快速獲取大量根結線蟲雌蟲的簡易方法
2023-10-05 02:18:54
專利名稱：快速獲取大量根結線蟲雌蟲的簡易方法
技術領域：
本發明涉及一種獲得大量雌性根結線蟲的簡易方法。適用於植物病理學、植物線蟲學的研究、植物病理學和植物線蟲學實驗教學課程以及在根結線蟲分類學等方面有極其重要的利用價值。
背景技術：
會陰花紋是根結線蟲種類鑑定的重要的形態這依據，製備會陰花紋的玻片及實驗教學中需要大量的雌蟲，而雌性根結線蟲均埋生在寄主根組織內部，獲得雌蟲必須在解剖鏡下解剖根結，取出內部的雌蟲，在操作過程中，看不清楚內部的雌蟲，因此，在解剖時經常弄破雌蟲，以致花費大量的時間獲得少量的雌蟲，事倍功半。
發明內容
本發明的目的是提供一種短時間內可以獲得大量完整雌性根結線蟲的簡易方法， 以克服現有獲取雌性根結線蟲技術費時費力和蟲體易破的不足。為達到上述目的，本發明採取技術方案是第一步利用細菌在25°C -30°C溫度下，分解腐敗植物根部的表皮和皮層組織；第二步將分解後的腐敗植物根的表皮和皮層脫落，釋放內部的雌蟲，然後通過 20目和80目的套篩，收集80目篩子上的殘留物，在15X解剖鏡下觀察到大量的白色梨形雌蟲。第三步在體視解剖鏡下或在光線充足處用細毛筆直接挑取根結線蟲白色雌蟲。本發明更詳細的步驟為第一步取新鮮的、表現根結症狀的植物病根，用自來水衝去表面的泥土，剪成段狀置於相應大小的燒杯中，加入自來水，浸沒根組織，然後將燒杯置於恆溫箱中直至植物病根部的表皮和皮層組織分解。上述恆溫箱的溫度一般控制在25 °C "30 °C。第二步將處理後的病根移入組織搗碎機組織攪拌，使腐敗的表皮和皮層脫落，釋放內部的雌蟲，再通過20目和80目的標準篩，收集80目的殘留物到小皿中，解剖鏡下可看到大量白色的梨形的根結線蟲雌蟲。上述組織攪拌時間一般為30秒鐘，第三步在體視解剖鏡下或在光線充足處用細毛筆直接挑取根結線蟲白色雌蟲。本發明的優點是1、避免在解剖鏡下逐一解剖根結，且取出雌蟲時易被弄破。2、在短時間內，獲得雌蟲量大，完整性好。3、方法簡單，不需要特殊的儀器設備為了驗證本發明的優點，在同等條件下利用本發明方法和常規方法進行對比試驗，結果表明，利用本方法30分鐘可獲得50-60個或更多完整的雌蟲，而用常規方法在體視鏡直接解剖，如果獲得同樣數量的雌蟲需要2-3個小時，且需要一直在鏡下操作，費時費力。上述試驗結果說明本發明方法在短時間內可獲得大量的雌性根結線蟲，操作簡單，不需要特殊儀器設備，彌補了常規技術費時費力和蟲體易破的不足。
圖1是利用本發明方法30分鐘獲得的部分南方根結線蟲雌蟲的顯微鏡放大圖，其中 bar = 1000 μ m ；圖2是利用本發明方法30分鐘獲得的部分南方根結線蟲雌蟲的顯微鏡放大圖，其中 bar = 500 μ m。
具體實施例方式下面結合具體實施例詳細說明本發明的技術方案。1.準備具有明顯根結症狀的病根，500ml燒杯，組織搗碎機，20目和80目的標準篩，體視解剖鏡，恆溫培養箱。2.將病根剪成2cm長放入500ml燒杯中，加自來水浸末根組織，置於30°C恆溫箱過夜，待燒杯內水混濁，將根取出移入組織搗碎機，工作30秒鐘。然後通過20目和80目的套篩，收集80目篩子上的殘留物，在解剖鏡下觀察到大量的白色雌蟲，如圖1中A(bar = 1000 μ m)圖片和 B (bar = 500 μ m)圖片。3.在體視解剖鏡下或在光線充足處用細毛筆直接挑取根結線蟲白色雌蟲。
權利要求
1.一種快速獲取大量根結線蟲雌蟲的簡易方法，其特徵在於，步驟如下 第一步利用細菌在25°c -30°C溫度下，分解腐敗植物根部的表皮和皮層組織； 第二步將分解後的腐敗植物根的表皮和皮層脫落，釋放內部的雌蟲，然後通過20目和80目的套篩，收集80目篩子上的殘留物，在15 X解剖鏡下觀察到大量的白色梨形雌蟲； 第三步在體視解剖鏡下或在光線充足處用細毛筆直接挑取根結線蟲白色雌蟲。
2.如權利要求1所述的快速獲取大量根結線蟲雌蟲的簡易方法，其特徵在於，步驟如下第一步取新鮮的、表現根結症狀的植物病根，用自來水衝去表面的泥土，剪成段狀置於相應大小的燒杯中，加入自來水，浸沒根組織，然後將燒杯置於30°C恆溫箱中直至植物病根部的表皮和皮層組織分解；第二步將處理後的病根移入組織搗碎機組織攪拌30秒鐘，使腐敗的表皮和皮層脫落，釋放內部的雌蟲，再通過20目和80目的標準篩，收集80目的殘留物到小皿中，在15X 解剖鏡下古納差觀察到大量白色的梨形的根結線蟲雌蟲；第三步在體視解剖鏡下或在光線充足處用細毛筆直接挑取根結線蟲白色雌蟲。
全文摘要
本發明公開了一種快速獲取大量根結線蟲雌蟲的簡易方法，它主要是利用細菌在25℃-30℃溫度下，分解腐敗植物根部的表皮和皮層組織；將分解後的腐敗植物根的表皮和皮層脫落，釋放內部的雌蟲，然後通過20目和80目的套篩，收集80目篩子上的殘留物；最後在體視解剖鏡下或在光線充足處用細毛筆直接挑取根結線蟲白色雌蟲。本發明方法在短時間內可獲得大量的雌性根結線蟲，操作簡單，不需要特殊儀器設備，彌補了常規技術費時費力和蟲體易破的不足。
文檔編號G01N1/28GK102175495SQ20101061561
公開日2011年9月7日 申請日期2010年12月30日 優先權日2010年12月30日
發明者吳海燕, 周勳波, 畢建傑 申請人:吳海燕