一種製備海龍中膽甾-4-烯-3-酮的高純度單體的方法
2023-10-11 18:12:44 2
一種製備海龍中膽甾-4-烯-3-酮的高純度單體的方法
【專利摘要】本發明屬於生物純化領域，具體涉及一種提取海龍中膽甾-4-烯-3-酮以及製備其高純度單體的方法。本發明所述的提取海龍中膽甾-4-烯-3-酮的方法通過浸漬初提-皂化-層析-萃取-結晶的步驟得到高純度的膽甾-4-烯-3-酮純品，且純度高達99％以上，達到製備標準品的要求，且樣品的穩定性較好。
【專利說明】—種製備海龍中膽H -4-烯-3-酮的高純度單體的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於生物純化領域，具體涉及一種提取海龍中膽留-4-烯-3-酮以及製備其高純度單體的方法。
【背景技術】
[0002]海龍屬於脊索動物門硬骨魚綱(Osteichthyes)、海龍目(Syngnathiformes)、海龍科(Syngnathidae)，是一種非常重要的海洋動物類中藥，具有補腎壯陽、抗疲勞、抗癌、防止皮膚角質化等作用，還有提高機體免疫力，使心肌細胞收縮力增強等生理功能。
[0003]現代生物化學與藥理學的研究表明，海龍的藥效與所含的留醇類成分密切相關， 但是現有技術中對海龍中有效成分尤其是留醇的研究甚少，這一方面是由於留醇類成分雖然作為有益成分但其含量卻較少，同時留醇類成分的難提取及難分離也成為了限制對海龍進一步研究及發展的瓶頸。尤其是近年來，人們對於我國傳統的中藥文化的求根問底，使得越來越多的人開始研究傳統中藥中所含的成分及藥效，試圖取其精華去其糟柏，更多的發揮其藥效而摒棄其中的不必要的副作用，將中醫中藥進一步發揚光大。
[0004]海龍中的諸多有益甾醇類成分中，已知的膽甾-4-烯-3-酮(結構式見下圖)是系列固醇類激素藥物的前體，其本身也可以直接作為藥物，此外還有研究表明膽甾-4-烯-3-酮具有補腎壯陽、防止皮膚角質化、抗肥胖以及抑制血脂積聚的功能，並具有治療肝病的效果，所以海龍提取物中分離膽-4-烯-3-酮具有研究價值，對於推進海龍有效成分的標準化以及研究海龍的藥用基礎具有積極的意義。
[0005]
【權利要求】
1.一種製備海龍中膽留-4-烯-3-酮的高純度單體的方法，其特徵在於，包括以下步驟:(1)取海龍乾粉使用乙醇浸潰提取，並濃縮至浸膏，得到浸膏初體；(2)將所述浸膏初體分散至水中稀釋，然後用正己烷進行抽提，並收集提取液濃縮得到浸膏；(3)向所述浸膏中加入KOH-乙醇溶液，水浴進行皂化反應，得到皂化物；(4)向所述皂化物中加入正丁醇萃取，萃取液脫水乾燥後得到非皂化物；(5)將所述非皂化物經200目正向矽膠柱層析，以氯仿、甲醇和水構成的體系為展開體系進行層析處理，得到濃縮產物；(6)將所述濃縮產物溶於丙酮，離心取上清後，加入石油醚結晶，即得總甾醇；(7)將得到的總留醇以乙腈溶解後，通過製備型高效液相色譜收集8.47min時的產品， 即得。
2.根據權利要求1所述的製備海龍中膽留-4-烯-3-酮的高純度單體的方法，其特徵在於:所述步驟(5)中，所述展開 體系中，氯仿:甲醇:水的體積比例為5: 3:1。
3.根據權利要求1或2所述的製備海龍中膽留-4-烯-3-酮的高純度單體的方法，其特徵在於:所述步驟(2)中，所述乙醇的濃度為95%。
4.根據權利要求1或2或3所述的製備海龍中膽留-4-烯-3-酮的高純度單體的方法，其特徵在於:所述步驟(7)中，所述製備型高效液相色譜的條件為:使用Hewlett-Packard C8色譜柱，流動相為乙腈-水，以乙酸調PH2.7，流速為lmL/min，檢測波長為240nm，進樣量為 IOiiL,柱溫為 40。。。
5.根據權利要求4所述的製備海龍中膽留-4-烯-3-酮的高純度單體的方法，其特徵在於:所述流動相中，乙腈與水的體積比為99: I。
6.根據權利要求5所述的製備海龍中膽留-4-烯-3-酮的高純度單體的方法，其特徵在於:所述步驟(3)中，所述水浴的溫度為65°C。
7.根據權利要求6所述的製備海龍中膽留-4-烯-3-酮的高純度單體的方法，其特徵在於:所述步驟(3)中，所述KOH-乙醇溶液的濃度為10.5%。
8.根據權利要求7所述的製備海龍中膽留-4-烯-3-酮的高純度單體的方法，其特徵在於:所述步驟(4)中，所述乾燥步驟以無水Na2SO4為乾燥劑。
9.根據權利要求8所述的製備海龍中膽留-4-烯-3-酮的高純度單體的方法，其特徵在於:所述步驟(I)中，所述海龍乾粉的粒徑為200目以下。
10.一種根據權利要求1-9任一所述的方法製備得到的海龍中膽留-4-烯-3-酮的高純度 單體。
【文檔編號】C07J9/00GK103450307SQ201210568538
【公開日】2013年12月18日 申請日期:2012年12月8日 優先權日:2011年12月9日
【發明者】叢柏林, 沈繼紅, 靳永軒, 黃曉航, 劉勝浩 申請人:國家海洋局第一海洋研究所