治療眼病的藥用組合物的製作方法

2024-01-26 13:53:15

專利名稱：治療眼病的藥用組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及治療眼病的藥用組合物，其用於治療伴隨有眼壓增加和/或視神經病變的眼病，如青光眼和眼內壓過高。
青光眼和眼內壓過高為在所有哺乳動物(例如，靈長目動物)中都有可能發生的眼病，並且還是難治的眼病，其特徵為因眼內壓力增加(眼壓增加)或眼房水和眼內血液循環的自體調節機能障礙所致的視神經病。青光眼的症狀包括眼痛、頭痛、虹彩症狀、角膜混濁性視力障礙、視敏度降低、眼充血、噁心、嘔吐、心搏徐緩、出汗和視野異常。有時候，青光眼直到其晚期才產生症狀。
眼壓增加是因眼房水從眼睫毛上皮分泌到後房的分泌速率與眼房水主要通過鞏膜靜脈竇從前房排除的排除速率之間失衡造成的。許多情況下，這種失衡被認為是由於在眼角部分不循環的眼房水的流阻增加造成的。
照慣例，青光眼已被認為是由於因眼壓增加的機械視神經病引起的。但是，按照最近令人信服的理論，青光眼被認為是眼房水在睫狀體中的分泌、眼房水從眼角小梁到鞏膜靜脈竇的排除或者因視神經乳頭處血液循環的自身調節機能障礙的神經血管紊亂引起的。因此，儘管眼壓增加是其主要的機能障礙因子，但是與在視神經乳頭處視神經乳頭脆化或血原性紊亂有關的所有因子都被認為是危險因素。
最近，正常眼壓青光眼已廣為所知，並且眼壓並不是診斷青光眼的絕對因素。然而，無論眼壓高還是正常，為青光眼的主要危險因素的眼壓的控制對青光眼的治療是最重要的。
青光眼為一值得注意的疾病，並且在經歷人口老化的發達國家中患青光眼的病人的數量逐年增加。在這些社會中，對青光眼藥物的需求在未來將會增加。
目前，已知β-阻滯劑、前列腺素衍生物和碳酸鹽脫氫酶抑制劑為青光眼藥物。已知這些藥物通過控制眼房水的分泌或排除具有降低眼壓的效果。
最近，已報導了一種為腺苷A2受體激動劑的腺苷衍生物CGS-21680[2-((4-(2-羧乙基)苯基乙基)氨基)腺苷-5』-N-乙基糖醛醯胺]，它具有降低眼壓的效果(J.Pharmacol.Exp.Ther.273,320-326(1995))。但是，其效果不令人滿意，因此已迫切需要開發出更有效的藥物。
一般來說，由於腺苷受體的親和力與低血壓效應相互關聯，因此腺苷衍生物被認為具有通過與腺苷受體有關的血管舒張降低血壓的效果(J.Pharmacol.Exp.Ther.274,882-888,1988和Eur.J.Pharmacol.196,69-76,1991)。例如，已報導，CGS-21680對腺苷A2受體具有親和力，並具有降低血壓的效果。還報導了，2-辛炔基腺苷對腺苷A2受體具有親和力，具有降低血壓的效果，並用作降血壓藥、局部缺血的心或腦疾病的預防藥或藥物、以及動脈硬化的預防藥或藥物(日本專利公告(kokoku)號1-33477和2-17526，日本專利號2774169和日本專利申請公開(kokai)號3-287537)。
鑑於前述，儘管在眼病治療上還沒有對其它腺苷衍生物進行研究，但是與CGS-21680類似，本發明人預測，對腺苷受體具有親和力的其它腺苷衍生物可能具有降低眼壓的效果。本發明人已對腺苷受體親和力與降低眼壓效果之間的關係進行了深入的研究。因此，它們發現，出人意料地，這些腺苷衍生物對腺苷受體的親和力與降低眼壓的效果不成比例；化合物物理性能的差異大大影響了吸收分布；而且無論它們具有的降低眼壓的效果如何，對腺苷受體的親和力不能用作篩選化合物的基礎。因此，本發明人在降低眼壓效果的基礎上對許多腺苷衍生物進行了隨機篩選。結果發現，與CGS-21680相比，在腺嘌呤鹼的2-位上具有乙炔基部分的2-鏈炔基腺苷衍生物具有優良且長效降低眼壓的效果；以及這些衍生物用作例如青光眼和眼內壓過高的眼病的藥物。在這些發現的基礎上完成了本發明。
因此，本發明提供了一種治療眼病的藥用組合物，其含有在腺嘌呤鹼的2-位上具有乙炔基部分的2-鏈炔基腺苷衍生物作為活性組分。
本發明還提供了在腺嘌呤鹼的2-位上具有乙炔基部分的2-鏈炔基腺苷衍生物用於製備治療眼病的藥用組合物的用途。
本發明還提供了一種治療眼病的方法，包括給予在腺嘌呤鹼的2-位上具有乙炔基部分的2-鏈炔基腺苷衍生物。
圖2顯示了當將2-(2-羥基-1-丙炔基)腺苷給予兔時在兔中2-(2-羥基-1-丙炔基)腺苷(●,■)抗眼壓的效果。y軸代表眼壓的變化(ΔIOP)，x軸代表給藥後經過的時間(分鐘)。
用於治療本發明的眼病的藥用組合物中的2-鏈炔基腺苷沒有特別限制，只要所述衍生物在腺嘌呤鹼的2-位上具有乙炔基部分。2-鏈炔基腺苷衍生物的特定例子包括下式(1)所代表的化合物 [其中X代表可以具有取代基的烴基或醯基；Y代表經過取代的甲基、可以具有取代基的氨基甲醯基、或者可以酯化的羧基。]在式(1)中，X所代表的烴基優選為C1-C20烴基，並且可以為飽和烴基或不飽和烴基。具體例子包括烷基、鏈烯基、鏈炔基、環烷基、芳基、芳烷基和環烷基取代的烷基。烷基、鏈烯基和鏈炔基的例子包括C1-C20直鏈或支鏈烷基、鏈烯基和鏈炔基。烷基的具體例子包括直鏈烷基如甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正辛基、正癸基、正十二烷基、正十四烷基；和支鏈烷基如異丙基、異丁基、叔丁基和2-乙基己基。鏈烯基的具體例子包括乙烯基、丙烯基和烯丙基。鏈炔基的具體例子包括乙炔基、丙炔基和丁炔基。環烷基的例子包括C3-C10環烷基，其中，優選C3-C8環烷基，例如環丙基、環戊基或環己基。芳基的例子包括C6-C14芳基，如苯基、甲苯基和萘基。芳烷基的例子包括C7-C14芳烷基，如苄基和苯乙基。環烷基取代的烷基的例子包括C3-C8環烷基取代的C1-C10烷基，例如環丙基甲基、環戊基甲基、環己基甲基、環丙基乙基、環戊基乙基、環己基乙基、環丙基丙基、環戊基丙基和環己基丙基。
在烴基上的取代基的例子包括羥基、疊氮基、氰基、氧取代烴基(烴氧基)、可以酯化的羧基、和下式(A)-(C)所示的基團 (其中R1代表烷基、芳基、芳烷基或滷代烷基；R2代表H、烷基、烷氧基或滷原子；R3和R4，彼此相同或不同，各自代表H、烷基、環烷基或芳基。)氧取代烴基(烴氧基)的例子包括烷氧基、環烷氧基和芳氧基。優選烷氧基為C1-C10烷氧基；優選環烷氧基為C3-C8環烷氧基；和優選芳氧基為C6-C14芳氧基。芳氧基的例子包括苯氧基、具有取代基如滷原子、烷基或烷氧基的取代苯氧基。
可以酯化的羧基的例子包括羧基、烷氧基羰基、環烷氧基羰基和芳氧基羰基。烷氧基、環烷氧基和芳氧基與上面所述的相似。
R1、R2、R3和R4各自所代表的烷基的例子包括C1-C10烷基。芳基的例子包括C6-C14芳基，例如苯基、甲苯基、萘基、滷代苯基和烷氧基苯基。芳烷基的例子包括C7-C14芳烷基，例如苯基取代的C1-C6烷基。滷代烷基的例子包括被1-3個滷原子如F、Cl、Br和I取代的C1-C10烷基。烷氧基的例子包括C1-C10烷氧基。環烷基的例子包括C3-C8環烷基。滷原子的例子包括F、Cl、Br和I。
X所代表的醯基的例子包括甲醯基、烷醯基、環烷基羰基和芳醯基。優選的烷醯基為C2-C11直鏈或支鏈烷醯基；優選的環烷基羰基為C4-C9環烷基羰基；優選的芳醯基為C7-C15芳醯基，如苯甲醯基、萘甲醯基、或者被滷原子、烷基或烷氧基取代的苯甲醯基。
Y所代表的甲基上的取代基的例子包括羥基、疊氮基、和下式(D)所代表的基團-NHR5(D)(其中R5代表H、基團 或基團-SO2-R8；R6代表O或S；R7代表H、烷基、氨基或烷基氨基；並且R8代表烷基或芳基。)式(D)中R7和R8所代表的烷基和芳基與前述R1-R4所代表的相同。優選的烷基氨基為C1-C10烷基氨基。
Y所代表的可以具有取代基的氨基甲醯基的例子包括下式(E)所代表的基團 (其中R9和R10，彼此可以相同或不同，各自代表H、烷基或環烷基。)式(E)中的烷基和環烷基與前述R1-R4所代表的相同。
Y所代表的可以酯化的羧基的例子包括，如上所述，羧基、烷氧基羰基、環烷氧基羰基和芳氧基羰基。
式(1)所代表的2-鏈炔基腺苷的例證化合物描述如下。
(1)X=烴，Y=-CH2OH2-(1-戊炔基)腺苷2-(1-己炔基)腺苷(化合物1)2-(1-庚炔基)腺苷2-(1-辛炔基)腺苷(化合物2)2-(1-十六碳炔基)腺苷2-(6-苯基-1-己炔基)腺苷2-(丁烯炔基)腺苷2-(2-環丁基-1-乙炔基)腺苷2-(2-環丙基-1-乙炔基)腺苷2-(2-環戊基-1-乙炔基)腺苷(化合物11)2-(2-環己基-1-乙炔基)腺苷(化合物12)2-(3-環丙基-1-丙炔基)腺苷2-(3-環戊基-1-丙炔基)腺苷(化合物13)2-(3-環己基-1-丙炔基)腺苷(化合物14)2-(4-環丙基-1-丁炔基)腺苷2-(4-環戊基-1-丁炔基)腺苷(化合物15)2-(4-環己基-1-丁炔基)腺苷2-(5-環丙基-1-戊炔基)腺苷(2)X=羥基取代的烴，Y=-CH2OH2-(3-羥基-1-丙炔基)腺苷(化合物4)2-(6-羥基-1-己炔基)腺苷2-(3-羥基-1-辛炔基)腺苷2-(3-羥基-3-苯基-1-丙炔基)腺苷(化合物5)2-(3-羥基-3-甲基-1-丁炔基)腺苷2-[2-(1-羥基環己基)-1-乙炔基]腺苷2-[2-(1-羥基環丙基)-1-乙炔基]腺苷2-[3-(1-羥基環丙基)-1-丙炔基]腺苷2-[4-(1-羥基環丙基)-1-丁炔基]腺苷2-[5-(1-羥基環丙基)-1-戊炔基]腺苷(3)X=疊氮基或氰基取代的烴，Y=-CH2OH2-(6-疊氮基-1-己炔基)腺苷2-(5-氰基-1-戊炔基)腺苷(4)X=烴氧基取代的烴，Y=-CH2OH2-(3-甲氧基-1-丙炔基)腺苷2-(3-乙氧基-1-丙炔基)腺苷(化合物6)2-(3-丁氧基-1-丙炔基)腺苷2-(4-丙氧基-1-丁炔基)腺苷(化合物7)2-(4-辛氧基-1-丁炔基)腺苷(化合物8)2-(5-乙氧基-1-戊炔基)腺苷(化合物9)2-(3-苯氧基-1-丙炔基)腺苷2-(3-環己氧基-1-丙炔基)腺苷(化合物10)(5)X=羧基取代的烴，Y=-CH2OH2-(7-羧基-1-庚炔基)腺苷2-(5-羧基-1-戊炔基)腺苷2-(4-乙氧基羰基-1-丁炔基)腺苷(6)X=(A)-取代的烴，Y=-CH2OH2-(3-N-乙醯氨基-1-丙炔基)腺苷2-(3-N-苯甲醯氨基-1-丙炔基)腺苷2-(3-N-三氟乙醯氨基-1-丙炔基)腺苷(7)X=(B)-取代的烴，Y=-CH2OH2-(3-鄰苯二甲醯亞氨基-1-丙炔基)腺苷2-(6-鄰苯二甲醯亞氨基-1-己炔基)腺苷(化合物3)2-[3-(3-氯鄰苯二甲醯亞氨基)-1-丙炔基]腺苷2-[3-(3-甲氧基鄰苯二甲醯亞氨基)-1-丙炔基]腺苷(8)X=(C)-取代的烴，Y=-CH2OH2-(3-二甲氨基-1-丙炔基)腺苷2-(6-氨基-1-己炔基)腺苷(9)X=醯基，Y=-CH2OH2-(3-氧代-1-己炔基)腺苷2-(3-氧代-1-庚炔基)腺苷2-(3-氧代-1-辛炔基)腺苷2-(3-氧代-1-十六碳炔基)腺苷(10)X=烴，Y=經過取代的甲基5』-疊氮基-5』-脫氧-2-(1-己炔基)腺苷5』-氨基-5』-脫氧-2-(1-己炔基)腺苷5』-氨基-5』-脫氧-2-(1-辛炔基)腺苷5』-甲醯氨基-5』-脫氧-2-(1-辛炔基)腺苷5』-乙醯氨基-5』-脫氧-2-(1-己炔基)腺苷5』-(N』-甲基脲基)-5』-脫氧-2-(1-辛炔基)腺苷5』-(N』-甲硫基脲基)-5』-脫氧-2-(1-己炔基)腺苷5』-甲磺醯氨基-5』-脫氧-2-(1-辛炔基)腺苷5』-對-甲苯磺醯氨基-5』-脫氧-2-(1-辛炔基)腺苷(11)X=烴，Y=氨基甲醯基2-(1-辛炔基)腺苷-4』-羧醯胺2-(1-丁炔基)腺苷-4』-甲基羧醯胺2-(1-己炔基)腺苷-4』-甲基羧醯胺(化合物16)2-(1-己炔基)腺苷-4』-丙基羧醯胺2-(1-辛炔基)腺苷-4』-環丙基羧醯胺(12)X=烴，Y=羧基2-(1-辛炔基)腺苷-4』-羧酸2-(1-己炔基)腺苷-4』-羧酸甲酯2-(1-己炔基)腺苷-4』-羧酸乙酯在屬於前述基團(1)-(12)的化合物中，屬於基團(1)、(2)、(4)、(7)和(11)的化合物為優選。X優選為可以被選自以下的基團取代的烷基環烷基、羥基環烷基、鄰苯二甲醯亞氨基、羥基、烷氧基、環烷氧基和芳基。Y優選為羥甲基或烷基取代的氨基甲醯基。
為本發明組合物中的活性組分的2-鏈炔基腺苷衍生物，可是游離形式或酸加成鹽形式。酸加成鹽的例子包括無機酸鹽如鹽酸鹽、硫酸鹽和氫溴化物；和有機酸鹽如草酸鹽、檸檬酸鹽和蘋果酸鹽。
大多數2-鏈炔基腺苷衍生物為已知的化合物，並且其所有衍生物可以通過已知方法容易地製備(參見日本專利申請公開(kokai)號62-99330、62-99395、5-163294、5-9197、5-9198和5-25195；EP429681；《歐洲藥理學雜誌》196,69-76(1991)；《藥物化學雜誌》35(2),241-252(1992)；《藥物化學雜誌》35(12),2253-2260(1992)；《藥物化學雜誌》35(15),2881-2890(1992)等)。
正如下面實驗實施例所述，與前述CGS-21680相比，所述2-鏈炔基腺苷衍生物具有顯著降低眼壓的優良效果，並且所述效果長。而且，所述衍生物安全度高，因此它有益地作為需要將眼壓控制到一低水平的眼病如青光眼的藥物。此外，所述2-鏈炔基腺苷衍生物具有血管舒張效果和抑制血小板聚集的效果。因此，預料所述衍生物具有改善視神經乳頭的血液循環的效果，該效果被認為對青光眼的治療非常重要。
根據給藥方法，本發明的組合物可製成口服或腸胃外投藥的產品形式。口服產品的例子包括固體產品如粉末、顆粒、膠囊和片劑。腸道外投藥產品的例子包括滴眼劑、眼軟膏和注射劑。
通過將藥用可接受的添加劑添加到所述2-鏈炔基腺苷衍生物中的常規方法製備這些產品。
在製備滴眼劑時，如果需要的話，可以向所述2-鏈炔基腺苷衍生物添加如氯化鈉和甘油的等滲劑；如乙二胺四乙酸鈉的穩定劑；如氯化苯甲烴銨和對羥基苯甲酸酯類的防腐劑；如聚山梨酯80的溶液佐劑；或者如磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、硼酸、四硼酸鈉(硼砂)、鹽酸和氫氧化鈉的pH調節劑，由此通過常規方法製備滴眼劑。
如果需要的話，可以將所述2-鏈炔基腺苷衍生物與如純的羊毛脂、凡士林、液狀石蠟和聚乙二醇的眼軟膏基料捏合製備眼軟膏。
在製備口服固體產品時，如果需要的話，可以將所述2-鏈炔基腺苷衍生物與如乳糖、澱粉、結晶纖維素、乳酸鈣和磷酸氫鈣的賦形劑、如蔗糖、羥丙基纖維素和聚乙烯基吡咯烷酮的粘合劑；如羧甲基纖維素鈣的崩解劑；或者如硬脂酸鎂和滑石粉的潤滑劑混合，由此通過常規方法生產產品。這些固體產品可以用例如鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素和甲基丙烯酸·甲基丙烯酸甲酯共聚物的腸溶性基料包衣，由此生產腸溶性藥物。
在製備注射劑時，如果需要的話，與如鹽酸、氫氧化鈉、磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉的pH調節劑；或例如氯化鈉的等滲劑一起，將所述2-鏈炔基腺苷衍生物溶於注射水中。將所得溶液進行無菌過濾，然後放入安瓿中。此外，該溶液可以與甘露糖醇或明膠混合，然後在真空下冷凍乾燥，其中在使用時將所得產品製成注射劑。
為本發明組合物中活性組分的2-鏈炔基腺苷衍生物的劑量適宜地根據患者的年齡、體重和病理條件以及組合物的產品形式來決定。含有量為0.0001-10％(w/v)的所述衍生物的滴眼劑或眼軟膏優選每天滴注或塗敷幾次。當為口服劑或注射劑時，衍生物的日劑量對成人而言通常為0.001-1000mg，所述日劑量優選以單次量給藥，或者以每天幾次的均分劑量給藥。
總共100g將上述配方混合，由此製備眼軟膏，並將所得眼軟膏放入鋁製滴眼管(每管5g)中。製劑實施例3口服劑2-(1-辛炔基)腺苷(化合物2)25mg馬鈴薯澱粉 15mg結晶纖維素 20mg羥丙基纖維素 5mg硬脂酸鎂 2mg乳糖 適量總共150mg(每片)根據上述配方將2-(1-辛炔基)腺苷、馬鈴薯澱粉、結晶纖維素、羥丙基纖維素和乳糖混合，並向所得混合物中加入水。接著將混合物捏合，然後通過帶有篩的衝壓件造粒。將所得顆粒乾燥之後，將硬脂酸鎂添加到乾燥顆粒中，由此生產片劑。製劑實施例4注射劑2-(1-辛炔基)腺苷(化合物2)0.25g聚山梨酯80 5g氯化鈉 8g注射水 適量總共1000mL根據上述配方製備注射劑，所得注射劑經無菌過濾，然後放入玻璃安瓿(每個安瓿2mL)中。
合成實施例(1)化合物5:2-(3-羥基-3-苯基-1-丙炔基)腺苷在有鈀催化劑的情況下將2-碘腺苷和1-苯基-2-丙炔-1-醇經過已知的交叉偶聯反應(J.Med.Chem.35,241-252(1992))，由此合成粗產物。將該產物用矽膠提純，由此獲得2-(3-羥基-3-苯基-1-丙炔基)腺苷。1H-NMR(DMSO-d6,ppm):8.43(1H,s),7.55-7.32(7H,m),6.27(1H,d,J=5.9Hz),5.86(1H,d,J=5.9Hz),5.60(1H,d,J=5.9Hz),5.47(1H,d,J=4.9Hz),5.18-5.15(2H,m),4.50(1H,q,J=4.9Hz),4.14-4.11(1H,m),3.96-3.93(1H,m),3.70-3.53(2H,m)(2)化合物6:2-(3-乙氧基-1-丙炔基)腺苷將炔丙醇溶於DMF，並將60％的氫化鈉加入所得溶液。在室溫下將混合物攪拌反應1小時。反應結束之後，向反應混合物中加入乙基溴，並使混合物在室溫下反應過夜，由此獲得3-乙氧基丙炔。
向含有3-乙氧基丙炔的反應混合物中加入6-氯-2』,3』,5』-三乙醯基-2-碘嘌呤核糖核苷，並在有鈀催化劑的情況下將混合物經過已知的交叉偶聯反應以及在有濃氨水的情況下進行胺化作用和脫醯作用(EP429681)，由此合成粗產物。將該產物用矽膠提純，由此獲得2-(3-乙氧基-1-丙炔基)腺苷。mp:120-127℃(3)化合物10:2-(3-環己氧基-1-丙炔基)腺苷將環己醇溶於THF，並將60％的氫化鈉加入所得溶液。在室溫下將混合物攪拌反應1小時。反應結束之後，向反應混合物中加入DMF和炔丙基溴，並使混合物在室溫下反應1小時，然後在80℃下反應2小時，由此獲得3-環己氧基丙炔。
向含有3-環己氧基丙炔的反應混合物中加入6-氯-2』,3』,5』-三乙醯基-2-碘嘌呤核糖核苷，並在有鈀催化劑的情況下將混合物經過已知的交叉偶聯反應以及在有濃氨水的情況下進行胺化作用和脫醯作用(EP429681)，由此合成粗產物。將該產物用矽膠提純，由此獲得2-(3-環己氧基-1-丙炔基)腺苷。1H-NMR(DMSO-d6,ppm):8.42(1H,m),7.47(2H,s),5.85(1H,d,J=5.9Hz),5.45(1H,d,J=5.9Hz),5.19-5.16(2H,m),4.56-4.52(1H,m),4.38(2H,s),4.15-4.11(1H,m),3.97-3.94(1H,m),3.69-3.35(3H,m),1.90-1.18(9H,m)實驗實施例1(實驗方法)使用2-(1-辛炔基)腺苷、2-(3-羥基-1-丙炔基)腺苷和CGS-21680[2-((4-(2-羧乙基)苯乙基)氨基)腺苷-5』-N-乙基糖醛醯胺]作為受試化合物。將每種化合物溶於15％的二甲亞碸水溶液(下文將該溶液稱之為「滴眼基料」)，由此獲得受試溶液。2-(1-辛炔基)腺苷和2-(3-羥基-1-丙炔基)腺苷的量分別為0.03％(W/V)和0.1％(W/V)。CGS-21680在所得溶液中的量為0.1％(w/v)。將該滴眼基料用作對照。
實驗中使用紐西蘭白色雄兔(Tokyo Jikken Dobutsu)(重量2.2-3.1kg)。將這些兔子裝在盒型固定裝置中並用於實驗。
在沒有麻醉下使用扁平肺活量計(Alcon,PTG)測定每隻兔子的眼壓。在測定眼壓之前，將0.4％鹽酸丁氧普魯卡因(Benoxil 0.4％滴眼劑，Santen製藥有限公司的產品)滴注到每隻兔子的眼中，由此將角膜表面麻醉。在給藥之前，間隔15分鐘測定幾次每隻兔子的眼壓，直到眼壓穩定。眼壓穩定之後，測定3次眼壓，並使用其平均值作為正常眼壓。
接著，向每隻兔子的左眼或者右眼分別滴注每種受試溶液(50μL)每次。在滴注受試化合物之後的第15、30、45、60、90、120、150和180分鐘測定眼壓。同時，測定沒有滴注受試溶液的另一隻眼的眼壓。每種受試化合物使用6隻兔子。就對照而言，將滴眼基料滴注到兔子眼中，並以上述的相似方式測定眼壓。
測定結果通過平均值±標準誤差顯示。按照Dunnett測定通過多重比較進行顯著性測驗。(測定結果)結果顯示在

圖1和2中。當滴注滴眼基料時，兔子的眼壓不變化至任意顯著程度，然而當分別滴注受試化合物時，兔子的眼壓隨劑量依賴性地降低。由這些圖看出，與CGS-21680相比，2-(1-辛炔基)腺苷和2-(3-羥基-1-丙炔基)腺苷具有降低眼壓的優良效果。此外，這些化合物具有長期持續的降低眼壓效果。實驗實施例2(實驗方法)使用表1中所示的化合物作為受試化合物。將每種化合物溶於含聚山梨酯80的生理鹽水(下文將該鹽水稱之為「滴眼基料A」)中或含聚山梨酯80的硼酸緩衝水溶液(pH7.0)(下文將該溶液稱之為「滴眼基料B」)中(每一基料中聚山梨酯80的含量5mg/mL)，由此獲得受試溶液。所得溶液中每種化合物的量為0.1％(W/V)。使用滴眼基料作為對照。
測定中使用日本白色雄兔(Kitayama Labes有限公司)(重量2.1-3.2kg)。將這些兔子裝在盒型固定裝置中並用於測定。
在沒有麻醉下使用30型標準肺活量計(Mentor的產品)測定每隻兔子的眼壓。在測定眼壓之前，將0.4％鹽酸丁氧普魯卡因(Benoxil 0.4％滴眼液，Santen製藥有限公司的產品)滴注到每隻兔子的眼中，由此將角膜表面麻醉。定期測定幾次每隻兔子的眼壓。眼壓穩定之後，測定3次眼壓，並使用其平均值作為眼壓。
分別向每隻兔子的一隻眼中滴注0.1％的每種測定化合物溶液(50μL)，同時向另一隻眼中滴注滴眼基料(50μL)。在滴注受試化合物之前60分鐘內；就在滴注前0分鐘，以及滴注後30、60、90、120、150、180、240、300、360、420和480分鐘測定兩隻眼的眼壓。每種受試化合物使用2-6隻兔子。就對照而言，將滴眼基料滴注到每隻兔子的雙眼中，並以上述的相似方式測定眼壓。
就每種受試化合物而言，在以下值的基礎上評價降低眼壓的效果時間與滴注受試化合物的眼的眼壓和滴注滴眼基料的眼的眼壓之差的變化的曲線下的面積(下文將該面積縮寫為AUC(mmHg.min))；和滴注受試化合物的眼的眼壓和滴注滴眼基料的眼的眼壓之差的最大值(下文將該值縮寫為Emax(mmHg))。(測定結果)每種受試化合物的AUC和Emax分別示於表1中。這些結果證實，相對其正常眼壓而言，滴注各種受試化合物(0.1％)降低了兔子的眼壓，並且降低眼壓的效果延長。與此相反，當滴注滴眼基料時，兔子的眼壓不變化至任意顯著程度。由這些結果看出，這些化合物具有顯著長期持續的降低眼壓效果。
表1向眼壓正常的兔子滴注受試化合物之後降低眼壓的效果受試化合物AUC(mmHg.分鐘)Emax(mmHg)滴眼基料化合物1-1236.0-4.6B化合物2-1093.5-4.2A化合物3-1471.0-6.3A化合物4-955.6 -4.3A化合物5-1185.6-4.8A化合物6-1538.3-5.3A化合物7-1828.5-4.9B化合物8-1683.0-5.4B化合物9-1117.5-3.7B化合物10 -945.9 -4.3A化合物11 -1532.7-4.4B化合物12 -1670.2-6.0B化合物13 -1053.9-5.9B*化合物14 -1053.2-4.0B化合物15 -1086.0-5.6B化合物16 -1838.3-6.0ACGS-21680 -508.1 -2.5A滴眼基料A -30.4 -0.4滴眼基料B -31.5 -0.2n=6(*n=2)化合物1:2-(1-己炔基)腺苷化合物2:2-(1-辛炔基)腺苷化合物3:2-(6-鄰苯二甲醯亞氨基-1-己炔基)腺苷化合物4:2-(3-羥基-1-丙炔基)腺苷化合物5:2-(3-羥基-3-苯基-1-丙炔基)腺苷化合物6:2-(3-乙氧基-1-丙炔基)腺苷化合物7:2-(4-丙氧基-1-丁炔基)腺苷化合物8:2-(4-辛氧基-1-丁炔基)腺苷化合物9:2-(5-乙氧基-1-戊炔基)腺苷化合物10:2-(3-環己氧基-1-丙炔基)腺苷化合物11:2-(2-環戊基-1-乙炔基)腺苷化合物12:2-(2-環己基-1-乙炔基)腺苷化合物13:2-(3-環戊基-1-丙炔基)腺苷化合物14:2-(3-環己基-1-丙炔基)腺苷化合物15:2-(4-環戊基-1-丁炔基)腺苷化合物16:2-(1-己炔基)腺苷-4』-甲基羧醯胺實驗實施例3實驗方法向6周齡雄性和雌性SD大鼠(每組6隻)以521、729、1020、1429或2000mg/kg的單劑量口服2-(1-辛炔基)腺苷。對所得大鼠和口服溶劑的對照組大鼠觀察2周。
向9月齡雄性和雌性獵兔犬(每組2隻)以50、150或450mg/kg的單劑量口服2-(1-辛炔基)腺苷。對所得犬和口服空膠囊的對照組犬觀察2周。實驗結果推定2-(1-辛炔基)腺苷抗所述大鼠和犬的LD50值分別為2000mg/kg以上和450mg/kg以上，它們分別為最大劑量。
本發明的組合物具有降低眼壓的長效和優良效果，並且該組合物可用作治療例如青光眼和眼內壓過高的眼病的藥用組合物。
權利要求
1．一種治療眼病的藥用組合物，其含有在腺嘌呤鹼的2-位上具有乙炔基部分的2-鏈炔基腺苷衍生物作為活性組分。
2．如權利要求1的藥用組合物，其中所述2-鏈炔基腺苷衍生物為下式(1)所代表的化合物 其中X代表可以具有取代基的烴基或醯基；Y代表取代的甲基、可以具有取代基的氨基甲醯基、或者可以酯化的羧基。
3．如權利要求2的藥用組合物，其中X所代表的烴基優選為C1-C20烴基，並且在所述烴基上的取代基為羥基、疊氮基、氰基、氧代烴基(烴氧基)、可以酯化的羧基、和下式(A)、(B)或(C)所示的基團 其中R1代表烷基、芳基、芳烷基或滷代烷基；R2代表H、烷基、烷氧基或滷原子；R3和R4，彼此相同或不同，各自代表H、烷基、環烷基或芳基。)
4．如權利要求2或3的藥用組合物，其中Y所代表的甲基上的取代基為羥基、疊氮基、和下式(D)所代表的基團-NHR5(D)(其中R5代表H、基團 或基團-SO2-R8；R6代表O或S；R7代表H、烷基、氨基或烷基氨基；並且R8代表烷基或芳基；和Y所代表的可以具有取代基的氨基甲醯基為下式(E)所代表的基團 其中R9和R10，彼此可以相同或不同，各自代表H、烷基或環烷基。
5．如權利要求2的藥用組合物，其中，在式(1)中，X為可以被選自以下的基團取代的烷基環烷基、鄰苯二甲醯亞氨基、羥基、烷氧基、環烷氧基和芳基；並且Y為羥甲基或烷基取代的氨基甲醯基。
6．如權利要求2的藥用組合物，其中式(1)所代表的化合物選自由以下化合物組成的組2-(1-己炔基)腺苷，2-(1-辛炔基)腺苷，2-(6-鄰苯二甲醯亞氨基-1-己炔基)腺苷，2-(3-羥基-1-丙炔基)腺苷，2-(3-羥基-3-苯基-1-丙炔基)腺苷，2-(3-乙氧基-1-丙炔基)腺苷，2-(4-丙氧基-1-丁炔基)腺苷，2-(4-辛氧基-1-丁炔基)腺苷，2-(5-乙氧基-1-戊炔基)腺苷，2-(3-環己氧基-1-丙炔基)腺苷，2-(2-環戊基-1-乙炔基)腺苷，2-(2-環己基-1-乙炔基)腺苷，2-(3-環戊基-1-丙炔基)腺苷，2-(3-環己基-1-丙炔基)腺苷，2-(4-環戊基-1-丁炔基)腺苷和2-(1-己炔基)腺苷-4』-甲基羧醯胺。
7．如權利要求1的藥用組合物，其中所述眼病為伴隨眼壓增加和/或視神經病的疾病。
8．如權利要求1的藥用組合物，其中所述眼病為青光眼或眼內壓過高。
9．如權利要求1的藥用組合物，為滴眼劑。
10．如權利要求1的藥用組合物，為眼軟膏。
11．在腺嘌呤鹼的2-位上具有乙炔基部分的2-鏈炔基腺苷衍生物用於製備治療眼病的藥用組合物的用途。
12．如權利要求11的用途，其中在腺嘌呤鹼的2-位上具有乙炔基部分的2-鏈炔基腺苷衍生物為權利要求2-6任一中所述的化合物。
13．一種治療眼病的方法，包括給予在腺嘌呤鹼的2-位上具有乙炔基部分的2-鏈炔基腺苷衍生物。
14．如權利要求13的方法，其中在腺嘌呤鹼的2-位上具有乙炔基部分的2-鏈炔基腺苷衍生物為權利要求2-6任一中所述的化合物。
全文摘要
本發明涉及治療眼病的藥用組合物,它含有在腺嘌呤鹼的2－位上具有乙炔基部分的2－鏈炔基腺苷衍生物作為活性組分。由於這些組合物具有降低眼壓的長效且明顯的效果,因此它們可用作伴隨眼壓增加或視神經衰竭的眼病如青光眼和眼內壓過高的藥物。
文檔編號C07H19/167GK1315862SQ99810424
公開日2001年10月3日 申請日期1999年8月31日 優先權日1998年9月1日
發明者遠藤和樹, 畔蒜藤一, 細川友和, 三澤美和, 紺野隆 申請人:雅瑪山醬油株式會社, 東亞榮養株式會社