百合組培苗化學藥劑處理脫毒的方法
2023-05-31 02:36:31
專利名稱：百合組培苗化學藥劑處理脫毒的方法
技術領域：
本發明涉及植物組織培養，具體地說是百合組培苗化學藥劑處理脫毒的方法。
背景技術：
植物組織培養是指在離體的條件下，將植物體的一部分，如一小段莖、一小塊葉、甚至一個細胞，接種在培養基上，使它們重新形成一個完整植株的方法。組織培養的步驟有培養基的製作與接種材料的消毒、接種、植株誘導、生根和移栽。
其中常用的培養基為MS培養基，其配方為
一些重要的花卉、園林觀賞植物可以用組織培養的方法大量繁殖無病毒苗。菊花、香石竹、唐菖蒲、水仙、鬱金香、百合、大麗花、白鶴芋等一大批花卉靠無性繁殖法繁殖，病毒逐代傳遞積累，危害日趨嚴重。化學藥劑處理是指將一些抗病毒類藥劑加入到培養基中，用其抑制植物體內或離體組織內病毒的合成，帶毒植株經化學藥劑處理後病毒濃度會降低，活性會鈍化；對植物進行化學藥劑處理過程中主要應注意以下幾個問題1.化學藥劑的選取；2.藥劑濃度的調配；3.處理時間的確定。現階段可採用的化學藥劑有嘌呤和嘧啶類化合物、胺基酸、抗生素、病毒唑等，由於植物種類不同，關於藥劑選取、濃度調配以及處理時間的差別很大，而且不同藥劑對不同植物的處理效果也很難確定；有報導利用病毒唑可對石竹植株進行脫毒處理，藥劑濃度為5mg/L，CMV(黃瓜花葉病毒)的脫毒率為80％；而對於百合的化學藥劑脫毒工藝還沒有詳細報導，對如何能保證百合的正常發育和較好的脫毒效果是百合化學藥劑脫毒處理的關鍵。
發明內容
本發明的目的在於提供一種存活率高、脫毒效果好的百合組培苗化學藥劑處理脫毒的方法。
為實現上述目的，本發明採用的技術方案為百合組培苗化學藥劑處理脫毒的方法，在百合組織培養誘導成芽的過程中，在組培培養基中含有ribavirin 200～505μmol/L；較好為200～300μmol/L。
ribavirin的化學名稱為病毒唑(三氮唑核苷)，即1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑。
本發明的優點如下1.存活率高。本發明化學藥劑處理過程中植株存活率較高，對誘導率影響較小。
2.脫毒效果好。本發明化學藥劑處理後百合鱗莖脫毒率89.1％以上，脫毒率較高。
3.應用效果好。本發明化學藥劑脫毒處理的百合鱗莖在處理後於大田生產中沒有發現變異現象；去病毒後，植株生長勢強，花朵變大，色澤鮮豔，抗逆能力提高，產花數量上升。
具體實施例方式
實施例1 百合組培苗化學藥劑處理脫毒的方法1)培養基配製將ribavirin經過過濾滅菌後在無菌條件下加入到已消毒滅菌但尚未冷凝的MS培養基中(培養基組成參見表2所示)；
2)誘導擴繁百合組培苗當百合芽長5～10cm時，取其莖尖分生組織，將外植體接種於上述MS培養基中，附加入BA(6-苄基氨基嘌呤)0.5mg/l、NAA(萘乙酸)0.5mg/l和蔗糖30g/l進行誘導培養；在2000～3000LX(本實施例為2000LX)每天12～14小時(本實施例為14小時)的光照條件下，20～26℃的溫度條件下，30～40天後(本實施例為30天)，直接誘導出許多緻密的不定芽；觀察其誘導率和脫毒效果；表1
從上表中可以看出不同濃度的化學藥劑ribavirin對百合的誘導率和脫毒效果有著明顯影響；隨著藥劑濃度的增加，誘導率逐漸降低，當濃度高於600μmol/L時，誘導率降低至50％左右，當濃度達到1000μmol/L時，誘導率僅為24％；而隨著藥劑濃度的增加，脫病毒率則不斷提高，當濃度達到200μmol/L時，脫毒效果有明顯的提高，達到89.1％左右，當濃度達到500μmol/L時，脫毒率為94％。
通常，百合組培苗化學藥劑處理脫毒的時間與百合組培苗誘導成芽的時間相當，其處理時間通常可為25～40天，較佳為28～32天。
由於常規的MS培養基和WPM培養基均可在百合組織培養過程中應用，並且它們的組成成份中各組份的用量相差較大，而在本發明中起脫病毒作用的為病毒唑類中的ribavirin，而對於改進的MS培養基中各組份用量無需嚴格限定，本發明組織培養中可採用改進的MS組成如下表2所示，其中還應添加有硝酸鉀(KNO3)1000～1900mg/L、磷酸二氫鉀(KH2PO4)170-340mg/L、碘化鉀(KI)0.75～0.83mg/L和氯化鈷(CoCl2)0.025～0.5mg/L，或添加有Ca(NO3)2·4H2O 350-556mg/L和K2SO4990～1450mg/L。
表2
權利要求
1.百合組培苗化學藥劑處理脫毒的方法，其特徵在於在百合組織培養誘導成芽的過程中，在組培培養基中含有ribavirin 200～505μmol/L。
2.按照權利要求1所述百合組培苗化學藥劑處理脫毒的方法，其特徵在於組培培養基中含有ribavirin 200～300μmol/L。
全文摘要
本發明涉及植物組織培養，具體地說是百合組培苗化學藥劑處理脫毒的方法，在百合組織培養誘導成芽的過程中，在組培培養基中含有ribavirin200～505μmol/L。本發明的優點為植株存活率高，對誘導率影響較小；脫毒效果好；本發明化學藥劑脫毒處理的百合鱗莖在處理後於大田生產中沒有發現變異現象。
文檔編號A01H4/00GK1903015SQ20051004695
公開日2007年1月31日 申請日期2005年7月29日 優先權日2005年7月29日
發明者潘利軍 申請人:潘利軍