% ；
[0016]所述每IKG桂花乾花配用10~15L的乙醇水溶液；
[0017]所述抗氧化劑與桂花乾花的重量比為:0.05~10% ;上述重量比較佳為0.2% ；
[0018](b)、將提取溶液於50~80°C下進行浸提1.5~3.0小時,冷卻至室溫後,過濾或離心，得到提取液；
[0019](C)、將提取液直接經減壓濃縮回收乙醇，得到濃縮液；再將濃縮液用水稀釋，直至所得稀釋液的pH為4-6 ；
[0020](d)、將稀釋液經吸附樹脂吸附，用體積濃度為20~50%的乙醇水溶液洗脫；
[0021](e)、洗脫液減壓濃縮後，乾燥(例如為噴霧乾燥、低壓烘乾或微波乾燥)，得到桂花苯乙醇苷提取物。
[0022]作為本發明的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用的進一步改進:
[0023]所述抗氧化劑為抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、異抗壞血酸、異抗壞血酸鈉、維生素E、類胡蘿蔔素、竹葉抗氧化劑或茶多酚；
[0024]所述弱酸為甲酸、乙酸、羥基乙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、富馬酸、抗壞血酸、肉桂酸、苯甲酸、阿魏酸、咖啡酸、沒食子酸或磷酸。
[0025]作為本發明的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用的進一步改進:所述桂花為金桂、銀桂、四季桂或丹桂。
[0026]作為本發明的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用的進一步改進:製備方法包括以下步驟:
[0027](a)、將Ikg丹桂乾花破碎(水分含量< 10%)破碎至能過20目的篩，加入至IOL體積濃度為90%的乙醇水溶液中，再加入竹葉抗氧化物溶液2L，利用lmol/L乙酸水溶液調整PH為5，得提取溶液；
[0028]所述每升竹葉抗氧化物溶液中含有Ig竹葉抗氧化物；
[0029](b)、將提取溶液於50~80°C下進行浸提2小時，冷卻至室溫後，過濾或離心，得到提取液；
[0030](C)、將提取液直接經減壓濃縮回收乙醇，得到濃縮液；再將濃縮液用水稀釋，直至所得稀釋液的PH為4;
[0031](d)、將稀釋液經吸附樹脂吸附，用體積濃度為30%的乙醇水溶液洗脫；[0032](e)、洗脫液減壓濃縮後，經噴霧乾燥、低壓烘乾或微波乾燥，可得到桂花苯乙醇苷提取物。
[0033]作為本發明的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用，製備方法包括以下步驟:
[0034](a)、將Ikg金桂乾花破碎(含水率< 10%)破碎至能過20目的篩，加入至15L體積濃度為80%乙醇水溶液中，再加入異抗壞血酸鈉水溶液2L，利用lmol/L甲酸水溶液調整提取溶液PH為5，得提取溶液；
[0035]每升異抗壞血酸鈉水溶液中含有Ig異抗壞血酸鈉；
[0036](b)、將提取溶液於50~80°C下進行浸提2小時，冷卻至室溫後，過濾或離心，得到提取液；
[0037](C)、將提取液經減壓濃縮回收乙醇，得到濃縮液；再用水稀釋，直至所得稀釋液的PH 為 5 ;
[0038](d)、將稀釋液經吸附樹脂吸附，用體積濃度為30%的乙醇水溶液洗脫；
[0039](e)、洗脫液減壓濃縮後，經噴霧乾燥、低壓烘乾或微波乾燥，得到桂花苯乙醇苷提取物。
[0040]在本發明中，室溫一般是指10~25°C。
[0041]本發明人經過多年深入研究，對桂花的各種成分進行了提取分離，獲得了桂花苯乙醇苷提取物，對該提取物的研究表明，該提取物主要含毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷等成分。在此基礎上完成了本發明。`
[0042]如本文所用，桂花(Osmanthus fragrans)指桂花樹的花朵。
[0043]本發明採用的原料可以進行預處理，也可以不經過預處理。一種優選原料是粉末形式的桂花。例如，收集鮮桂花，打成漿壓榨或收集桂花乾花，將其粉碎到約20~40目的粉末。
[0044]可用於本發明的桂花品種沒有特別限制，可以是不同品種的桂花，優選金桂、銀桂、四季桂、丹桂。
[0045]本發明的桂花苯乙醇苷提取物是一種以毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷為主的混合物。用分光光度法檢測，以毛蕊花糖苷為標準品，測得提取物中苯乙醇總苷的含量為30~90%(較佳地為40~80% );用HPLC技術分析，提取物中毛蕊花糖苷含量為25~80%(較佳地為35~70 % )，毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷含量之比為48:1~300:1 (較佳地為48:1~150:1)。
[0046]以藥物組合物或保健品組合物為例，它們可以為固態(如顆粒劑、片劑、凍乾粉、栓劑、膠囊、舌下含片)或液態(如口服液)或其他合適的形狀。本發明的桂花苯乙醇苷提取物的含量通常為組合物重量的1%~99%，較佳地為2%~96%，更佳地為5%~90%，最佳地15% ~80%ο
[0047]保健品組合物可以為單劑或多劑形式。按施用劑量計，通常含有10~2000mg/劑，較佳地約20~1000mg/劑，更佳地50~500mg/劑。
[0048]本發明的藥物組合物或保健品組合物可以通過常規途徑進行給藥，優選方式是口月艮。藥物製劑應與給藥方式相匹配。本發明的施用量，按活性物質計算，通常為每天桂花苯乙醇苷提取物0.1~500mg/kg體重,較佳地約0.5~50mg/kg體重。此外,本發明的製劑還可與其他輔助製劑一起使用，例如，其他輔助製劑包括各種現有的抗癌活性物質或抗氧化活性物質。
[0049]本發明的主要優點是:
[0050](a)提供了一種來源廣闊、組成明晰、品質優良、質量可控、用途廣泛並具有抗衰老用途的桂花苯乙醇苷提取物。
[0051](b)通過本發明技術實現了桂花中苯乙醇糖苷的高效提取，並且工藝操作簡便，得到的桂花苯乙醇苷提取物質量好，品質穩定。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0052]下面結合附圖對本發明的【具體實施方式】作進一步詳細說明。
[0053]圖1是桂花苯乙醇苷提取物的液相色譜圖。
[0054]圖2是毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷的液相色譜圖。
[0055]圖3是毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷的化學結構圖。
【具體實施方式】
[0056]下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用於說明本發明而不用於限制本發明的範圍。下列實施例中未註明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件，或按照製造廠商所建議的條件。
[0057]通用方法
`[0058]I)苯乙醇總苷含量測定:
[0059]將50.0mg桂花苯乙醇苷提取物溶解於甲醇,定容至100ml,取3ml加入石英比色皿中用紫外分光光度計在338nm處檢測其吸光值，重複測定3次，以毛蕊花糖苷為標準品，根據標準曲線計算得到苯乙醇總苷含量。
[0060]2)桂花苯乙醇苷提取物中毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷含量測定-高效液相色譜(HPLC):
[0061]桂花苯乙醇苷提取物加入2% (體積％)乙酸溶液溶解，製成500 μ g/mL溶液，過0.45 μ m膜，進樣。高效液相色譜儀器:島津LC-2010A高效液相，SPD-20A紫外檢測器，BDSC18柱(4.6mmX250mm,5ym 1.d.)，流動相:乙腈:2%醋酸溶液(20:80的體積比)，檢測波長:330nm,流速:0.8mL/min,柱溫:35°C,進樣體積10 μ L。以毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷為標準品，根據保留時間定性，根據峰面積外標法定量。
[0062]實施例1:
[0063]將Ikg金桂乾花破碎(含水率≤10%,破碎至能過20目的篩)，加入15L的80% (體積％)乙醇水溶液中，再加入0.1%的異抗壞血酸鈉水溶液(即，所述每升異抗壞血酸鈉水溶液中含有Ig異抗壞血酸鈉)2L，利用lmol/L甲酸水溶液調整提取溶液pH在5左右；在溫度50°C~80°C下進行浸提2小時，冷卻至室溫後，過濾得到提取液；將提取液直接經減壓濃縮(於0.010~0.lOOMPa，溫度為50~60°C)，回收乙醇，得到濃縮液(約4L)，再用水稀釋，直至稀釋液PH為5左右；將稀釋液經吸附樹脂吸附(吸附樹脂為HPD300，用量為1L)，用30%(體積％)的乙醇水溶液2L洗脫；洗脫液減壓濃縮(於0.010~0.1OOMPa MPa，溫度為75~90°C)後，經噴霧乾燥(進風溫度為180~200°C，出風溫度為85~95°C)，即可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末184g。
[0064]對提取物進行成分分析，結果為:桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為75.3%，圖1-3表明，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(69.4%)和異毛蕊花糖苷(0.9%)，毛蕊花糖苷:異毛蕊花糖苷=77:1 (重量比)。
[0065]對比例1-1、將實施例1中的「15L的80% (體積％)乙醇水溶液」改成「12L的純乙
醇」，其餘同實施例1。
[0066]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末171g。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為70.5%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(65.6%)和異毛蕊花糖苷(0.9%)。
[0067]對比例1-2、將實施例1中的「15L的80% (體積％)乙醇水溶液」改成「20L的60%(體積％)乙醇水溶液」，其餘同實施例1。
[0068]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末187g。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇苷含量為71.2%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(67.3%)和異毛蕊花糖苷(0.8%)。
[0069]對比例2-1、將「0.1%異抗壞血酸鈉水溶液2L」改成:0.04%異抗壞血酸鈉水溶液(即，所述每升異抗壞血 酸鈉水溶液中含有0.4g異抗壞血酸鈉)2L ;其餘同實施例1。
[0070]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末123.Sg。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為25.2%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(23.4%)和異毛蕊花糖苷(0.2%)ο
[0071]對比例2-2、將「0.1% (質量％)異抗壞血酸鈉水溶液2L」改成:1.0%異抗壞血酸鈉水溶液(即，所述每升異抗壞血酸鈉水溶液中含有IOg異抗壞血酸鈉)2L ;其餘同實施例1。
[0072]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末172.7g。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為75.3%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(69.4%)和異毛蕊花糖苷(0.9%)ο
[0073]對比例3-1，將調節pH至5改成調節3.5，其餘同實施例1。
[0074]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末160.6g。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為64.2%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(60.5%)和異毛蕊花糖苷(0.7%)ο
[0075]對比例3-2，將調節pH至5改成調節6.5，其餘同實施例1。
[0076]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末151.9g。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為61.1%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(56.8%)和異毛蕊花糖苷(0.7%)ο
[0077]對比例4-1、將「 50 V~80 V下進行浸提2小時」改成「 30 V~49 V下進行浸提4小時」，其餘同實施例1。
[0078]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末142.Sg。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為74%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(68.5%)和異毛蕊花糖苷(0.85%)。
[0079]對比例4-2、將「50°C~80°C下進行浸提2小時」改成「90°C~100°C下進行浸提2小時」，其餘同實施例1。
[0080]最終可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末194.6g。所得的桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為70.5%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(66.8%)和異毛蕊花糖苷(0.9%)O
[0081]實施例2:
[0082]將Ikg四季桂乾花破碎(含水率≤10%,破碎至能過20目的篩)，加入IOL的90%(體積％)乙醇水溶液中，再加入0.2%抗壞血酸水溶液(即，所述每升抗壞血酸水溶液中含有2g抗壞血酸)2L，利用0.5mol/L乙酸水溶液調整提取溶液pH在4左右；在溫度50°C~80°C下進行浸提2小時，冷卻至室溫後，過濾得到提取液；將提取液直接經減壓濃縮(於0.010~0.lOOMPa，溫度為50~60°C)，回收乙醇，得到濃縮液(約1.5L)，再用水稀釋，直至稀釋液pH為4左右；將稀釋液經吸附樹脂吸附(所述吸附樹脂為HPD300，用量為1L)，用30% (體積％)的乙醇水溶液2L洗脫；洗脫液減壓濃縮(於0.010~0.1OOMPa MPa，溫度為75~90°C )後，經微波乾燥(工藝參數為:微波功率500W，微波輻射時間60min)，即可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末234g。 [0083]對提取物進行成分分析，結果桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為47.3%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(40.5%)和異毛蕊花糖苷(0.2%)，毛蕊花糖苷:異毛蕊花糖苷=203 (重量比)。
[0084]實施例3:
[0085]將Ikg丹桂乾花破碎(含水率≤10%，破碎至能過20目的篩)，加入至IOL的90%(體積％)乙醇溶液中，再加入0.1%竹葉抗氧化物水溶液(即，所述每升竹葉抗氧化物水溶液中含有Ig竹葉抗氧化物)2L，利用lmol/L乙酸水溶液調整提取溶液pH在5左右；得提取溶液；將提取溶液在溫度50°C~80°C下進行浸提2小時，冷卻至室溫後，過濾得到提取液；將提取液直接經減壓濃縮(於0.010~0.lOOMPa，溫度為50~60°C)，回收乙醇，得到濃縮液(約2.5L)，再用水稀釋，直至稀釋液pH為4左右；將稀釋液經吸附樹脂吸附(所述吸附樹脂為HPD300，用量為1L)，用30%(體積％)的乙醇水溶液2L洗脫；洗脫液減壓濃縮(於0.010~0.1OOMPa MPa，溫度為75~90°C )後，經微波乾燥(工藝參數為:微波功率500W，微波輻射時間60min)，即可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末258g。
[0086]對提取物進行成分分析，結果桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為74.5%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(68.9%)和異毛蕊花糖苷(1.4%)，毛蕊花糖苷:異毛蕊花糖苷=48 (重量比)。
[0087]實施例4:
[0088]將Ikg銀桂乾花破碎(含水率≤10%，破碎至能過20目的篩)，加入15L的50% (體積％)乙醇溶液中，再加入0.1%抗壞血酸水溶液(即，所述每升抗壞血酸水溶液中含有Ig抗壞血酸)2L，利用lmol/L乙酸水溶液調整提取溶液pH在4左右，得提取溶液；將提取溶液在溫度50°C~80°C下進行浸提2小時，冷卻至室溫後，過濾，得到提取液；將提取液直接經減壓濃縮(於0.010~0.lOOMPa，溫度為50~60°C)，回收乙醇，得到濃縮液(約10L)，再用水稀釋，直至稀釋液PH為4左右；將稀釋液經吸附樹脂吸附(所述吸附樹脂為HPD300，用量為1L)，用30% (體積％)的乙醇水溶液2L洗脫；洗脫液減壓濃縮(於0.010~0.1OOMPa MPa,溫度為75~90°C)後，經微波乾燥(工藝參數為:微波功率500W，微波輻射時間60min)，即可得到桂花苯乙醇苷提取物粉末107g。
[0089]對提取物進行成分分析，結果桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為86.1%，桂花苯乙醇苷提取物含有毛蕊花糖苷(79.3%)和異毛蕊花糖苷(0.3%)，毛蕊花糖苷:異毛蕊花糖苷=264 (重量比)。
[0090]實施例5、清除自由基
[0091](I) DPPH 法
[0092]實驗前精確稱取20mg的DPPH溶於適量甲醇中，定容至500ml。以25-800 μ MTrolox為對照品，取稀釋一定倍數的樣品或對照品溶液lOOul，加入3.9mlDPPH，37°C避光反應60min,於515nm波長處測吸光度。以Trolox濃度為橫坐標，吸光值為縱坐標作標準曲線，根據標準曲線計算樣品抗氧化能力，結果以每克提取物中Trolox當量表示(mmolTrolox/g Dff)ο
[0093](2) ABTS 法
[0094]分別配置7.4mM ABTS以及2.6mM過硫酸鉀，臨用前等體積混合，37°C避光反應12h，稀釋27倍後使用。以25-800 μ M Trolox為對照品，取稀釋一定倍數後的樣品或對照品溶液lOOul，加入3.0ml ABTS反應液，37°C避光反應60min後於734nm處測吸光度。以Trolox濃度為橫坐標，吸光值為縱坐標作標準曲線，根據標準曲線計算樣品抗氧化能力，結果以每克提取物中Trolox當量表示(mmol Trolox/g Dff)0
[0095](3) FRAP 法
[0096]以40mM HCl 為溶劑配置 IOmM TPTZ 溶液，20mM FeCl3 水溶液，300mM，pH=3.6 乙酸鈉緩衝液，三者以1:1:10 (v/v/v)混合得FRAP。以FeSO4為對照品，取稀釋一定倍數後的樣品或對照品溶液lOOul，加入3.0ml FRAP反應液，37°C避光反應60min後於595nm處測吸光度。以FeS04濃度為橫坐標，吸光值為縱坐標作標準曲線，根據標準曲線計算樣品抗氧化能力，結果以每克提取物中FeS04當量表示(mmol FeS04/g Dff)0
[0097](4) ORAC 法
[0098]配置PH7.4，濃度為75mM磷酸鹽緩衝液，以其為溶劑配製螢光素及AAPH溶液。以0-80 μ M Trolox為對照品，分別向黑色酶標96孔板中加入20ul樣品(稀釋一定倍數後)、120ul螢光素，37°C保溫5min後加入60ul AAPH，使螢光素和AAPH終濃度分別為70nM和12mM,立即進入螢光酶標儀測定。測定條件為每2min測定一次，持續3h，激發波長及發射波長分別為485nm、530nm。以Trolox濃度為橫坐標，吸光值為縱坐標作標準曲線，根據標準曲線計算樣品抗氧化能力，結果以每克提取物中Trolox當量表示(mmol Trolox/g DW)。
[0099]結果如表1所示，實施例1、3、4製備的桂花苯乙醇苷提取物有較強的清除自由基、抗氧化的能力，並優於發明專利【201310169455.1】中實施例1製備所得桂花多酚提取物。
[0100]表1桂花苯乙醇苷提取物清除自由基能力
[0101]
【權利要求】
1.桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用。
2.根據權利要求1所述的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用，其特徵在於: 桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為30~90% (重量％)，所述苯乙醇總苷包括毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷。
3.根據權利要求2所述的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用，其特徵在於:所述桂花苯乙醇苷提取物中毛蕊花糖苷含量為25~80% (重量％)，苯乙醇總苷中毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷的重量之比為48:1~300:1。
4.根據權利要求3所述的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用，其特徵在於:所述桂花苯乙醇苷提取物中苯乙醇總苷含量為40~80% ； 所述桂花苯乙醇苷提取物中毛蕊花糖苷含量為35~70%，苯乙醇總苷中毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷的重量之比為48:1~150:1。
5.根據權利要求1~4任一所述的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用，其特徵在於: 桂花苯乙醇苷提取物的製備方法包括以下步驟: (a)、將桂花乾花(水分含量<10%)破碎，加入至乙醇水溶液中，再加入抗氧化劑或抗氧化劑的水溶液，然後加入弱酸直至pH為4~6，得提取溶液； 所述乙醇水溶液中乙醇的體積濃度為30~99.9% ； 所述每IKG桂花乾花配用10~15L的乙醇水溶液； 所述抗氧化劑與桂花乾花的重量比為:0.05~10% ； (b)、將提取溶液於50~80°C下進行浸提1.5~3.0小時，冷卻至室溫後，過濾或離心，得到提取液； (C)、將提取液經減壓濃縮回收乙醇，得到濃縮液；再用水稀釋，直至所得稀釋液的pH為4~6 ; (d)、將稀釋液經吸附樹脂吸附，用體積濃度為20~50%的乙醇水溶液洗脫； Ce),洗脫液減壓濃縮後，乾燥，可得到桂花苯乙醇苷提取物。
6.根據權利要求5所述的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用，其特徵在於: 所述抗氧化劑為抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、異抗壞血酸、異抗壞血酸鈉、維生素E、類胡蘿蔔素、竹葉抗氧化劑或茶多酚； 所述弱酸為甲酸、乙酸、羥基乙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、富馬酸、抗壞血酸、肉桂酸、苯甲酸、阿魏酸、咖啡酸、沒食子酸或磷酸。
7.根據權利要求6所述的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用，其特徵在於:所述桂花為金桂、銀桂、四季桂或丹桂。
8.根據權利要求7所述的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用，其特徵在於製備方法 包括以下步驟: (a)、將Ikg丹桂乾花(水分含量< 10%)破碎至能過20目的篩，加入至IOL體積濃度為90%的乙醇水溶液中，再加入竹葉抗氧化物溶液2L，利用lmol/L乙酸水溶液調整pH為5，得提取溶液；每升竹葉抗氧化物溶液中含有Ig竹葉抗氧化物； (b)、將提取溶液於50~80°C下進行浸提2小時，冷卻至室溫後，過濾或離心，得到提取液； (C)、將提取液經減壓濃縮回收乙醇，得到濃縮液；再用水稀釋，直至所得稀釋液的pH為4 ； (d)、將稀釋液經吸附樹脂吸附，用體積濃度為30%的乙醇水溶液洗脫； (e)、洗脫液減壓濃縮後，經噴霧乾燥、低壓烘乾或微波乾燥，得到桂花苯乙醇苷提取物。
9.根據權利要求7所述的桂花苯乙醇苷提取物在製備抗衰老藥物或保健品中的應用，其特徵在於製備方法包括以下步驟: (a)、將Ikg金桂乾花破碎(含水率<10%)破碎至能過20目的篩，加入至15L體積濃度為80%乙醇水溶液中，再加入異抗壞血酸鈉水溶液2L，利用lmol/L甲酸水溶液調整提取溶液PH為5，得提取溶液； 每升異抗壞血酸鈉水溶液中含有Ig異抗壞血酸鈉； (b)、將提取溶液於50~80°C下進行浸提2小時，冷卻至室溫後，過濾或離心，得到提取液；` (C)、將提取液經減壓濃縮回收乙醇，得到濃縮液；再用水稀釋，直至所得稀釋液的pH為5 ； (d)、將稀釋液經吸附樹脂吸附，用體積濃度為30%的乙醇水溶液洗脫； (e)、洗脫液減壓濃縮後，經噴霧乾燥、低壓烘乾或微波乾燥，得到桂花苯乙醇苷提取物。
【文檔編號】A61P39/06GK103768151SQ201410043488
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2014年1月29日 優先權日:2014年1月29日
【發明者】陸柏益, 毛淑琴, 蔣易蓉, 熊麗娜, 周菲, 楊佳佳, 胡銀洲, 諶燦曦, 孫啟鴻 申請人:浙江大學