負載他克莫司或其藥用鹽的膠束和凍幹製劑、製法及應用的製作方法

2023-06-15 03:16:31

專利名稱：負載他克莫司或其藥用鹽的膠束和凍幹製劑、製法及應用的製作方法
技術領域：
本發明屬於藥物劑型和納米藥物製備技術領域，特別是涉及一種負載他克莫司或其藥用鹽的膠束、凍幹製劑及其製備方法和應用。
背景技術：
貞司(Tacrolimus,FK506) MhKMMI^^M (steptomyces tsukubaensis)的發酵液中提取的大環內酯類抗生素，是第二代免疫抑制藥的代表性藥物，他克莫司免疫抑制作用及其機制與環孢素相似，但其抑制各種免疫反應的作用較環孢素強100倍；對已發生排異反應的抑制作用也比環孢素好；用該藥品的患者，細菌和病毒感染率也較環孢素治療者低，尤其是該藥品有較強的親肝性，對肝移植的功效高100倍。臨床上已作為預防排斥反應的主要藥物之一，因而已取代環孢素成為器官移植術後首選的免疫抑制劑。他克莫司， 不溶於水，目前臨床上所用的他克莫司注射液(Prograf )組成為每Iml含他克莫司無水物 5mg，聚氧乙烯(60)氫化蓖麻油(即HC0-60)200mg，無水乙醇80% (V/V)。由於含有大量的有機溶媒和HC0-60，靜脈注射Π(506具有溶血風險，且經常發生神經毒性，輕者可出現頭痛、震顫、失眠、夢魘、畏光、感覺遲鈍等，重者可出現運動不能、緘默症、癲癇發作、腦病等， 加重患者的痛苦。本領域技術人員一直致力於降低毒副作用，或提高其在靶器官的藥物濃度，以期更好的發揮療效，但是目前尚無有效解決他克莫司或其藥用鹽在臨床抗腫瘤時遇到的難題。

發明內容
為有效利用他克莫司或其藥用鹽，發明人曾做過多種嘗試，希望降低毒副作用或提高其在靶器官的藥物濃度，以期更好的發揮療效，最終本發明的發明人嘗試提供一種負載他克莫司或其藥用鹽的新劑型來改善他克莫司或藥用鹽在臨床上的應用現狀。本發明所解決的第一個技術問題是提供一種負載他克莫司或其藥用鹽的膠束，為了使得該製劑有可能應用於臨床，需要保證製劑的載藥量、包封率和穩定性。本發明用於負載他克莫司或其藥用鹽的膠束，它是由生物可降解的高分子材料與他克莫司或其藥用鹽製成。該製劑系統可有效地控制藥物緩慢釋放，而其中生物可降解的高分子材料則可自行降解，所形成的膠束粒徑在10nm-200nm之間，他克莫司或其藥用鹽納米藥物製劑可以更好的蓄積於移植器官組織中，且由於沒有任何有機溶媒，從而降低毒副作用，達到治療的目的。他克莫司或其藥用鹽與可降解的高分子材料的重量配比為他克莫司或其藥用鹽 1份、可降解的高分子材料1. 5 99份。進一步的，重量配比為他克莫司或其藥用鹽1份、可降解的高分子材料1. 5 90 份。更進一步地，重量配比為他克莫司或其藥用鹽1份、可降解的高分子材料2 49份。其中，原料藥優選採用他克莫司。生物可降解的高分子材料選自二嵌段聚合物甲氧基聚乙二醇-聚己內酯、三嵌段聚合物聚己內酯-聚乙二醇-聚己內酯。其中生物可降解高分子材料的親水嵌段與疏水嵌段的分子量比分別為二嵌段聚合物中甲氧基聚乙二醇與聚己內酯的分子量比為0. 5 2 ； 優選分子量比為1 ；三嵌段聚合物中聚己內酯與聚乙二醇的分子量比為0. 5 3 ；優選分子量比為0. 85。聚合物中的聚己內酯最好採用聚(ε -己內酯)，即二嵌段聚合物為甲氧基聚乙二醇-聚(ε-己內酯)，三嵌段聚合物為聚(ε-己內酯)_聚乙二醇-聚(ε-己內酯)。其親水嵌段與疏水嵌段的分子量比分別為二嵌段聚合物中甲氧基聚乙二醇與聚(ε -己內酯)的分子量比為0.5 2，優選1 ；三嵌段聚合物中聚(ε-己內酯)與聚乙二醇的分子量比為0.5 3，優選0. 85。本發明膠束，可採用下述方法製備Α、將生物可降解高分子材料和藥物溶於有機溶劑，得到澄清溶液1 ；B、除去澄清溶液1的有機溶劑，得到凝膠2 ；C、將凝膠2注入水(優選注射用水)中，使其呈澄清透明狀，過濾，即得膠束3。上述方法中，所用有機溶劑為乙醇、叔丁醇、乙腈、二氯甲烷、丙酮、三氟乙醇或六氟異丙醇中的一種或幾種的混合溶劑。優選乙醇、叔丁醇。製備所得膠束粒徑為10nm-200nm，載藥量一般可達到8_23 %，包封率至少95 %， 穩定性優。優選工藝處理得可使粒徑達到lOnm-lOOnm，更便於臨床應用，期望可實現高濃度、長時間蓄積於腫瘤組織中，達到被動靶向給藥的效果。上述膠束根據生產或實驗室設備可採用下述方法製備A、將生物可降解高分子材料和藥物溶於有機溶劑，為保證溶解完全，可採用加熱攪拌的方式，得到澄清溶液1 ；B、除去澄清溶液1的有機溶劑具體可採用旋蒸的方式，最後得到呈透明狀的凝膠 2 ；C、將預熱過的注射用水(便於凝膠2溶解)，加入凝膠2，在加熱攪拌的條件下，使之澄清透明，過0. 22 μ m超濾膜，製得粒徑一般在10nm-200nm的膠束3。本發明所解決的第二個技術問題是為保證膠束的穩定性，便於貯存和運輸，發明人將其製成了凍幹製劑。該凍乾粉在臨床使用前，加注射用水在給熱的條件下就會自動形成緩釋的納米級膠束。復溶後粒徑依舊保持在10nm-200nm，甚至是lOnm-lOOnm，體現了良好的穩定性。應用本發明他克莫司或其藥用鹽的膠束或其凍幹製劑可用於器官移植的抗排斥反應的藥物中的應用。特別適用於肝移植、腎移植、肺移植、角膜移植等臨床手術後，用來降低排斥反應，促進細胞再生和修復。本發明膠束或其凍幹製劑製備方法中，將他克莫司或其藥用鹽製成呈透明狀的凝膠屬於固體分散技術，通過固體分散技術和凍幹技術結合製備的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束，具有製備工藝簡單易操作的優點，而且製得的製劑無任何有機溶媒，可長期保存， 穩定性好。


圖1為他克莫司(Π(506)膠束、凍幹製劑、凍幹製劑復溶後的性狀照片。圖2為他克莫司(Π(506)膠束粒徑。圖3為他克莫司(Π(506)膠束透射電鏡照片。圖4為他克莫司(Π(506)膠束凍幹製劑的DSC圖譜。圖5為他克莫司(Π(506)膠束在PBS緩衝液中的緩釋行為。其中，圖1中A瓶為水，B瓶為空白材料，C瓶為他克莫司膠束，D瓶為他克莫司膠束凍乾粉，E瓶為復溶後得他克莫司膠束。
具體實施例方式以下是本發明中所用材料的中文名及對應簡稱的說明1、二嵌段聚合物聚乙二醇-聚(ε -己內酯)，簡稱MePEG-PCL，或MPEG-PCL。2、三嵌段聚合物聚(ε -己內酯)_聚乙二醇-聚(ε -己內酯)，簡稱 PCL-PEG-PCL，或 PCEC。3、甲氧基聚乙二醇，簡稱MePEG，或MPEG。4、聚(ε -己內酯)，簡稱PCL。5、聚乙二醇，簡稱PEG。6、他克莫司，簡稱Π(506。本發明負載他克莫司或其藥用鹽的膠束是由生物可降解的高分子材料與他克莫司或其藥用鹽製成，其重量配比為他克莫司或其藥用鹽1份、可降解的高分子材料1. 5 99份；所述的可降解的高分子材料為二嵌段聚合物甲氧基聚乙二醇-聚己內酯、三嵌段聚合物聚己內酯-聚乙二醇-聚己內酯；所述的二嵌段聚合物中甲氧基聚乙二醇與聚己內酯的分子量比為0. 5 2 ；優選分子量比為1 ；所述的三嵌段聚合物中聚己內酯與聚乙二醇的分子量比為0. 5 3 ；優選分子量比為0. 85。進一步優選，重量配比為他克莫司或其藥用鹽1份、可降解的高分子材料1. 5 90份；更進一步優選，重量配比為他克莫司或其藥用鹽1份、可降解的高分子材料2 49份。當聚己內酯優選聚(ε -己內酯)時(1) 二嵌段聚合物為甲氧基聚乙二醇-聚(ε-己內酯)，MPEGx_PCLy，其中χ和y 分別表示MPEG和PCL的分子量，MPEG與PCL分子量比則為χ y，其分子量比為0. 5 2 ； 優選分子量比為1。(2)三嵌段聚合物為聚(ε -己內酯)_聚乙二醇-聚(ε -己內酯)， PCLm-PEGn-PCLm，其中m和η分別表示PCL和PEG的分子量，PCL與PEG的分子量比則為 2m n，其分子量比為0.5 3;優選分子量比為0.85。應用上述生物可降解的高分子材料時，原料藥優選採用他克莫司(Π(506)。通過以下研究過程證明本發明負載他克莫司或其藥用鹽的膠束、凍幹製劑及製備方法的有益效果。
本發明的發明人應用的生物可降解高分子材料是本發明膠束的關鍵點。發明人曾嘗試應用上述二嵌段聚合物和三嵌段聚合物用於喜樹鹼、兩性黴素B、輔酶QlO等疏水性藥物製備膠束，考察了多種分子量比的嵌段及不同的製備方法後發現均無法將這些藥物包裹，形成膠束。但是，發明人意外的發現上述二嵌段聚合物和三嵌段聚合物可以將同屬疏水性藥物的他克莫司包裹起來形成膠束，具有很好的匹配性。故進一步對生物可降解高分子材料的相關參數、製備方法進行考察，以期保證膠束的載藥量、包封率和穩定性，使得該製劑有可能應用於臨床。一、二嵌段聚合物及其製備方法的篩選實驗1、製備方法經過初步考察二嵌段聚合物MPEG-PCL中MPEG和PCL的分子量比後，選定包封率、 載藥量、粒徑、穩定性等參數相對較好的MPE(i2_-PCL2·考察不同製備方法對他克莫司或其藥用鹽的影響，所用原料藥為他克莫司，投料量相同。製備膠束的方法為透析法、固體分散法、直接凍幹法。表1為不同製備方法製成的膠束及固體分散法凍幹製劑的載藥參數。表1以MPEG_-PCL_為載體採用不同製備方法的載藥情況
方法載藥量(％)包封率(％)收率(％)粒徑(nm)分散係數透析1.1±0.46.1±1.26.2±1.041.9±2.11.28±0.1固體分散8.5±1.199.4±1.299.2±1.227.3±0.60.18±0.3凍幹8.1±0.299.8±1.399.4±0.935.2±1.10.21±0.4 備註直接凍幹法是採用將他克莫司、載體材料溶於叔丁醇中，直接冷凍，而後凍幹升華，達到藥物呈無定形狀態分散到載體材料中的目的。使用時加水，在加熱條件下自組裝成納米膠束。通過表1可見固體分散法和直接凍幹法的載藥量、包封率、收率等參數明顯優於透析法，但是直接凍幹法需使用有毒性的叔丁醇，因此不作為優先選擇方法。故本發明優選固體分散法為膠束的製備方法。2、二嵌段聚合物(1)採用固體分散法考察不同嵌段(各嵌段分子量不同)的載藥情況，結果見表 2。表2不同嵌段的MPEG-PCL的載藥情況
權利要求
1.負載他克莫司或其藥用鹽的膠束，其特徵在於它是由生物可降解的高分子材料與他克莫司或其藥用鹽製成，其重量配比為他克莫司或其藥用鹽1份、可降解的高分子材料 1. 5 99份；重量配比優選他克莫司或其藥用鹽1份、可降解的高分子材料1. 5 90份；重量配比進一步優選他克莫司或其藥用鹽1份、可降解的高分子材料2 49份；其中，所述的可降解的高分子材料為二嵌段聚合物甲氧基聚乙二醇-聚己內酯、三嵌段聚合物聚己內酯-聚乙二醇-聚己內酯；所述的二嵌段聚合物中甲氧基聚乙二醇與聚己內酯的分子量比為0. 5 2 ；分子量比優選1;所述的三嵌段聚合物中聚己內酯與聚乙二醇的分子量比為0. 5 3 ；分子量比優選 0. 85。
2.根據權利要求1所述的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束，其特徵在於所述的二嵌段聚合物甲氧基聚乙二醇-聚己內酯為甲氧基聚乙二醇-聚(ε -己內酯)。
3.根據權利要求2所述的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束，其特徵在於所述的二嵌段聚合物甲氧基聚乙二醇-聚(ε-己內酯)中甲氧基聚乙二醇與聚(ε-己內酯)分子量比為0.5 2;分子量比優選1。
4.根據權利要求1所述的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束，其特徵在於所述的三嵌段聚合物聚己內酯-聚乙二醇-聚己內酯為聚(ε -己內酯)-聚乙二醇-聚(ε -己內酯)。
5.根據權利要求4所述的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束，其特徵在於所述的三嵌段聚合物中聚(ε-己內酯)_聚乙二醇-聚(ε-己內酯)中聚(ε-己內酯)與聚乙二醇的分子量比為0. 5 3 ；分子量比優選0. 85。
6.根據權利要求1-5任一項所述的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束，其特徵在於採用他克莫司為原料藥。
7.根據權利要求1-5任一項所述的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束，其特徵在於膠束粒徑為10nm-200nm ；膠束粒徑優選10nm-100nm。
8.負載他克莫司或其藥用鹽的膠束凍幹製劑，其特徵在於將權利要求1-7任一項所述的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束，採用常用的冷凍乾燥方法製備凍幹製劑。
9.權利要求1所述的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束的製備方法，其特徵在於它是由下述方法製備A、將生物可降解高分子材料和藥物溶於有機溶劑，得到澄清溶液1；B、除去澄清溶液1的有機溶劑，得到凝膠2；C、將凝膠2注入水中，使其呈澄清透明狀，過濾，即得膠束3；步驟C所述水優選注射用水。
10.根據權利要求9所述的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束的製備方法，其特徵在於 所述的有機溶劑為乙醇、叔丁醇、乙腈、二氯甲烷、丙酮、三氟乙醇或六氟異丙醇中的一種或幾種的混合溶劑；有機溶劑優選乙醇、叔丁醇。
11.負載他克莫司或其藥用鹽的膠束凍幹製劑的製備方法，其特徵在於採用權利要求9或10所述的製備方法製成膠束後，按照藥劑學常用的冷凍乾燥處理方法製成凍幹製劑。
12.權利要求1-7任一項所述的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束或權利要求8所述的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束凍幹製劑在製備用於器官移植的抗排斥反應的藥物中的應用。
13.權利要求1-7任一項所述的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束或權利要求8所述的負載他克莫司或其藥用鹽的膠束凍幹製劑在製備用於肝移植、腎移植、肺移植、角膜移植等臨床手術後，用來降低排斥反應，促進細胞再生和修復的藥物中的應用。
全文摘要
本發明屬於藥物劑型和納米藥物製備技術領域，特別是涉及一種負載他克莫司或其藥用鹽的膠束、凍幹製劑及其製備方法和應用。為了使得本發明膠束能應用於臨床，需要保證製劑的載藥量、包封率和穩定性。該膠束是由生物可降解的高分子材料與他克莫司或其藥用鹽製成，其重量配比為他克莫司或其藥用鹽1份、可降解的高分子材料1.5～99份；所述的可降解的高分子材料為二嵌段聚合物甲氧基聚乙二醇-聚己內酯(MPEG與PCL分子量比為0.5～2)、三嵌段聚合物聚己內酯-聚乙二醇-聚己內酯(PCL與PEG分子量比為0.5～3)。應用本發明他克莫司或其藥用鹽的膠束或其凍幹製劑可用於肝移植、腎移植、肺移植、角膜移植等器官移植的抗排斥反應的藥物中的應用。
文檔編號A61K47/34GK102198082SQ201110139610
公開日2011年9月28日 申請日期2011年5月27日 優先權日2010年5月27日
發明者王成, 趙霞, 錢志勇, 魏於全 申請人:四川大學