腎茶色烯在製備治療痛風藥物中的應用的製作方法
2023-06-01 01:28:41 1
本發明涉及醫藥
技術領域：
，具體的涉及腎茶色烯（OrthochromeneA）在製備治療痛風藥物中的應用。
背景技術：
：高尿酸血症和痛風已成為現代生活的文明病之一，是一種由於體內嘌呤合成代謝增多，尿酸產生超量或因尿酸排洩不良而導致血中尿酸升高，高尿酸血症只是痛風疾病的一個生化標誌。痛風的臨床表現常分為急性期、間歇期、慢性期和腎臟病變等，主要表現為痛風性關節炎和痛風性腎病。腎臟病變的發生是長期高尿酸血症發展的結果，高尿酸血症患者腎臟病理檢查幾乎均有不同程度的損害，大約1/3患者在病程中出現腎臟症狀。關於高尿酸血症的治療，繼發性高尿酸血症主要針對其基礎疾病進行治療，而原發性高尿酸血症的治療，一般採用飲食、運動控制加以藥物治療。抑制尿酸生成藥物主要機制為抑制黃嘌呤氧化酶（XO）的活性。別嘌醇是這類藥的代表，一直以來都是抗痛風的臨床一線藥物，雖然降尿酸效果顯著，但對腎臟的保護功能甚弱。本發明涉及的化合物腎茶色烯，可從腎茶中提取得到。本發明將其用作製備抗通風藥物為首次公開。技術實現要素：本發明的目的在於提供腎茶色烯在製備治療痛風藥物中的應用，為了實現本發明的目的，擬採用如下技術方案：本發明一方面涉及腎茶色烯在製備治療痛風藥物中的應用，所述的化合物的結構式為：在本發明的一個優選實施方式中，所述的藥物中包括或者不包括其它活性成分。在本發明的一個優選實施方式中，所述的藥物不含有其它活性成分，還含有藥學上可接受的輔料。本發明為痛風病人提供了新的治療藥物，具有劑量低、療效好的特點。具體實施方式若未特別說明，實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規手段。實施例1下面通過藥效學實驗來進一步說明其藥物活性。實驗例1：腎茶色烯抗急性痛風炎症實驗：1、方法①溶液配製5g尿酸加1000ml蒸餾水煮沸，加5％NaOH溶液調pH7.4，攪拌，冷卻析晶製成尿酸鈉結晶(MSU)。將制好的MSU10mg高壓滅菌，加不含血清的DMEM培養液10ml，研磨配成1mg/ml的DMEM溶液。實驗時，此溶液再加DMEM培養液配成不同濃度DMEM的MSU溶液。腎茶色烯2.5mg，用乙醇溶解，終濃度<0.02％，再加無血清的DMEM培養液，配製成濃度2.5ug/ml、25ug/ml、250ug/ml。陽性藥吲哚美辛2.0mg，方法同腎茶色烯，配製濃度20ug/ml。②血管內皮細胞的體外培養人臍靜脈血管內皮細胞HUVEC株，由廣西某醫學院提供，細胞經支原體檢測，無支原體汙染，細胞經0.25％胰蛋白酶消化，含10％小牛血清的DMEM培養液中和，離心(1000r/min×6min)，去上清液，加含10％小牛血清的DMEM培養液，移入細胞培養瓶中，放37℃、5％CO2培養箱中傳代培養。③對MSU刺激HUVEC活力的影響HUVEC在培養瓶中培養，待生長至70％～80％融合時，以0.25％胰蛋白酶消化、離心，10％小牛血清DMEM培養液洗滌3次，用10％小牛血清DMEM培養液調成4×104/ml細胞懸液，植入96孔板(每孔200ul)，培養24小時後輕吸出原培養液，進行以下實驗，每組各8孔，具體分組及加液如下：對照組(200ulDMEM培養液)、模型組(100ug/mlMSU溶液)、幹預A組(100ug/mlMSU溶液+2.5ug/ml腎茶色烯)、幹預B組(100ug/mlMSU溶液+25ug/ml腎茶色烯)、幹預C組(100ug/mlMSU溶液+250ug/ml腎茶色烯)，加液後繼續放37℃、5％CO2培養箱中培養24小時，收集上清液，剩餘的HUVEC用於測定細胞活性，每孔再加5mg/mlMTT液20ul，繼續放37℃、5％CO2培養箱中培養4小時後，棄MTT液，加入二甲基亞碸200ul溶解，震蕩，於酶標儀讀取吸光度值，波長490nm。陽性藥組加液(100ug/mlMSU溶液+20ug/ml吲哚美辛)，其他方法同上。數據統計學處理，細胞活力(％)＝實驗組吸光度值/對照組吸光度值×100％，結果見表1。與對照組相比，模型組細胞活力顯著減小(P<0.01，P<0.05)，陽性藥吲哚美辛及腎茶色烯幹預後細胞活力顯著提高(P<0.01，P<0.05)，並強於對照組，其中，腎茶色烯各濃度組的細胞活力強於陽性藥吲哚美辛。表1腎茶色烯對MSU刺激的血管內皮細胞活力的影響(X±s)組別藥物濃度（微克/毫升）n/孔細胞活力（%）對照組08100模型組0884陽性藥物208107幹預A組2.58181幹預B組258202幹預C組2508198④對ICAM-1表達影響將處於對數生長期的HUVEC用0.25％的胰蛋白酶消化，輕輕吹打，製成細胞懸液，調整細胞密度為5×109/L，接種於細胞培養瓶中。待細胞長滿後(約24h)，棄去上清液，分為下列組：對照組、模型組(100ug/mlMSU溶液)、腎茶色烯組(100ug/mlMSU溶液+25ug/ml腎茶色烯)，繼續培養24小時，PBS收集細胞，離心去上清，加入CD54單克隆抗體，30min後，PBS洗滌，重懸細胞，應用流式細胞儀檢測其陽性細胞百分率(n＝10000)，重複3次，結果見表2。表2腎茶色烯對MSU刺激的血管內皮細胞ICAM-1表達的影響(X±s)組別藥物濃度ICAM表達對照組015±3模型組0239±62腎茶色烯組25131±46與模型組比較，**P<0.01*P<0.05，與對照組比較，##P<0.01#P<0.052、結果結果顯示，空白組HUVEC幾乎無ICAM-1表達，模型組ICAM-1的表達最高，與模型組相比，腎茶色烯對ICAM-1的表達有較強的抑制作用。結論：用MSU致HUVEC損傷的急性痛風模型評價顯示，腎茶色烯可保護MSU致HUVEC損傷，減少細胞凋亡，提高細胞活性，抑制ICAM-1表達，具有抗痛風活性，腎茶色烯可用於製備治療急性痛風炎症藥物。以上所述是本發明的優選實施例，應當指出，對於本
技術領域：
的普通技術人員來說，在不脫離本發明所述原理的前提下，還可以作出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護範圍。當前第1頁1 2 3