製備高純度賽門苷Ⅰ的方法
2023-12-05 22:38:56 1
專利名稱：製備高純度賽門苷Ⅰ的方法
技術領域：
本發明涉及的是一種生物醫藥技術領域的方法，具體是一種製備高純度賽門苷I的方法。
背景技術：
羅漢果SiraitiaeFructus為我國特產藥材，具有清熱潤肺、利咽開音、潤腸通便之功效，常用於肺熱燥咳、咽痛失音、腸燥便秘的治療。羅漢果主要含有羅漢果甜苷等化學成分，羅漢果甜苷為一系列葫蘆烷型三萜皂苷，常作為天然甜味劑在藥品、食品、飲料中廣泛應用。現代研究發現，羅漢果甜苷中賽門苷I，即siamenoside I
權利要求
1.一種製備高純度賽門苷I的方法，其特徵在於，通過將羅漢果水煮後的上清液通過大孔樹脂吸附後經減壓洗脫得到浸膏，將浸膏溶解，取上清液上ODS柱，洗去雜質後得到賽門苷I粗品，再將粗品進行Si^phadex LH-20柱層析，經乙醇梯度洗脫後進行HPLC檢測並合併含賽門苷I的流份，最後回收溶劑即得賽門苷I精製品。
2.根據權利要求I所述的方法，其特徵是，所述方法具體步驟包括 1)將羅漢果粉碎成粗粉加水煎煮後離心處理並收集上清液； 2)將步驟I)得到的上清液通過大孔樹脂吸附後，用40%(v/v)酒精洗去雜質，然後用60-80% (v/v)酒精洗脫，最後從洗脫液中回收乙醇並得到浸膏； 3)將浸膏用60%(v/v)酒精溶解、離心，取上清液上ODS柱，先用60% (v/v)酒精洗去雜質，然後採用70-90% (v/v)酒精洗脫；最後從洗脫液中回收乙醇並進行HPLC檢測，合併含賽門苷I的流份得到賽門苷I粗品； 4)將賽門苷I粗品進行Si^phadexLH-20柱層析，經乙醇梯度洗脫後進行HPLC檢測並合併含賽門苷I的流份，最後回收溶劑即得賽門苷I精製品。
3.根據權利要求2所述的方法，其特徵是，所述的加水煎煮中，水的用量為粗粉重量的6-12倍；煎煮時間為O. 5-lh。
4.根據權利要求I或2或3所述的方法，其特徵是，所述的上清液為將第一次收集後的殘餘物重複上述加水煎煮和離心處理後合併兩次處理的上清液。
5.根據權利要求2所述的方法，其特徵是，所述的酒精洗脫的流速為8-10mL/min。
6.根據權利要求2所述的方法，其特徵是，所述的乙醇梯度洗脫是指依次用70%、80%、90% (v/v)酒精(各300mL)梯度洗脫(流速3mL/min),每份30mL進行洗脫。
7.根據權利要求2所述的方法，其特徵是，步驟2)和步驟3)中，洗脫液的用量均為大孔樹脂的柱體積、ODS柱的I. 5-2. 5倍。
8.根據權利要求2所述的方法，其特徵是，步驟3)和步驟4)中的HPLC檢測是指以ODS柱為色譜柱，設置檢測波長為205nm，流動相為乙腈-水25 75 (v/v)，流速為LOmL/min0
全文摘要
一種生物醫藥技術領域的製備高純度賽門苷Ⅰ的方法，通過將羅漢果水煮後的上清液通過大孔樹脂吸附後經減壓洗脫得到浸膏，將浸膏溶解，取上清液上ODS柱，洗去雜質後得到賽門苷Ⅰ粗品，再將粗品進行Sephadex LH-20柱層析，經乙醇梯度洗脫後進行HPLC檢測並合併含賽門苷Ⅰ的流份，最後回收溶劑即得賽門苷Ⅰ精製品。本發明通過水提法，採用三種不同分離機制的柱層析進行分離，整個過程只使用乙醇、水，不使用有毒溶劑；具有純度高、得率高、工藝簡單、成本低等優點。
文檔編號C07J17/00GK102942611SQ20121052635
公開日2013年2月27日 申請日期2012年12月7日 優先權日2012年12月7日
發明者李曉波, 王夢月, 邢世華, 黃文武, 沈瀟男 申請人:上海交通大學