一種頭孢地尼反應終點的液相檢測方法
2023-05-30 15:03:21 2
一種頭孢地尼反應終點的液相檢測方法
【專利摘要】一種頭孢地尼反應終點的液相檢測方法，包括以下步驟：1)稀釋反應液，過濾；2)流動相配置，A流動相：1000mL水相中含26mL10％四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸調節pH等於5.0，B流動相：乙腈；3)流動相體積比A：B＝525～600：475～400，流速1mL/min，C18填料，柱溫25度，檢測波長210～300nm，進樣體積10μL；4)以7-AVCA在液相色譜中的峰面積小於0.5％為反應終點。本發明的有益效果在於：在不改變其他色譜條件下，調整混合流動相各組分的比例，使7-AVCA與相鄰共存物之間的分離度大於1.5，達到完全的基線分離，準確的判斷反應終點，方法簡便，可操作性強。
【專利說明】一種頭孢地尼反應終點的液相檢測方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種分析檢測方法，尤其涉及一種頭孢地尼反應終點的液相檢測方法。
【背景技術】
[0002]頭孢地尼合成步驟包括:縮合，脫保護和精製三步。在縮合反應一步中，由中間體7-AVCA和活性酯反應生成頭孢地尼。HPLC檢測反應液，7-AVCA〈0.5%時，即判定為反應終點。當活性酯來源不同廠家時，帶入反應液的雜質也不同，當7-AVCA與相鄰兩雜質形成三連峰，無法準確積分得到7-AVCA的含量，即7-AVCA —直大於0.5 %，無法準確判斷反應是否達到終點，直接影響產物的純度和質量。方便快捷的調整液相檢測方法，判斷反應終點對整個工藝流程尤為重要。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是提供一種頭孢地尼反應終點的液相檢測方法，用於實現對頭孢地尼合成過程中反應終點的快速、準確的判斷。
[0004]為實現上述目的，本發明的包括以下步驟:
[0005]I)取ImL頭孢地尼反應液,加入1mL乙腈稀釋,0.45 μ m有機針式過濾頭過濾；
[0006]2)流動相配置，A流動相:1000mL水相中含26mL 10%四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸調節pH等於5.0, B流動相:乙腈；
[0007]3)以步驟2)中的流動相體積比A:B = 525?600:475?400，流速lmL/min，色譜柱:250mmX 4.6mm不鏽鋼柱、C18填料、填料粒徑5 μ m，柱溫25度，檢測波長210?300nm，進樣體積1yL;
[0008]4)以頭孢地尼反應液中原料7-AVCA在液相色譜中的峰面積小於0.5%為反應終點。
[0009]進一步，所述流動相體積比A:B = 600:400時，分離度大於1.5，完全分離。
[0010]進一步，所述頭孢地尼反應液中原料7-AVCA在液相色譜中的保留時間為
11.3min。
[0011]本發明的有益效果在於:在不改變其他色譜條件下，調整混合流動相各組分的比例，使7-AVCA與相鄰共存物之間的分離度大於1.5，達到完全的基線分離，能更加準確的判斷反應終點，方法簡便，可操作性強。
【具體實施方式】
[0012]本發明的包括以下步驟:、
[0013]I)取ImL頭孢地尼反應液，加入1mL乙腈稀釋，0.45 μ m有機針式過濾頭過濾；
[0014]2)流動相配置，A流動相:1000mL水相中含26mL 10%四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸調節pH等於5.0, B流動相:乙腈；
[0015]3)以步驟2)中的流動相體積比A:B = 525?600:475?400，流速lmL/min，色譜柱:250mmX 4.6mm不鏽鋼柱、C18填料、填料粒徑5 μ m，柱溫25度，檢測波長210?300nm，進樣體積1yL;
[0016]4)以頭孢地尼反應液中原料7-AVCA在液相色譜中的峰面積小於0.5%為反應終點。
[0017]進一步，所述流動相體積比A:B = 600:400時，分離度大於1.5，完全分離。
[0018]進一步，所述頭孢地尼反應液中原料7-AVCA在液相色譜中的保留時間為
11.3min。
[0019]實施例:
[0020]取ImL頭孢地尼反應液,加入1mL乙腈稀釋,0.45 μ m有機針式過濾頭過濾；流動相採用:A流動相:1000mL水相中含26mL 10%四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸調節pH等於5.0, B 流動相:乙腈,A:B = 600:400 ;流速 lmL/min,色譜柱:250mmX4.6mm 不鏽鋼柱、C18填料、填料粒徑5 μ m，柱溫25度，檢測波長210?300nm，進樣體積10 μ L ;結果7-AVCA在液相色譜中的保留時間為11.3min，分離度大於1.5。
[0021]以上對本發明的一個實施例進行了詳細說明，但所述內容僅為本發明的較佳實施例，不能被認為用於限定本發明的實施範圍。凡依本發明申請範圍所作的均等變化與改進等，均應仍歸屬於本發明的專利涵蓋範圍之內。
【權利要求】
1.一種頭孢地尼反應終點的液相檢測方法，包括以下步驟: 1)取ImL頭孢地尼反應液,加入1mL乙腈稀釋,0.45 μ m有機針式過濾頭過濾； 2)流動相配置，A流動相:1000mL水相中含26mL10%四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸調節pH等於5.0, B流動相:乙腈； 3)以步驟2)中的流動相體積比A:B = 525?600:475?400，流速lmL/min，色譜柱:250mmX4.6mm不鏽鋼柱、C18填料、填料粒徑5 μ m，柱溫25度，檢測波長210?300nm，進樣體積1yL; 4)以頭孢地尼反應液中原料7-AVCA在液相色譜中的峰面積小於0.5%為反應終點。
2.根據權利要求1所述的一種頭孢地尼反應終點的液相檢測方法，其特徵在於:所述流動相體積比A:B = 600:400時，分離度大於1.5，完全分離。
3.根據權利要求1所述的一種頭孢地尼反應終點的液相檢測方法，其特徵在於:所述頭孢地尼反應液中原料7-AVCA在液相色譜中的保留時間為11.3min。
【文檔編號】G01N30/34GK104330507SQ201410542200
【公開日】2015年2月4日 申請日期:2014年10月14日 優先權日:2014年10月14日
【發明者】孟繁靜, 廖飛, 王凡 申請人:天津醫藥集團津康製藥有限公司