一種提高蠶桑生物質中dnj含量的微生物發酵法
2023-09-21 20:26:00 3
一種提高蠶桑生物質中dnj含量的微生物發酵法
【專利摘要】本發明涉及一種提高蠶桑生物質中DNJ含量的微生物發酵法，是將蠶桑生物質自然乾燥或熱風乾燥，粉碎，過篩，備用；靈芝菌株經活化後培養靈芝菌液；按(4-5):(1.0-1.2):(0.8-1.0)的比例分別稱取蠶桑生物質、葡萄糖和KNO3溶於18-20倍體積的水中，混勻，調pH值至中性，120℃滅菌20-30min，接種體積比為2-3%的活化靈芝菌液，室溫搖床振蕩發酵培養2-3天；收集經靈芝菌株發酵的產物，在60℃下熱風乾燥、粉碎，經處理後，蠶桑生物質的DNJ含量顯著提高，大分子物質的含量顯著降低，工藝簡便，易於工業化生產。
【專利說明】—種提高蠶桑生物質中DNJ含量的微生物發酵法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種利用微生物發酵技術提高蠶桑生物質中1-脫氧野尻黴素含量的方法，屬於發酵工藝技術應用領域。
【背景技術】
[0002]1-脫氧野尻黴素(1-deoxynojirimycin, DNJ)是一種多羥基哌唳生物鹼,具有通過抑制α-葡萄糖苷酶活性，進而抑制餐後血糖升高(降血糖)、抗病毒、抗腫瘤等多種生物學活性，在食品、醫藥等領域中具有重要的應用價值。自然界中含有DNJ的生物如桑樹、鴨蹠草、風信子、沙參屬植物、爵床科植物、鏈黴菌屬及芽孢桿菌屬，其中以桑樹的含量最為豐富，然而，桑葉中DNJ含量約為0.10%，相對於臨床需求仍然偏低，用桑葉加工成的藥品或保健品功效不明顯；其次，桑樹生長期較長，產量易收到季節影響，難以穩定持續地供應市場；而且，桑葉中DNJ的含量受諸多因素影響，如季節、葉位、大氣環境和土壤微環境等。因此，限制了以桑樹為來源的DNJ在醫藥、食品上的應用。市場迫切需要一種能夠有效提高含生物材料DNJ含量的方法。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是提供一種提高蠶桑生物質中DNJ含量的方法，來源易於獲得，製備工藝簡單。
[0004]為了達到上述目的，本發明實現目的所採用的技術方案如下:
[0005]一種提高蠶桑生物質中DNJ含量的微生物發酵法，包括以下步驟:
[0006](1)蠶桑生物質的處理:將蠶桑生物質如桑葉、桑根、桑枝、蠶糞、家蠶幼蟲，自然乾燥或熱風乾燥，粉碎，過40目篩,備用；
[0007](2)微生物菌株的選擇及菌液培養:選用靈芝菌株，經活化後在普通PDA培養液中培養至長滿菌絲球，即為靈芝菌液。
[0008](3)發酵:按(4-5): (1.0-1.2): (0.8-1.0)的重量比例分別稱取蠶桑生物質、葡萄糖和KNO3，溶於18-20倍體積的水中，混勻，調pH值至中性，120°C滅菌20_30min，接種體積比為2-3%的活化靈芝菌液，在25°C -28°C下，IOOrpm搖床振蕩發酵培養2_3天；
[0009](4)乾燥粉碎:收集經靈芝菌株發酵的產物，在60°C下熱風乾燥、粉碎，即得富含DNJ的原料粉。
[0010]本發明的微生物發酵方法提高蠶桑生物質中DNJ含量的優點和有益效果:
[0011]1、採用微生物發酵法，將靈芝菌株的菌液加入到蠶桑生物質中，經液體發酵後蠶桑生物質的DNJ含量顯著提高，技術工藝簡便，易於工業化生產；
[0012]2、以桑樹枝條為原料，或者以桑葉為食的家蠶(具有累積DNJ的作用，研究表明，5齡第3天家蠶幼蟲體內DNJ的含量是桑葉中的2.7倍)為原料，易於獲得，來源廣泛；
[0013]3、經微生物發酵後蠶桑生物質中大分子物質(如蛋白質、核酸等)或不利於消化物質(生物鹼、脂肪等)可進行降解作用，提高其消化吸收率。【具體實施方式】
[0014]下面通過實施例對本發明的微生物發酵提高蠶桑生物質中DNJ含量的方法進行進一步具體描述:
[0015]實施例1
[0016]一種提高蠶桑生物質中DNJ含量的微生物發酵法，包括以下步驟:
[0017](I)分別收集以下蠶桑生物質:成熟桑葉、桑根、桑枝、蠶糞、5齡家蠶幼蟲，自然乾燥或60°C熱風乾燥，經普通粉碎機粉碎過40目篩。
[0018](2)微生物菌株的選擇與培養:
[0019]選用靈芝菌株(中國科學院微生物研究所)，經活化後(採用常規微生物活化技術)在普通PDA培養液中培養靈芝菌液，至長滿菌絲球，即為靈芝菌液。
[0020](3)微生物發酵:
[0021]按5:1:0.8的重量比分別稱取蠶桑生物質、葡萄糖和KNO3溶於20倍體積的水中，混勻，調pH值至6.97，120°C滅菌20min ;然後，接種1/50體積的活化靈芝菌液，在26°C下，IOOrpm搖床振蕩發酵培養2_3天。
[0022](4)乾燥粉碎:
[0023]收集經靈芝菌株 發酵的蠶桑生物質產物，在60°C下熱風乾燥、粉碎，即得富含DNJ的原料粉。
[0024]實施例1各種蠶桑生物質經發酵後DNJ含量和大分子物質(如蛋白質、核酸等)含量比較數據見表1:
[0025]表1
[0026]
【權利要求】
1.一種提高蠶桑生物質中DNJ含量的微生物發酵法，包括以下步驟: (1)蠶桑生物質的處理:將蠶桑生物質自然乾燥或熱風乾燥，粉碎，過40目篩，備用； (2)微生物菌株的選擇:選用靈芝菌株，經活化後在普通PDA培養液中培養至長滿菌絲球，得到靈芝菌液，備用； (3)發酵:按(4-5): (1.0-1.2): (0.8-1.0)的重量比分別稱取蠶桑生物質、葡萄糖和KNO3，溶於18-20倍體積的水中，混勻，調pH值至中性，120°C滅菌20_30min，接種體積比為2-3%的活化靈芝菌液，在25°C _28°C下，搖床振蕩發酵培養2_3天； (4)乾燥粉碎:收集經靈芝菌株發酵的產物，乾燥、粉碎，即得富含DNJ的原料粉。
2.根據權利要求1所述的提高蠶桑生物質中DNJ含量的微生物發酵法，其特徵在於所述的蠶桑生物質是桑葉、桑根、桑枝、蠶糞或家蠶幼蟲。
【文檔編號】C12R1/645GK103789367SQ201410019238
【公開日】2014年5月14日 申請日期:2014年1月16日 優先權日:2014年1月16日
【發明者】桂仲爭, 賈俊強, 蔣運鋼 申請人:江蘇科技大學