一種採用sfc提純奧利司他的方法
2023-06-24 00:59:06
一種採用sfc提純奧利司他的方法
【專利摘要】本發明涉及一種有機化合物的提純方法，具體來說，本發明涉及一種製備高質量奧利司他的方法和工藝。經過本發明公開的半製備SFC分離系統製備高質量奧利司他工藝後，採用高效液相色譜測定奧利司他含量，奧利司他的色譜含量可達99.5%以上，已知雜質的含量小於等於0.15%。未知雜質的含量在0.10%以下。
【專利說明】一種採用SFC提純奧利司他的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種有機化合物的提純方法，具體來說，本發明涉及一種SFC製備高質量奧利司他的方法及其工藝。
【背景技術】
[0002]奧利司他(Orlistat)是鏈黴菌屬的天然產物Lipstatin (利普斯他汀)經氫化後的衍生物，化學名為S-2-甲醯胺基-4-甲基戊酸(S) -1-{[(2S，3S)_3-己基-4-氧-2-乙氧基]甲基}十二烷酯。奧利司他為瑞士巴塞爾豪夫邁.羅氏有限公司研發的減肥藥，它是長效和強效的特異性胃腸道脂肪抑制劑，通過與胃和小腸腔內胃脂肪酶和胰脂肪酶的活性絲氨酸部分形成共價鍵使酶失活而發揮治療作用，失活的酶不能將食物中的脂肪，主要是甘油三酯水解為可吸收的游離脂肪酸和單醯基甘油。未消化的甘油三酯不能被身體吸收，從而減少熱量攝入，控制體重。
[0003]國內外對奧利司他的製備和提純的研究已經比較多。在發酵方面，早在1986年美國專利就公開了用色譜法濃縮和純化得到奧利司他的方法，即將發酵物Lipstatin用溶媒浸泡後濃縮，再上柱洗脫、濃縮，之後經氫化後用庚烷結晶；中國專利公開的提純方法包括先用中等極性的溶媒溶解樣品，過濾去雜質、結晶，再用非極性溶媒進行重溶解、重結晶，以達到提純的目的；還有專利公開了一種使用動態柱製備高質量奧利司他的方法。雖然這些公開的純化奧利司他的方法比較簡單，但是勢必會帶來溶解用量增加、收率偏低、環境汙染等問題，從而造成成本大大增加，失去發酵的成本競爭優勢。
[0004]本發明提供了一種SFC提純奧利司他的方法和工藝，採用超臨界CO2作為主要流動相，添加少量有機溶劑作為改性劑，有機溶劑用量少，超臨界CO2經減壓後變為氣態揮發，大量製備時可回收利用，綠色環保，成本低，後續處理簡單。·
【發明內容】
[0005]本發明的目的是通過篩選SFC的各項色譜分離條件，包括CO2流速、改性劑種類和流速、溫度、壓力、色譜柱型號和規格等技術參數，獲得快速、準確、高效、經濟的純化奧利司他的SFC製備方法，該方法包括以下步驟:
(1)將奧利司他樣品用有機溶劑或有機溶劑和水的混合溶液溶解，如果需要，加入活性炭攪拌脫色，過濾除去微小的固體不溶物，得到濾液作為待純化樣品；
(2)將過濾產物通過進樣泵或者進樣閥注入半製備SFC分離系統；
(3)採用CO2和改性劑做流動相，調節系統溫度、壓力、改變色譜柱類型等條件，收集奧利司他餾分，揮幹溶劑後得到奧利司他產品。
[0006]在進一步的實施方案中，本發明的奧利司他樣品為乾料。
[0007]在進一步的實施方案中，步驟(1)中的有機溶劑為甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、異丙醇或它們的混合物。最佳的溶樣選擇是有機溶劑與奧利司他樣品的體積重量比為1:1。
[0008]步驟(3)中採用的色譜柱規格:內徑l(Tl00mm、長度15(T300mm，填充固定相為C18、C8，系統中壓力範圍為9MPa~40MPa，溫度範圍為30°C~70°C。
[0009]步驟(3)中，採用CO2和改性劑作為流動相，改性劑為甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、異丙醇、正己烷或它們的混合物，流動相中CO2與改性劑的體積比(V/V)範圍為100/0-80/20。
【具體實施方式】
[0010]實施例1
奧利司他原料20mg，lml甲醇溶解，過濾後由自動進樣器注入半製備SFC分離系統中；色譜柱尺寸為Φ 10 X 250mm，C18填料，粒徑為3~50um，CO2流速為0.8^10.0ml/min，溫度為40°C，背壓為lOMPa。採用的紫外光度檢測器的檢測波長為210nm，收集奧利司他出譜峰餾分，經HPLC分析純度≥99.8%。
[0011]實施例2
奧利司他原料50mg，lml甲醇溶解，過濾後由自動進樣器注入半製備SFC分離系統中；色譜柱尺寸為Φ 10 X 250mm，C18填料，粒徑為3~50um，CO2流速為5.0-20.0ml/min，溫度為40°C，背壓為15MPa。採用的紫外光度檢測器的檢測波長為210nm，收集奧利司他出譜峰餾分，經HPLC分析純度≥99.6%。
[0012]實施例3
奧利司他原料50mg，lml甲醇溶解，過濾後由自動進樣器注入半製備SFC分離系統中；色譜柱尺寸為Φ 30 X 250mm，C8填料，粒徑為3~50um，CO2流速為5.0~40.0ml/min，溫度為40°C，背壓為20MPa。採用的紫外光度檢測器的檢測波長為210nm，收集奧利司他出譜峰餾分，經HPLC分析純度≥ 99.3%。
【權利要求】
1.一種用半製備SFC分離系統提純奧利司他的方法，其特徵在於包括以下步驟: (1)將奧利司他樣品用有機溶劑或有機溶劑和水的混合溶液溶解，如果需要，加入活性炭攪拌脫色，過濾除去微小的固體不溶物，得到濾液作為待純化樣品； (2)將過濾產物通過進樣泵或者進樣閥注入半製備SFC分離系統； (3)採用CO2和改性劑做流動相，調節系統溫度、壓力、改變色譜柱類型等條件，收集奧利司他餾分，揮幹溶劑後得到奧利司他產品。
2.根據權利要求1所述的方法，其特徵是:所述步驟(I衝的有機溶劑為甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、異丙醇或它們的混合物。
3.根據權利要求1所述的方法，其特徵是:所述步驟(3)中，在半製備SFC分離系統中，採用色譜柱的規格:內徑l(Tl00mm、長度15(T300mm，填充固定相為C18、C8。
4.根據權利要求1所述的方法，其特徵是:所述步驟(3)中，系統中壓力範圍為9MPa~40MPa。
5.根據權利要求1所述的方法，其特徵是:所述步驟(3)中，系統溫度範圍為300C ~70O。
6.根據權利要求1所述的方法，其特徵是:所述步驟(3)中，採用CO2和改性劑作為流動相，改性劑為甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、異丙醇、正己烷或它們的混合物，流動相中CO2與改性劑的體積比(V/V)範圍為100Α 80/20。
【文檔編號】C07D305/12GK103788029SQ201210429832
【公開日】2014年5月14日 申請日期:2012年11月1日 優先權日:2012年11月1日
【發明者】王冰冰, 朱雨庭, 盛曉宇 申請人:江蘇漢邦科技有限公司