含白朮多糖、蒼朮硬脂的組合物、製備方法及其用途與流程
2023-09-23 00:12:55 2
本發明涉及藥物技術領域，具體涉及一種含白朮多糖、蒼朮硬脂的藥物組合物、製備方法及其用途。
背景技術：
白朮，以根莖入藥，具有多項藥用功能。主要功效為：健脾益氣，燥溼利水，止汗，安胎。一般用於脾虛食少，腹脹洩瀉，痰飲眩悸，水腫，自汗，胎動不安。土白朮健脾，和胃，安胎。
蒼朮主要作用為健脾，燥溼，解鬱，闢穢。主要用來治療溼盛困脾，倦怠嗜臥，脘痞腹脹，食欲不振，嘔吐，洩瀉，痢疾，瘧疾，痰飲，水腫，時氣感冒，風寒溼痺，足痿，夜盲。
消化性潰瘍主要指發生於胃和十二指腸的慢性潰瘍，是一多發病、常見病。潰瘍的形成有各種因素，其中酸性胃液對黏膜的消化作用是潰瘍形成的基本因素。目前，比較常用的治療方法是服用雷尼替丁，抑制組胺、五肽胃泌素和氨甲醯膽鹼刺激後引起的胃酸分泌，降低胃酸和胃酶活性，達到治療潰瘍的目的。目前也有人將蒼朮硬脂作為治療消化性潰瘍的組分使用。
但是，目前為止，現有技術中並沒有將白朮多糖與蒼朮硬脂混合製備得到藥物組合物的報導，也沒有該組合物可以產生協同抗消化性潰瘍作用的報導。
技術實現要素：
針對現有技術中的缺陷，本發明提供含白朮多糖、蒼朮硬脂的組合物、製備方法及其用途，以提高對消化性潰瘍的治療效果。
第一方面，本發明提供的白朮多糖、蒼朮硬脂的組合物，包括
白朮多糖提取物，所述白朮多糖提取物是從菊科植物白朮atractylodesmacrocephalakoidz的乾燥根莖中提取獲得的總多糖，且所述白朮多糖提取物中糖類成分含量不低於提取物總量的70％，多糖重均分子量不低於10kd；
和蒼朮硬脂提取物，所述蒼朮硬脂提取物是從蒼朮atractylodeslancea乾燥根莖中提取獲得的總揮髮油，其中蒼朮醇和桉葉油醇的含量之和不低於提取物總量的50wt％。
本發明中，作為一種優選的技術方案，所述組合物中，白朮多糖提取物與蒼朮硬脂提取物的重量比為5:1-5:4。
本發明中，作為一種優選的技術方案，所述組合物中，還包括生理學上可接受的賦形劑。
發明人在研究中發現，不同種類的黃芪，即便採用相同的方法提取，其白朮多糖提取物中的組分也不盡相同，經過大量的篩選，最終確定從菊科植物白朮atractylodesmacrocephalakoidz的乾燥根莖中提取獲得的總多糖，提取的物質經過硫酸苯酚法檢測、高效凝膠色譜(hpgpc)法檢測，能夠滿足提取物中糖類成分含量不低於提取物總量的70wt％，多糖重均分子量不低於10kd，這也是使得白朮多糖提取物與蒼朮硬脂提取物產生最佳協同作用的關鍵因素。
另外，經過大量反覆的試驗，發明確定了白朮多糖提取物採用如下製備方法得到：
取從菊科植物白朮atractylodesmacrocephalakoidz的乾燥根莖1000g，95％(v/v)乙醇浸泡脫脂，離心去乙醇，90℃下12l水提取兩遍，合併水提取液，減壓濃縮至提取液總體積8l，加24l95％(v/v)乙醇，4℃下靜置過夜，離心得沉澱；
以3l純水溶解所得沉澱，離心去不溶物，上清液以2nhc1調ph至2.8,4℃下靜置約4小時，離心去沉澱，用2nnaoh調ph至9,加90ml30％h202,60℃下攪拌脫色l小時後，加9l95％(v/v)乙醇，4℃下靜置12小時，離心得沉澱，所得沉澱以2l90％乙醇洗滌兩遍，室溫下減壓乾燥得到白朮總多糖；
取白朮總多糖溶解於純水中，3kd超濾膜(millipore超濾裝置)超濾，截留溶液冷凍乾燥得白朮多糖提取物。
以上方法製備得到的白朮多糖提取物能夠滿足本發明的要求。
本發明中，作為一種優選的技術方案，所述蒼朮硬脂提取物採用水蒸氣蒸餾提取法、有機溶劑提取法和c02超臨界提取法之一提取。
其中，水蒸氣蒸餾提取法的步驟為：將1kg茅蒼朮乾燥根莖顆粒置入揮髮油提取器的磨口瓶中，按中國藥典附錄方法連續蒸餾5小時，然後停止加熱，冷卻後放水，收集蒸餾液表面的油狀物即為蒼朮硬脂提取物。
有機溶劑提取法的步驟為：將1kg茅蒼朮乾燥根莖顆粒置入燒瓶中，以正己烷作為溶劑，回流提取8h，減壓蒸餾除去溶劑，得到蒼朮硬脂提取物。
c02超臨界提取法的步驟為：將1kg茅蒼朮乾燥根莖顆粒放入超臨界流體萃取器中，流量35kg/h，溫度50℃、壓力20mpa下靜態萃取l小時、動態萃取3小時。在分離壓力lompa，溫度40℃下，析出揮髮油。
第二方面，本發明提供的白朮多糖、蒼朮硬脂的組合物，其製備方法包括：
s1、在60℃下熔融的蒼朮硬脂提取物，在攪拌下加入白朮多糖提取物，並在0℃下放置12小時，得到固形物；
s2、將所得固形物粉碎成80目，加處方量的賦形劑，得到均勻的混合物料；
s3、將混合物料製備成片劑或膠囊劑。
白朮多糖、蒼朮硬脂的組合物製備方法，其片劑的詳細製備步驟為：
s1、在60℃下熔融的蒼朮硬脂提取物，在攪拌下加入白朮多糖提取物，並在0℃下放置12小時，得到固形物；
s2、將所得固形物粉碎成80目，加處方量的微晶纖維素混合制粒，所得顆粒加處方量硬脂酸鎂混合，得到均勻的混合物料；
s3、將混合物料壓製成片劑。
白朮多糖、蒼朮硬脂的組合物製備方法，其膠囊劑製備的詳細步驟為：
s1、在60℃下熔融的蒼朮硬脂提取物，在攪拌下加入白朮多糖提取物，並在0℃下放置12小時，得到固形物；
s2、將所得固形物粉碎成80目，加處方量乳糖、糊精混合均勻，加入預先配好的hpmc溶液得到均勻的混合物料；
s3、將混合物料利用20目篩制粒，60℃乾燥約30分鐘，18目篩整粒，裝2#膠囊製備得到膠囊劑。
第三方面，本發明提供的白朮多糖、蒼朮硬脂的組合物在製備預防和/或治療消化性潰瘍藥物或功能性食品的應用。
本發明研究證明，本發明所述之含白朮多糖和蒼朮硬脂組合物在幽門結紮所致的胃潰瘍模型中具有預防和/或治療潰瘍的作用，且其作用呈現明顯的協同作用效應，因此本發明的進一步提供本發明所述藥物組合物在製備預防和/或治療胃潰瘍藥物中的用途。
由上述技術方案可知，本發明提供的白朮多糖、蒼朮硬脂的組合物，兩種組分具有良好的協同作用，能夠對消化性潰瘍起到較好的療效，並且效果要比單一的白朮多糖、蒼朮硬脂使用時有所提高。
同時，本發明研究了白朮多糖、蒼朮硬脂的協同效果，對白朮多糖、蒼朮硬脂的製備方法進行大量反覆的試驗，最終選擇了精準製備方法，利用該方法製備的白朮多糖，其中能夠與蒼朮硬脂相互協同的成分被充分的提取，提高了兩者的協同效果。
具體實施方式
下面將結合具體實施例對本發明技術方案進行詳細的描述。以下實施例僅用於更加清楚地說明本發明的技術方案，因此只作為示例，而不能以此來限制本發明的保護範圍。
白朮多糖提取物的製備，如實施例1和實施例2。
實施例1
取從菊科植物白朮atractylodesmacrocephalakoidz的乾燥根莖1000g，95％(v/v)乙醇浸泡脫脂，離心去乙醇，90℃下12l水提取兩遍，合併水提取液，減壓濃縮至提取液總體積8l，加24l95％(v/v)乙醇，4℃下靜置過夜，離心得沉澱；
以3l純水溶解所得沉澱，離心去不溶物，上清液以2nhc1調ph至2.8,4℃下靜置約4小時，離心去沉澱，用2nnaoh調ph至9,加90ml30％h202,60℃下攪拌脫色l小時後，加9l95％(v/v)乙醇，4℃下靜置12小時，離心得沉澱，所得沉澱以2l90％乙醇洗滌兩遍，室溫下減壓乾燥得到白朮總多糖；
取白朮總多糖溶解於純水中，3kd超濾膜(millipore超濾裝置)超濾，截留溶液冷凍乾燥得白朮多糖提取物。
硫酸苯酚法檢測所述白朮多糖提取物中的糖類成分含量為75.6％。
以標準葡聚糖為標準，高效凝膠色譜(hpgpc)法檢測所述白朮多糖，可見其為多組分的混合多糖，而多糖組分的重均分子量均大於10kd。
蒼朮硬脂提取物的製備方法如實施例2-4。
實施例2
水蒸氣蒸餾法製備蒼朮硬脂提取物
將1kg茅蒼朮乾燥根莖顆粒置入揮髮油提取器的磨口瓶中，按中國藥典附錄方法連續蒸餾5小時，然後停止加熱，冷卻後放水，收集蒸餾液表面的油狀物即為蒼朮硬脂提取物。
實施例3
有機溶劑提取法製備蒼朮硬脂提取物
將1kg茅蒼朮乾燥根莖顆粒置入燒瓶中，以正己烷作為溶劑，回流提取8h，減壓蒸餾除去溶劑，得到蒼朮硬脂提取物。
實施例4
c02超臨界提取法製備蒼朮硬脂提取物
將1kg茅蒼朮乾燥根莖顆粒放入超臨界流體萃取器中，流量35kg/h，溫度50℃、壓力20mpa下靜態萃取l小時、動態萃取3小時。在分離壓力lompa，溫度40℃下，析出揮髮油。
對實施例2-4製備的蒼朮硬脂提取物進行檢測，如下：
氣相色譜法分析法(gc)檢測三種提取法所得蒼朮硬脂中蒼朮醇和β-桉葉油醇的含量，所述檢測的色譜條件為，hp-5ms色譜柱，石英毛細管柱(30mx250μmx0.25μm)；氣化室溫度280℃；質譜(ms)檢測器，離子源溫度230℃；四極杆溫度200℃；柱溫(程序升溫)：60℃(3min)，10℃/min升溫至150℃，3℃/min升溫至220℃，25℃/min升溫至280℃(10min)；分流比10:1；載氣he，流量1.0ml/min。
結果：實施例2水蒸氣蒸餾法獲得蒼朮硬脂提取物約32.5g，所得產物在低溫下(20℃或以下)呈淺黃色固狀物。氣相色譜法檢測，其蒼朮醇和β-桉葉油醇的含量之和為約83.6％(其中含蒼朮醇約48.8％，含β-桉葉油醇約34.8％)。
實施例3有機溶劑烷提取法獲得蒼朮硬脂提取物約25.lg，所得產物為粘稠的黃色油狀物。氣相色譜-質譜法(gc-ms)檢測，其蒼朮醇和β-桉葉油醇的含量之和為約54.2％。
實施例4co2超臨界萃取法獲得蒼朮硬脂約41.6g，所得產物在低溫下(20℃或以下)呈淺黃色固狀物。氣相色譜-質譜法(gc-ms)檢測，其蒼朮醇和桉葉油醇的含量之和為約69.2％。
實施例5
白朮多糖、蒼朮硬脂組合物對幽門結紮型實驗動物胃潰瘍模型的治療作用。
試驗樣品：
組合物a，白朮多糖提取物(實施例1製備)、蒼朮硬脂(實施例2製備)以重量比為5：2組成混合物；
組合物b，白朮多糖提取物(實施例1製備)、蒼朮硬脂(實施例3製備)以重量比為5：1組成混合物；
組合物c，白朮多糖提取物(實施例1製備)、蒼朮硬脂(實施例4製備)以重量比為5：4組成混合物。
試驗方法：體重180～220gsd大鼠56隻，隨機分為7組(每組8隻)，即模型對照組，白朮多糖提取物給藥組(簡稱白朮多糖)，蒼朮硬脂提取物給藥組(簡稱蒼朮硬脂)，白朮多糖、蒼朮硬脂組合物給藥組(分別設組合物a-200mg/kg、組合物b-200mg/kg、組合物c-200mg/kg給藥組)，陽性對照組(雷尼替丁-50mg/kg)。
試驗前48小時大鼠禁食不禁水。試驗時，大鼠麻醉固定後，無菌操作結紮幽門。術後各試驗組動物分別灌胃相應的受試藥物，陽性對照組灌胃雷尼替丁，模型組按同法給予等量的溶劑，並停止供水供食。
18小時後處死大鼠，打開腹腔，近膈處結紮食道，取胃於1％甲醛溶液固定10分鐘。沿胃大彎切開胃壁，洗淨內容物，展開胃壁並用大頭針固定在蠟板上，觀察胃黏膜面，按常規方法記錄每組潰瘍面積以及潰瘍指數。
試驗結果：實驗結果見表1。
結果表明，與模型組比較，各給藥組發生潰瘍的鼠數有所減少、潰瘍程度顯著減輕，潰瘍面積縮小，潰瘍指數降低。
組合物a、b、c的抗潰瘍結果顯示，白朮多糖、蒼朮硬脂組合物的藥效學作用顯然優於相應的白朮多糖提取物、蒼朮硬脂提取物單獨給藥的藥效，說明兩種組分的藥效具有協同增效的藥效學效應。水蒸氣蒸餾、超臨界萃取以及有機溶劑提取所得蒼朮硬脂均有抗胃潰瘍作用。
表1.大鼠幽門結紮型胃潰瘍動物模型試驗結果
實施例6
白朮多糖、蒼朮硬脂組合物的固體片劑製備
製備方法如下：
s1、在60℃下熔融的蒼朮硬脂提取物，在攪拌下加入白朮多糖提取物，並在0℃下放置12小時，得到固形物；
s2、將所得固形物粉碎成80目，加處方量的微晶纖維素混合制粒，所得顆粒加處方量硬脂酸鎂混合，得到均勻的混合物料；
s3、將混合物料壓製成片劑(1000片)。
實施例7
白朮多糖、蒼朮硬脂組合物的硬膠囊製備
製備方法如下：
s1、在60℃下熔融的蒼朮硬脂提取物，在攪拌下加入白朮多糖提取物，並在0℃下放置12小時，得到固形物；
s2、將所得固形物粉碎成80目，加處方量乳糖、糊精混合均勻，加入預先配好的hpmc溶液得到均勻的混合物料；
s3、將混合物料利用20目篩制粒，60℃乾燥約30分鐘，18目篩整粒，裝2#膠囊製備得到膠囊劑(1000粒)。
實施例7、實施例8製備的片劑和膠囊劑也可以作為功能性食品服用。
最後應說明的是：以上各實施例僅用以說明本發明的技術方案，而非對其限制；儘管參照前述各實施例對本發明進行了詳細的說明，本領域的普通技術人員應當理解：其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分或者全部技術特徵進行等同替換；而這些修改或者替換，並不使相應技術方案的本質脫離本發明各實施例技術方案的範圍，其均應涵蓋在本發明的權利要求和說明書的範圍當中。