製備轉移因子的工藝方法-全濾法的製作方法

2023-09-17 20:46:30 2

專利名稱：製備轉移因子的工藝方法-全濾法的製作方法
技術領域：
本發明屬於醫藥技術領域，涉及生物製品轉移因子的製備工藝的改進技術。
背景技術：
轉移因子發現於二十世紀四十年代並於二十世紀七十年代應用於臨床，是一種能傳遞遲發性超敏反應、分子量小於10000的具有生物活性的多肽及核苷酸的混合物，其具有活性不被胰蛋白酶、核糖核酸酶所破壞，耐熱、無種屬界限的特點。目前主要用於對病毒性感染及自身免疫性質病的治療。能雙向調節機體的免疫功能，對於細胞免疫功能與體液免疫功能的增高和低下具有雙向免疫調節作用。同時促進T淋巴細胞的增殖，對骨髓造血免疫功能有調節作用。
轉移因子的一般工藝流程如下(1)對新鮮組織進行預處理，用勻漿搗碎機進行勻漿後進行-20℃-37℃反覆凍融1-3次，以破碎細胞。
(2)用高速冷凍離心機離心，取離心液。
(3)用透析技術在4℃條件下透析，取透析外液。
(4)將透析外液進行限分子量超濾，截留分子量6000-10000取超濾液。
(5)將所獲不同分子量的超濾液供製備不同劑型的轉移因子需要包括凍乾粉針、水針、口服液。
(6)根據製備轉移因子劑型的濃度需要用凍融法適量濃縮。
上述製備轉移因子的工藝流程從原料處理到製備出二級半成品所需時間長約一星期，細胞破碎不完全及原材料浪費多，得率低，成本高而活性容易降低，產品濃縮費時費力，有一定難度。

發明內容
本發明解決了以往轉移因子製備工藝中的凍融、透析等步驟而造成了製備的工藝時間長，生物活性受影響，有效成分產出率低，生產成本高等諸多不足之處，本發明的新製備工藝具有製備時間短、生物活性得以保護，產出率高同時將納濾技術應用到轉移因子半成品原料液濃縮上獲取高濃度原料品等眾多優點，適合於製備不同劑型不同規格需要的轉移因子製劑。
本發明提出的製備的轉移因子的工藝流程如下(1)在12℃以下用勻漿搗碎機高速搗碎勻漿處理原材料並可根據細胞破碎率，控制溫度及勻漿速率是保證活性和保證高得率的重要步驟。
(2)高速冷凍離心後取離心液採用壓濾技術經壓濾器壓濾為第一步濾過，去除粗蛋白。
(3)採用超濾技術用不同規格分子量的超濾膜根據不同製劑需要進行分級超濾，獲取分子量為6000-10000的超濾液得到為一級原料液適應製備單位含量較低的不同劑型轉移因子產品的需要。
(4)根據轉移因子生產產品單位含量濃度的需要，應用納濾技術進行濃縮成二級產品為高濃度原料液，以滿足製備高含量濃度製劑的需要。
本製備工藝發明要點如下(1)在低溫條件下，應用高速勻漿器搗碎脾臟組織並可根據細胞破碎率，或可對對經過勻漿器勻漿的組織進行處理以使脾臟等組織中的細胞破碎更完全，在保證生物活性與溫度條件下，提高了轉移因子的產出率。
(2)高速冷凍離心後取離心液經壓濾器壓濾除掉粗蛋白為第一步濾過，此步驟縮短了生產時間，又進一步增加產出率，保證了製品的生物活性。
(3)採用用不同規格分子量超濾膜進行梯度分級連續超濾截流分子量為6000以下或10000以下的轉移因子超濾液供製備不同劑型轉移因子產品的需要。如注射用轉移因子(限分子量6000)口服用轉移因子(限分子量10000)，使產品質量完全符合國家該產品質量標準的要求，保證產品質量。
(4)將納濾濃縮技術應用到轉移因子超濾液的濃縮，可製備出高濃度的轉移因子原料液，以供製備高含量轉移因子製劑的產品需要或根據需要儲存-30℃備用。
權利要求
製備轉移因子工藝流程採用各種不同的濾過法—壓濾法、梯度超濾法、納濾法完成製備全過程是其主要工藝特徵。1、在10-12℃以下用高速組織搗碎機對新鮮脾臟組織進行處理以最大限度破碎細胞，保證了有效成分的高提取率。
2.用高速冷凍離心法對經過粉碎處理的液體進行處理取離心上清液，棄參渣。
3.使用壓濾機對冷凍離心所獲取的離上清液進行壓濾通過壓濾技術以去除粗蛋白縮短了生產時間。
4.應用超濾技術，通過使用超濾器採用不同規格分子量超濾膜進行的梯度超濾技術對去除了粗蛋白的壓濾液進行分級超濾最後取截留分子量為6000-10000以下超濾液物質。
5.應用鈉濾技術對轉移因子超濾液根據含量濃度需要進行濃縮，獲取高濃度原料液。供轉移因子系列不同劑型產品生產高含量轉移因子製劑需要或可放入零下30℃以下儲存備用。
6.採用壓濾、分級超濾、納濾、濾違技術手段為其主要工藝特徵，提高了產出率，縮短生產工藝時間，降低了成本，保證了製劑的生物活性及質量，可根據需要獲取不同濃度的轉移因子製劑。
7.應用納濾濃縮技術對轉移因子原料藥進行濃縮的這一轉移因子濃縮方法。
全文摘要
本項發明屬於生物醫藥高新技術領域，該發明涉及生物製品轉移因子製備新工藝方法。其主要步驟為採用不同的濾過方法來製備轉移因子，本發明可明顯縮短製備工藝時間，提高產出率，保證製品的生物活性，大幅降低了生產成本等優點。其主要製備步驟對新鮮的脾臟進行預處理後按比例加入預冷的溫度控制在10℃－12℃去熱源無離子液。用高速勻漿搗碎機對脾進行破碎細胞；經高速冷凍離心後取得離心上清液經壓濾機進行壓濾；壓濾後取得的壓濾液根據製備製劑不同劑型的要求經不同規格超濾器進行梯度分級超濾。製劑製備出分子量為6000－10000的原料藥，可再根據生產不同製劑需要應用納濾技術將超濾液進行濃縮成所需要的製劑。
文檔編號A61K38/02GK1546165SQ200310118439
公開日2004年11月17日 申請日期2003年12月16日 優先權日2003年12月16日
發明者霍保來 申請人:北京世紀昭寶轉移因子研究中心