用補骨脂定防治植物真菌病害的生物農藥的製作方法

2023-10-05 02:10:04

專利名稱：：用補骨脂定防治植物真菌病害的生物農藥的製作方法
技術領域：
：本發明涉及一種植物用生物農藥，特別是涉及一種用補骨脂定防治植物真菌病害的生物農藥。技術背景據統計我國水稻種植面積2882萬公頃(2001)，小麥種植面積2199萬公頃(2003)，蘋果面積230萬公頃，蔬菜面積逐年增加。蘋果腐爛、蘋果輪紋、水稻稻瘟、水稻紋枯、黃瓜枯萎、小麥赤黴、黃瓜炭疽、辣椒疫黴是上述作物、果蔬生產中常見的植物病害，對於上述病害的防治主要採用化學農藥，比如50%多菌靈、70%甲基託布津、銀泰等。但因一些常規品種的長期使用使病原菌產生抗藥性，致使田間用藥量逐年加大，給人類的生存環境及健康帶來了不可逆轉的負面影響。因此，高效、低毒、低殘留、與環境友善同時具有自主智慧財產權新農藥品種的創製迫在眉睫。從豆科植物補骨脂中提取的天然有效成分補骨脂定(Psomlidin)對作物、果蔬生產中常見的植物病害，具有優異的防治效果，因此，補骨脂定(Psomlidin)可以開發為具有廣闊前景的植物源生物農藥，同時，可以作為先導化合物創製新藥。
發明內容本發明的目的在於提供一種用補骨脂定(Psomlidin)抑制常見植物病原菌，如蘋果腐爛病菌、蘋果輪紋病菌、水稻稻瘟病菌、水稻紋枯病菌、黃瓜枯萎病菌、小麥赤黴病菌、黃瓜炭疽病菌、辣椒疫黴病菌等。本發明的目的是通過以下技術方案實現的用補骨脂定防治植物真菌病害的生物農藥，其化合物是乾燥補骨脂種子5Kg，用70%工業乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取；取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，經反覆矽膠柱層析，用石油醚一乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補骨脂定(50mg)(石油醚乙酸乙酯=4:1部分)。所述的用補骨脂定防治植物真菌病害的生物農藥，所述的補骨脂定，無色針晶，mp290292°C;TLC檢查在紫外下為藍螢光斑點；ESIMS:m/z337.4，[M+H]+，335.3[M-H];H畫R(COCD3+CDC13):1.83(3H，s，CH3)，1.82(3H，s，CH3)，3.42(2H,d，J=7.2Hz，H-l')，5.41(1H，m，H-2')，6.92(1H，s，H-4)，6.96(1H，dd，J=1.9，8.4Hz，H-8)，7.13(1H，d，J=1.8Hz，H-IO)，7.68(1H，s，H-l)，7.82(1H，d，J=8.4Hz，H-7);補骨脂定結構式本發明的優點與效果是補骨脂定(Psomlidin)作為農用殺菌劑具有以下優勢:1.補骨脂定(Psomlidin)是天然有效成分，本身作為農用殺菌劑具有高效、低毒、低殘留、不易產生抗藥性等特點。2.藥效高。補骨脂定、福美胂、銀泰、甲基託布津、多菌靈5種原藥對蘋果腐爛病菌菌絲生長的抑制作用EC50分別為1.35、8.93、26.18、9.16、1.47mg/L，EC90分別為15.33、128.98、93.37、147.85、26.86mg/L。可見，補骨脂定的抑菌活性高於防治蘋果腐爛病菌的其它藥劑。3.殺菌譜廣。補骨脂定對蘋果腐爛病菌、蘋果輪紋病菌、水稻稻瘟病菌、水稻紋枯病菌、黃瓜枯萎病菌、小麥赤黴病菌、黃瓜炭疽病菌、辣椒疫黴病菌等多種常見植物病害均具有很好的抑制活性。具體實施方式補骨脂定(Psoralidin)可以作為農用殺菌劑用於防治蘋果腐爛病菌(Valsamali)，蘋果輪紋病菌(Physalosporapiricola)，水稻稻瘟病菌(Pyriculariaoryzae)，水稻紋枯病菌(RhizoctoniasolaniKuhn)，黃瓜枯萎病菌(Fusariumoxysporum),小麥赤黴病菌(Gibberellazeae)，黃瓜炭疽病菌(Colletotrichumorbiculare)辣椒疫黴病菌(Phytophthoracapsici)等引起的多種植物病害。實例l:用丙酮或二甲基亞碸將補骨脂定(Psomlidin)溶解配成10g/L的粗提物母液。加入適量粗提物母液於5(TC的PDA培養基中，充分混勻，配成粗提物終濃度分別為0.12mg/L、0.6mg/L、3mg/L、15mg/L、75mg/L的含藥培養基，以等體積的丙酮或二甲基亞碸加入到PDA培養基中作對照，然後倒入直徑90mm培養皿內製成平板，備用。用直徑6mm的打孔器從事先在PDA平板上28'C下培養712d的各供試病菌菌落邊緣處切取菌餅，並移植於上述含不同濃度的粗提物平板和對照平板中央，每次處理重複3次，置28"C下培養712d，測量菌落直徑。每菌落取相交垂直線方向測其直徑，以其均值減去菌餅直徑即得菌落淨生長直徑(CK)，相對抑制率(％)=(對照淨生長量一處理淨生長量)/對照淨生長量xlOO。根據病菌抑制率等有關指標，採用相應的數據分析軟體，計算出EC5。值及EQ。值限。補骨脂定對幾種常見植物病原菌菌絲生長的抑制作用tableseeoriginaldocumentpage6實例2:試驗方法同實例l，補骨脂定、福美胂、銀泰、甲基託布津、多菌靈6種原藥對蘋果腐爛病菌菌絲生長的抑制作用如下5種藥劑對蘋果腐爛病菌菌絲生長的抑制作用tableseeoriginaldocumentpage6權利要求1.用補骨脂定防治植物真菌病害的生物農藥，其特徵在於化合物是乾燥補骨脂種子5Kg，用70％工業乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取；取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，經反覆矽膠柱層析，用石油醚一乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補骨脂定(50mg)(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1部分)。2.根據權利要求l所述的用補骨脂定防治植物真菌病害的生物農藥，其特徵在於所述的補骨脂定，無色針晶，mp290292。C;TLC檢査在紫外下為藍螢光斑點；ESIMS:m/z337.4，[M+H]+，335.3[M-H];HNMR(COCD3+CDC13):1.83(3H，s，CH3)，1.82(3H，s，CH3)，3.42(2H，d，J:7.2Hz，H-l')，5.41(1H，m，H-2')，6.92(1H，s，H-4)，6.96(1H，dd，J=1.9，8.4Hz，H-8)，7.13(1H，d，J=1.8Hz，H-IO)，7.68(1H，s，H-l)，7.82(1H，d，J:8.4Hz，H-7);補骨脂定結構式全文摘要用補骨脂定防治植物真菌病害的生物農藥，本發明涉及一種植物用生物農藥，特別是涉及一種用補骨脂定防治植物真菌病害的生物農藥。化合物是乾燥補骨脂種子5Kg，用70％工業乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取；取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，經反覆矽膠柱層析，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補骨脂定(50mg)(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1部分)。抑制常見植物病原菌，如蘋果腐爛病菌、蘋果輪紋病菌、水稻稻瘟病菌、水稻紋枯病菌、黃瓜枯萎病菌、小麥赤黴病菌、黃瓜炭疽病菌、辣椒疫黴病菌等。文檔編號A01N65/00GK101213980SQ20081001001公開日2008年7月9日申請日期2008年1月2日優先權日2008年1月2日發明者關麗傑,李海燕,蔡麗麗,雙邵,紅邵申請人:瀋陽化工學院