一種川貝母種子的處理方法

2023-05-29 12:48:31

專利名稱：一種川貝母種子的處理方法
技術領域：
本發明涉及一種川貝母種子的處理方法。
背景技術：
川貝母Fritillaria cirrhosa D. Don屬多年生草本植物，生長在海拔 3500m-4500m處，鱗莖為名貴的川產道地藥材。現代研究表明川貝母為最常用、最有效的止 咳化痰藥，常用於治療肺熱燥咳、乾咳少痰、陰虛勞嗽、咯痰帶血，其主要有效成分為貝母生 物鹼和留體皂甙類。川貝母屬於高原瀕危藥用植物，商品主要來源於野生植物資源，由於長 期濫採濫挖，再加上生態環境惡化，致使川貝母野生植物資源銳減，正面臨枯竭的境地。當前川貝母主要靠種子進行有性繁殖，需要求在每年秋季的凍土期到來之前完成 種子的播種，由於川貝母種子存在形態和生理後熟的特性，導致人工種植難度大、繁殖係數 低、出苗率不高等問題。因此如何提高川貝母種子的成熟度，增加種子的萌發率，是當前川 貝母栽種中要亟待解決的問題。專利申請號為20061002086. 4的「一種川貝母的春播種子 的處理方法」雖解決了種子的後熟問題，使當年不能及時播種的種子也能在次年春季萌發， 並提高了種子的萌發率，但該方法的處理時間較長，種子需在前一年埋下，到次年春季才取 出播種，時間成本較高，另外，由於種子的基因組織並沒有改變，因此所生長的植株適應外 界環境的能力並沒有提高，存在著部分植株在生長中死亡的可能，從而影響鱗莖的最後產
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發明內容
本發明的目的在於提供一種川貝母種子的處理方法，該方法既能提高川貝母有效 成分的含量，又能減少處理時間。為達到上述目的，本發明採用的解決方法包括下列步驟(1)將川貝母種子進行水選，去除秕種和雜質，然後用濃度為IOmg. Γ1 90mg. Γ1 的赤黴素溶液浸泡20 40h，再將浸泡後的種子於8 12°C沙藏處理30 90d ；(2)將沙藏後成熟的川貝母種子洗淨，用濃度為0. 01% 0. 20%。的秋水仙素溶 液浸泡24h 72h ；(3)將上述浸泡後的種子用蒸餾水洗淨，用於播種。為了解種子的萌發情況，可隨機取部分(1)步驟處理後的種子放在育苗床上，在 20 25°C催芽，培養40天後統計種子的萌發率。為了解種子的多倍體誘導情況，可隨機取部分(3)步驟浸泡後的種子放在育苗床 上，在20 25°C催芽，培養40天後統計種子的誘導率，觀察處理組和對照組種子萌發生長 小苗的情況，並取小苗根尖細胞進行染色體數目檢測。本發明採用赤黴素並結合低溫沙藏層積處理方法，使川貝母種子能在較短時間內 完成生理和形態上的後熟；再採用秋水仙素溶液對已完成後熟作用的川貝母種子進行多倍 體誘導處理，培育出有效成分含量高的川貝母多倍體新品種。該方法中赤黴素浸泡及低溫沙藏層積處理的時間較現有專利技術的時間短；且採用秋水仙素溶液對已完成後熟作用的 川貝母種子進行多倍體誘導處理，這些雖然在一定程度上會影響種子的萌發率，但經誘導 培育出的多倍體種子所栽培出的植株鱗莖不僅體積明顯增大，而且有效成分的含量也大大 提高，完全彌補了萌發率稍低所造成的鱗莖獲取量的減少。另外，多倍體植株由於基因活性 及酶的差異性增強，從而適應外界環境的能力增強，表現出良好的抗旱、抗寒及抗病蟲害等 優勢。綜上所述，本發明具有如下效果(1)處理時間短，降低了時間成本；(2)提高了藥用 有效成分的獲取量，從而能較好地滿足藥材生產的要求；(3)出苗率高，齊苗時間短，植株 適應外界能力強，存活率高。下面結合實施例對本發明進一步詳細說明。
具體實施例方式(1)獲得成熟的川貝母種子將採集於四川康定折多山野生撫育基地的川貝母種子全部用水選，去除秕種和雜 質，然後採用30mg. Γ1赤黴素浸種32h，處理完畢後用蒸餾水洗淨，然後將其置於8 12°C 沙藏層積處理70d，即可得到種胚成熟的川貝母種子；(2)獲取川貝母種子的萌發情況取出沙藏層積處理70d的川貝母種子，將其放在育苗床上催芽，溫度控制在為 20 25°C，種子萌發標準為種皮開裂露白或長根，培養40d統計種子的萌發率為67. 0% ；(3)川貝母種子多倍體誘導將經過30mg. Γ1赤黴素預處理32h且沙藏層積70d的種胚成熟川貝母種子洗淨， 然後浸泡在濃度為0. 的秋水仙素溶液處理48h。取浸泡後的部分種子用蒸餾水洗淨，然 後置於育苗床上催芽，溫度控制在20 25°C，統計其多倍體誘導率為85. 7% ；(4)染色體數目檢測取處理組和對照組川貝母幼苗的根尖於0. 20%的秋水仙素溶液中預處理2. 5h左 右，水洗後用甲醇-冰醋酸(3 1)固定液固定4h，再用混合酶(纖維素酶和果膠酶各佔 2. 5% )在25°C恆溫箱內處理3h，倒去酶液，用蒸餾水洗3次，每次2min，去除蒸餾水後製備 細胞懸液用懸滴法製片，乾燥後用Giemsa染色觀察。結果顯示對照組染色體數2η = 2x = 24為二倍體，與文獻記載相符，處理組細胞染色體數2η = 4x = 48為四倍體。 (5)觀察比較多倍體幼苗和二倍體幼苗表皮細胞 分別撕取對照組與處理組幼葉表皮進行臨時裝片的製作，在顯微鏡下觀察拍照。 經測量處理後的幼葉表皮細胞氣孔是未經處理的幼葉表皮細胞氣孔大小的1. 7倍，但處理 組幼葉表皮細胞單位面積內的氣孔數較未經處理的對照組明顯減少。
權利要求
1. 一種川貝母種子的處理方法，其特徵在於包括下列步驟(1)將川貝母種子進行水選，去除秕種和雜質，然後用濃度為iomg.L-1 90mg. Γ1的赤 黴素溶液浸泡20 40h，再將浸泡後的種子於8 12°C沙藏處理30 90d ；(2)將沙藏後成熟的川貝母種子洗淨，用濃度為0.01% 0.20%。的秋水仙素溶液浸 泡 24h 72h ；(3)將上述浸泡後的種子用蒸餾水洗淨，用於播種。
全文摘要
本發明公開了一種川貝母種子的處理方法，該方法採用赤黴素並結合低溫沙藏層積處理方法，使川貝母種子能在較短時間內完成生理和形態上的後熟；再採用秋水仙素溶液對已完成後熟作用的川貝母種子進行多倍體誘導處理，培育出有效成分含量高的川貝母多倍體新品種。本發明具有處理時間短、有效成分含量高、植株適應外界能力強等優點。
文檔編號A01H1/08GK101999265SQ200910164338
公開日2011年4月6日 申請日期2009年9月3日 優先權日2009年9月3日
發明者代勇, 何宗晟, 孫雁霞, 徐世軍, 王曉蓉, 王躍華, 胡勝玲, 薛永新 申請人:薛永新