檢測動物骨提取物活性的方法
2023-12-01 08:54:01 2
專利名稱：檢測動物骨提取物活性的方法
技術領域：
本發明涉及一種檢測動物骨提取物活性的方法。
背景技術：
目前我國藥品標準中收載有多種骨提取物類製劑的藥物，如骨肽注射液、復 方骨肽注射液、鹿瓜多肽注射液等，但這些藥品標準(見化學藥品地標升國標16冊 WS1-XG-035-2000第100頁，化學藥品地標升國標16冊WS1-XG-007-2002第252頁，化學藥 品地標升國標16冊WS1-XG-002-2002第237頁)均未建立活性檢測方法，無法對藥物質量 進行評價，因此，建立一種檢測骨提取物製劑活性的方法，對於保證此類藥物的質量至關重 要。
發明內容
本發明的目的是提供一種專屬性好、準確度高的檢測動物骨提取物活性的方法。
上述的目的通過以下的技術方案實現 檢測動物骨提取物活性的方法，將試驗動物分組，測量各組動物一側足爪容積，然 後對試驗組動物注射給予骨提取物，對照組動物注射給予等量等滲溶液，再以致炎藥物致 炎動物該側足爪，之後測量致炎後不同時間足爪容積，用統計學的方法比較骨提取物組與 對照組差異，判定骨提取物的活性。 所述的檢測動物骨提取物活性的方法，所述的動物骨提取物為豬骨、牛骨、鹿骨或 其他哺乳動物骨骼的提取物。 所述的檢測動物骨提取物活性的方法，所述的致炎藥物為0.5_1%角叉菜膠或 10-100%蛋清或0. 1-0. 2%弗氏完全佐劑或0. 5-2 %右旋糖酐，陰性對照組所用藥物可以 是0. 85-0. 9%氯化鈉溶液或5%甘露醇溶液或5%葡萄糖溶液。 所述的檢測動物骨提取物活性的方法，所述的致炎藥物的用藥方法為足蹠皮下注 射給藥，所述的試驗藥物用藥方法為致炎前腹腔注射或靜脈給藥。 所述的檢測動物骨提取物活性的方法，所述的測量動物足爪容積採用容積測定裝 置測容積或採用皮尺或卡尺測周長或厚度，試驗動物需要測定致炎後1-6小時足爪容積。
所述的檢測動物骨提取物活性的方法，根據致炎前以及致炎後動物足爪容積，計 算每組每隻動物致炎後1-6小時足爪腫脹率，根據各組腫脹率均值計算試驗組1-6小時抑 制率，並作t檢驗，經統計學處理具有顯著性差異，以判定該提取物具有活性，計算腫脹率 和抑制率，腫脹率=(致炎後足爪容積-致炎前足爪容積)/致炎前足爪容積X100X，抑 制率=(試驗組腫脹率_陰性組腫脹率)/陰性組腫脹率X 100%，將抑制率數據進行t檢 驗，根據是否有顯著性差異來判定動物骨提取物的活性。
這個技術方案有以下有益效果 1.本發明的試驗步驟嚴謹，試驗方案靈活，具有很強的可操作性，經過實踐檢驗， 本發明較易有的方式相比，具有簡便的測試過程並且有準確的測試結果。
2.本發明中測定致炎後1-6小時足爪容積，可以充分保證獲得足夠有效的數據。
3.本發明提高了動物骨提取物類製劑的標準，為檢測這類製劑的活性提供了一種 可靠的方法。 本發明的
具體實施例方式 實施例1 : 檢測動物骨提取物活性的方法，將試驗動物分組，測量各組動物一側足爪容積，然 後對試驗組動物注射給予骨提取物，對照組動物注射給予等量等滲溶液，再以致炎藥物致 炎動物該側足爪，之後測量致炎後不同時間足爪容積，用統計學的方法比較骨提取物組與 對照組差異，判定骨提取物的活性。 所述的檢測動物骨提取物活性的方法，所述的動物骨提取物為豬骨、牛骨、鹿骨或 其他哺乳動物骨骼的提取物。 所述的檢測動物骨提取物活性的方法，所述的致炎藥物為0.5_1%角叉菜膠或 10-100%蛋清或0. 1-0. 2%弗氏完全佐劑或0. 5-2 %右旋糖酐，陰性對照組所用藥物可以 是0. 85-0. 9%氯化鈉溶液或5%甘露醇溶液或5%葡萄糖溶液。 所述的檢測動物骨提取物活性的方法，所述的致炎藥物的用藥方法為足蹠皮下注 射給藥，所述的試驗藥物用藥方法為致炎前腹腔注射或靜脈給藥。 所述的檢測動物骨提取物活性的方法，所述的測量動物足爪容積採用容積測定裝 置測容積或採用皮尺或卡尺測周長或厚度，試驗動物需要測定致炎後1-6小時足爪容積。
所述的檢測動物骨提取物活性的方法，根據致炎前以及致炎後動物足爪容積，計 算每組每隻動物致炎後1-6小時足爪腫脹率，根據各組腫脹率均值計算試驗組1-6小時抑 制率，並作t檢驗，經統計學處理具有顯著性差異，以判定該提取物具有活性，計算腫脹率 和抑制率，腫脹率=(致炎後足爪容積-致炎前足爪容積)/致炎前足爪容積X100X，抑
制率=(試驗組腫脹率-陰性組腫脹率)/陰性組腫脹率X100X，將抑制率數據進行t檢
驗，根據是否有顯著性差異來判定動物骨提取物的活性。
實施例2 : 本次試驗對照藥為0. 9%氯化鈉注射液，供試品為注射用鹿瓜多肽(8mg)080801、 080802、080803，取已編號的大鼠稱重，隨機分為4組，對照組、試驗藥物1 、 2、 3組，每組各8 只，體重為140士20g。取各組大鼠分別在其右後肢關節處劃線，用足趾容積測定裝置測量並 記錄各大鼠的右後足蹠容積。對照組大鼠每隻腹腔注射2ml0. 9%氯化鈉注射液，供試組大 鼠每隻注射2ml供試品溶液(每支注射用鹿瓜多肽用lml 0. 9%氯化鈉注射液溶解)。分 別於各組大鼠注射給藥1小時後無菌操作給大鼠右後足蹠皮下注射10%蛋清0. 05ml進行 致炎。分別於致炎後l-6小時測量並記錄各組大鼠右後足趾容積。根據測定結果，計算腫 脹率，腫脹率=(致炎後足爪容積_致炎前足爪容積)/致炎前足爪容積* 100%，計算各組 每小時腫脹率均值，計算抑制率，抑制率=(陰性組腫脹率均值-試驗組腫脹率均值)/陰 性組腫脹率均值* 100X，分別進行各試驗組與陰性對照組t檢驗，比較各組間的差異性。 結果試驗組致炎後1-6小時，T值均大於2. 145，則P值均小於0. 05，與陰性對照組比較均 有顯著性差異，說明試驗藥物有抗骨關節炎的活性。
實施例3 : 本次試驗選取體重在20 ± 2g的小鼠30隻，隨機分成對照組，試驗組2組，每組10隻，取各組小鼠分別用千分尺測量右後足爪厚度，給對照組小鼠腹腔注射5%葡萄糖溶液 0. lml，試驗組小鼠腹腔注射0. 5ml骨肽注射液071101 、070302。然後在注射給藥0. 5小時 後無菌操作給小鼠右後足皮下注射1%角叉菜膠0. 02ml進行致炎。於致炎後1-6小時測量 並記錄各組小鼠右後足爪厚度，統計各組試驗結果，根據實施例1中公式計算小鼠足爪腫 脹率和抑制率，進行對照組與試驗組t檢驗，比較組間差異顯著性。結果試驗藥物組致炎 後2、3、5小時與陰性對照組比較有顯著性差異，說明試驗藥物有抗骨關節炎的活性，此方 法可以用來判定動物骨提取物的活性。
權利要求
一種檢測動物骨提取物活性的方法，其特徵是將試驗動物分組，測量各組動物一側足爪容積，然後對試驗組動物注射給予骨提取物，對照組動物注射給予等量等滲溶液，再以致炎藥物致炎動物該側足爪，之後測量致炎後不同時間足爪容積，用統計學的方法比較骨提取物組與對照組差異，判定骨提取物的活性。
2. 根據權利要求1所述的檢測動物骨提取物活性的方法，其特徵是所述的動物骨提 取物為豬骨、牛骨、鹿骨或其他哺乳動物骨骼的提取物。
3. 根據權利要求1或2所述的檢測動物骨提取物活性的方法，其特徵是所述的致炎藥物為O. 5-1%角叉菜膠或10-100%蛋清或0. 1-0. 2%弗氏完全佐劑或0. 5-2%右旋糖酐， 陰性對照組所用藥物為0. 85-0. 9%氯化鈉溶液或5%甘露醇溶液或5%葡萄糖溶液。
4. 根據權利要求1或2所述的檢測動物骨提取物活性的方法，其特徵是所述的致炎 藥物的用藥方法為足蹠皮下注射給藥，所述的試驗藥物用藥方法為致炎前腹腔注射或靜脈 給藥。
5. 根據權利要求3所述的檢測動物骨提取物活性的方法，其特徵是所述的致炎藥物 的用藥方法為足蹠皮下注射給藥，所述的試驗藥物用藥方法為致炎前腹腔注射或靜脈給 藥。
6. 根據權利要求1或2或5所述的檢測動物骨提取物活性的方法，其特徵是所述的 測量動物足爪容積採用容積測定裝置測容積或採用皮尺或卡尺測周長或厚度，試驗動物需 要測定致炎後1-6小時足爪容積。
7. 根據權利要求3所述的檢測動物骨提取物活性的方法，其特徵是所述的測量動物 足爪容積採用容積測定裝置測容積或採用皮尺或卡尺測周長或厚度，試驗動物需要測定致 炎後l-6小時足爪容積。
8. 根據權利要求4所述的檢測動物骨提取物活性的方法，其特徵是所述的測量動物 足爪容積採用容積測定裝置測容積或採用皮尺或卡尺測周長或厚度，試驗動物需要測定致 炎後l-6小時足爪容積。
9. 根據權利要求1或2或5或7或8或所述的檢測動物骨提取物活性的方法，其特徵 是根據致炎前以及致炎後動物足爪容積，計算每組每隻動物致炎後1-6小時足爪腫脹率， 根據各組腫脹率均值計算試驗組1-6小時抑制率，並作t檢驗，經統計學處理具有顯著性差 異，以判定該提取物具有活性，計算腫脹率和抑制率，腫脹率=(致炎後足爪容積-致炎前 足爪容積)/致炎前足爪容積乂100%，抑制率=(試驗組腫脹率-陰性組腫脹率)/陰性組 腫脹率X 100%，將抑制率數據進行t檢驗，根據是否有顯著性差異來判定動物骨提取物的 活性。
10. 根據權利要求3或所述的檢測動物骨提取物活性的方法，其特徵是根據致炎前 以及致炎後動物足爪容積，計算每組每隻動物致炎後1-6小時足爪腫脹率，根據各組腫脹 率均值計算試驗組1-6小時抑制率，並作t檢驗，經統計學處理具有顯著性差異，以判定 該提取物具有活性，計算腫脹率和抑制率，腫脹率=(致炎後足爪容積_致炎前足爪容 積)/致炎前足爪容積乂100%，抑制率=(試驗組腫脹率-陰性組腫脹率)/陰性組腫脹 率X100X，將抑制率數據進行t檢驗，根據是否有顯著性差異來判定動物骨提取物的活 性。
全文摘要
檢測動物骨提取物活性的方法，目前我國藥品標準中收載有多種骨提取物類製劑的藥物，如骨肽注射液、複方骨肽注射液、鹿瓜多肽注射液等，但這些藥品標準均未建立活性檢測方法，無法對藥物質量進行評價，因此，建立一種檢測骨提取物製劑活性的方法，對於保證此類藥物的質量至關重要。將試驗動物分組，測量各組動物一側足爪容積，然後對試驗組動物注射給予骨提取物，對照組動物注射給予等量等滲溶液，再以致炎藥物致炎動物該側足爪，之後測量致炎後不同時間足爪容積，用統計學的方法比較骨提取物組與對照組差異，判定骨提取物的活性。本發明應用於多種骨提取物類製劑的藥物活性檢測。
文檔編號A61B5/107GK101766825SQ200810209828
公開日2010年7月7日 申請日期2008年12月30日 優先權日2008年12月30日
發明者江衛世 申請人:江衛世