沙棘黃酮配基的高純度提取方法
2023-06-07 21:29:11 1
專利名稱：沙棘黃酮配基的高純度提取方法
技術領域：
本發明屬於黃酮配基的高純度製備方法，特別涉及一種以沙棘葉為原料，從沙棘葉中提取黃酮配基的方法。
背景技術：
黃酮類化合物(Flavonoids)主要為植物化學成份，廣泛存在於各類植物的器官中。沙棘中的黃酮是重要的生物活性物質，尤其是沙棘葉中的槲皮素、山奈素和異鼠李素組成的黃酮配基具有突出的醫學特性，包括抗氧化活性，對酶的抑制，抗心腦血管疾病，消炎活性等，對人類健康極為重要，但此類黃酮化合物在沙棘葉中的濃度較低，通常小於1％，因此必須加以富集，才能成為有利用價值的產品。據了解，人們對沙棘已進行了很多開發，例如沙棘飲料、沙棘化妝品、沙棘啤酒、沙棘茶、沙棘醬油、沙棘醋、沙棘豆、沙棘麥飯石、沙棘健美減肥帶、沙棘精華素、沙棘黃酮口服液類等，也有通過大孔樹脂從沙棘葉中提取沙棘黃酮及從果肉、果皮和葉子中提取沙棘油和沙棘黃酮的聯合工藝報導和專利，但有關以沙棘葉為原料，提取高純度沙棘黃酮配基的方法尚未見有文獻公開。
發明內容
本發明的目在於克服現有技術的不足，提供一種從沙棘葉中提取沙棘黃酮配基的方法，此種方法不僅可獲得高純度沙棘黃酮配基，而且工藝簡單、成本低，易於工業化生產。
本發明所提取的沙棘黃酮配基是一種槲皮素、山奈素和異鼠李素組成的混合物，工藝步驟依次為1、浸提浸提是將粉碎的沙棘葉放入浸提劑中浸泡以獲取含有黃酮配基混合物的浸提液。浸提劑為甲醇或乙醇或甲醇-水混合液或乙醇-水混合液，浸提時，浸提劑與沙棘葉的重量比至少為3(浸提劑∶沙棘葉≥3)，浸提溫度為30～100℃，單次浸提時間為10～180分鐘，浸提次數可以為一次或多次，其選擇原則是既要使沙棘葉中的黃酮配基混合物儘可能多的被浸提，又要考慮成本，因此，浸提次數最好選擇多次，但具體選擇幾次，只要使沙棘葉中所含黃酮配基混合物的浸提率達到85～90％左右即可。浸提溫度與單次浸提時間的關係是浸提溫度低，則浸提時間長，反之亦然。
2、浸提液的混合與濃縮將各次浸提所收集的浸提液混合後進行濃縮，得濃縮浸提液並回收浸提劑。濃縮既可以在真空狀態進行，也可以在常壓下進行。
3、萃取萃取在室溫(室內自然溫度)下進行，萃取劑為環己烷或石油醚，萃取至萃取液無色為止，萃取後分離萃取劑和浸提液，並將浸提液濃縮至漿狀。萃取方式可採用動態萃取或靜態萃取。
4、水解將濃縮至漿狀的浸提液進行水解，水解液為1～15％的鹽酸或硫酸或醋酸或磷酸水溶液，水解溫度為60～100℃，水解時間以組成黃酮配基的槲皮素、山奈素和異鼠李素的總含量至少達到95％為限(一般為5～10小時)。
5、除雜與乾燥將水解反應後的含黃酮配基的混合液洗滌、過濾除去雜質並乾燥，即可獲得高純度的沙棘黃酮配基。
為了更好的實現發明目的，提取方法中還採取了以下技術措施1、沙棘葉最好粉碎成40～60目的粉末。
2、浸提時，若選用甲醇-水混合液或乙醇-水混合液為浸提劑，混合液中，甲醇或乙醇的含量為10～90％。
3、萃取時，濃縮浸提液與萃取劑的體積比選取1∶1～14(濃縮浸提液∶萃取劑＝1∶1-14)。
4、水解所得混合液的除雜洗滌分兩步進行，第一步用甲醇或乙醇洗滌，混合液與甲醇或乙醇的體積比為1∶5～15，洗滌後進行濃縮(濃縮既可以在真空狀態進行，也可以在常壓下進行)，回收甲醇或乙醇；第二步用水洗滌後過濾。
本發明具有以下有益效果1、本發明所述的方法提取的沙棘黃酮配基經高效液相色譜(HPLC)測定，其組份槲皮素、山奈素和異鼠李素三者之和的含量在95％以上。
2、工藝簡單、成本低，易於工業化生產。
3、各工藝步驟所用的化學溶劑均能回收，無大氣汙染和水汙染。
圖1是本發明實施例1所提取的沙棘黃酮配基的高效液相色譜(HPLC)圖；
圖2是本發明實施例2所提取的沙棘黃酮配基的高效液相色譜(HPLC)圖；圖3是本發明實施例3所提取的沙棘黃酮配基的高效液相色譜(HPLC)圖；圖4是本發明實施例4所提取的沙棘黃酮配基的高效液相色譜(HPLC)圖。
具體實施例方式
實施例1本實施例以40～50目的沙棘葉粉末為原料提取沙棘黃酮配基，工藝步驟依次為(1)浸提稱取1公斤40～50目的沙棘葉粉末，用6公斤甲醇浸提180分鐘，浸提溫度為30℃，抽出浸提液，再分別用4公斤、3公斤、3公斤甲醇浸提第二、第三和第四次，浸提時間均為120分鐘，浸提溫度不變。
(2)浸提液的混合與濃縮將四次浸提所得浸提液混合，然後進行減壓蒸餾，回收浸提劑，溫度控制在45℃，壓力不超過-0.08MPa，將浸提液濃縮至原體積的30％。
(3)萃取萃取在室溫(約20℃)下進行，採用靜態萃取，萃取劑為環己烷，環己烷與濃縮浸提液的體積比為14(環己烷∶濃縮浸提液＝14)，萃取至萃取液無色，萃取後回收環己烷，將浸提液濃縮至漿狀。
(4)水解水解液為5％的硫酸水溶液，水解溫度80℃，將濃縮至漿狀的浸提液水解6小時。
(5)除雜與乾燥首先用甲醇洗滌，混合液與甲醇的體積比為1∶15，過濾，蒸餾回收甲醇；然後再將濾餅用水洗滌多次後過濾。所得濾餅在-27℃乾燥48小時即為沙棘黃酮配基，重量8.56克，真空包裝。送高效液相色譜(HPLC)和紫外(UV)檢測，沙棘黃酮配基純度為95.64％(見圖1)。
實施例2本實施例以50～60目的沙棘葉粉末為原料提取沙棘黃酮配基，工藝步驟依次為(1)浸提稱取1公斤50～60目的沙棘葉粉末，用15公斤30％的乙醇-水混合液浸提40分鐘，浸提溫度為90℃，抽出浸提液。第二、第三次的浸提時間分別為30分鐘，第四、第五次的浸提時間分別為20分鐘，第二～五次的浸提溫度均為90℃且浸提劑與第一次相同。
(2)浸提液的混合與濃縮將五次浸提所得浸提液混合，然後進行減壓蒸餾，回收浸提劑，溫度控制在45℃，壓力不超過-0.08MPa，將浸提液濃縮至原體積的30％。
(3)萃取萃取在室溫(約30℃)下進行，採用靜態萃取，萃取劑為石油醚，石油醚與濃縮浸提液的體積比為12(石油醚∶濃縮浸提液＝12)，萃取至萃取液無色，萃取後回收石油醚，將浸提液濃縮至漿狀。
(4)水解水解液為14.5％的醋酸水溶液，水解溫度95℃，將濃縮至漿狀的浸提液水解8小時。
(5)除雜與乾燥首先用乙醇洗滌，混合液與乙醇的體積比為1∶10，過濾，蒸餾回收乙醇；然後再將濾餅用水洗滌多次後過濾。所得濾餅在-27℃乾燥48小時即為沙棘黃酮配基，重量9.2克，真空包裝。送高效液相色譜(HPLC)和紫外(UV)檢測，沙棘黃酮配基純度為96.75％(見圖2)。
實施例3本實施例以40～60目的沙棘葉粉末為原料提取沙棘黃酮配基，工藝步驟依次為(1)浸提稱取1公斤40～60目的沙棘葉粉末，用12公斤50％的甲醇-水混合液浸提100分鐘，浸提溫度為50℃，抽出浸提液。第二次至第四次分別用10公斤、8公斤、8公斤的50％的甲醇-水混合液，每次浸提80分鐘，浸提溫度為50℃。
(2)浸提液的混合與濃縮將四次浸提所得浸提液混合，然後進行減壓蒸餾，回收浸提劑，溫度控制在35℃，壓力不超過-0.08MPa，將浸提液濃縮至原體積的30％。
(3)萃取萃取在室溫(約10℃)下進行，採用動態萃取，萃取劑為石油醚，石油醚與濃縮浸提液的體積比為6(石油醚∶濃縮浸提液＝6)，萃取至萃取液無色，萃取後回收石油醚，將浸提液濃縮至漿狀。
(4)水解水解液為10.5％的磷酸水溶液，水解溫度90℃，將濃縮至漿狀的浸提液水解9.5小時。
(5)除雜與乾燥首先用甲醇洗滌，混合液與甲醇的體積比為1∶5，過濾，蒸餾回收甲醇；然後再將濾餅用水洗滌多次後過濾。所得濾餅在-27℃乾燥48小時即為沙棘黃酮配基，重量8.05克，真空包裝。送高效液相色譜(HPLC)和紫外(UV)檢測，沙棘黃酮配基純度為96.60％(見圖3)。
實施例4本實施例以40～60目的沙棘葉粉末為原料提取沙棘黃酮配基，工藝步驟依次為(1)浸提稱取1公斤40～60目的沙棘葉粉末，用10公斤乙醇浸提100分鐘，浸提溫度為70℃，抽出浸提液。第二次至第四次分別用8公斤、6公斤、6公斤的乙醇，每次浸提60分鐘，浸提溫度為70℃。
(2)浸提液的混合與濃縮將四次浸提所得浸提液混合，然後進行減壓蒸餾，回收浸提劑，溫度控制在58℃，壓力不超過-0.08MPa，將浸提液濃縮至原體積的30％。
(3)萃取萃取在室溫(約18℃)下進行，採用動態萃取，萃取劑為環己烷，環己烷與濃縮浸提液的體積比為2(環己烷∶濃縮浸提液＝2)，萃取至萃取液無色，萃取後回收環己烷，將浸提液濃縮至漿狀。
(4)水解水解液為8％的鹽酸水溶液，水解溫度60℃，將濃縮至漿狀的浸提液水解9小時。
(5)除雜與乾燥首先用乙醇洗滌，混合液與乙醇的體積比為1∶12，過濾，蒸餾回收乙醇；然後再將濾餅用水洗滌多次後過濾。所得濾餅在-27℃乾燥48小時即為沙棘黃酮配基，重量8.86克，真空包裝。送高效液相色譜(HPLC)和紫外(UV)檢測，沙棘黃酮配基純度為100％(見圖4)。
權利要求
1.一種沙棘黃酮配基的高純度提取方法，其特徵在於以沙棘葉為原料，工藝步驟依次為(1)浸提浸提是將粉碎的沙棘葉放入浸提劑中浸泡以獲取含有黃酮配基的浸提液，浸提劑為甲醇或乙醇或甲醇-水混合液或乙醇-水混合液，浸提劑與沙棘葉的重量比至少為3，浸提溫度為30～100℃，單次浸提時間為10～180分鐘，浸提次數的選取以沙棘葉中所含黃酮配基混合物的浸提率達到85～90％為限，(2)浸提液的混合與濃縮將各次浸提所收集的浸提液混合後進行濃縮，得濃縮浸提液並回收浸提劑，(3)萃取萃取在室溫下進行，萃取劑為環己烷或石油醚，萃取至萃取液無色為止，萃取後分離萃取劑和浸提液，並將浸提液濃縮至漿狀，(4)水解將濃縮至漿狀的浸提液進行水解，水解液為1～15％的鹽酸或硫酸或醋酸或磷酸水溶液，水解溫度為60～100℃，水解時間以組成黃酮配基的槲皮素、山奈素和異鼠李素的總含量至少達到95％為限，(5)除雜與乾燥將水解反應後的含黃酮配基的混合液洗滌、過濾除去雜質並乾燥，即可獲得高純度的沙棘黃酮配基。
2.根據權利要求1所述的沙棘黃酮配基的高純度提取方法，其特徵在於萃取時，濃縮浸提液與萃取劑的體積比為1∶1～14，萃取方式為動態萃取或靜態萃取。
3.根據權利要求1或2所述的沙棘黃酮配基的高純度提取方法，其特徵在於水解所得混合液的除雜洗滌分兩步進行，第一步用甲醇或乙醇洗滌，混合液與甲醇或乙醇的體積比為1∶5～15，洗滌後進行濃縮，回收甲醇或乙醇，第二步用水洗滌後過濾。
4.根據權利要求1或2所述的沙棘黃酮配基的高純度提取方法，其特徵在於浸提劑為甲醇-水混合液或乙醇-水混合液時，混合液中，甲醇或乙醇的含量為10～90％。
5.根據權利要求3所述的沙棘黃酮配基的高純度提取方法，其特徵在於浸提劑為甲醇-水混合液或乙醇-水混合液時，混合液中，甲醇或乙醇的含量為10～90％。
6.根據權利要求1或2所述的沙棘黃酮配基的高純度提取方法，其特徵在於沙棘葉呈40～60目的粉末狀。
7.根據權利要求3所述的沙棘黃酮配基的高純度提取方法，其特徵在於沙棘葉為40～60目的粉末狀。
8.根據權利要求4所述的沙棘黃酮配基的高純度提取方法，其特徵在於沙棘葉為40～60目的粉末狀。
9.根據權利要求5所述的沙棘黃酮配基的高純度提取方法，其特徵在於沙棘葉為40～60目的粉末狀。
全文摘要
一種沙棘黃酮配基的高純度提取方法，以沙棘葉為原料，工藝步驟依次為浸提、浸提液的混合與濃縮、萃取、水解、除雜與乾燥。浸提是將粉碎的沙棘葉放入浸提劑中浸泡以獲取含有黃酮配基混合物的浸提液，浸提劑為甲醇或乙醇或甲醇－水混合液或乙醇－水混合液。萃取在室溫下進行，萃取劑為環己烷或石油醚，萃取後分離萃取劑和浸提液，並將浸提液濃縮至漿狀。水解液為1～15％的鹽酸或硫酸或醋酸或磷酸水溶液，水解溫度為60～100℃，將水解反應後的含黃酮配基的混合液洗滌、過濾除去雜質並乾燥，即可獲得槲皮素、山奈素和異鼠李素三者之和的含量在95％以上沙棘黃酮配基。
文檔編號C07D311/30GK1546483SQ20031011116
公開日2004年11月17日 申請日期2003年12月11日 優先權日2003年12月11日
發明者邰源臨, 李瑞霞, 杜宗良, 李海, 李永海, 溫中平, 吳大誠 申請人:水利部沙棘開發管理中心, 四川成都川大天成科技開發有限責任公司