一種香菇多糖分離純化的方法
2023-06-10 21:04:46
專利名稱:一種香菇多糖分離純化的方法
技術領域:
本發明涉及一種香菇多糖分離純化的方法,可用做消化系統等惡性腫瘤的治 療,屬於香菇多糖分離純化技術領域。
背景技術:
香菇多糖是從人工培植的真菌類香菇子實體中提取、分離、純化所得到的單 一多糖。作為抗腫瘤藥物有其特殊的優點能調節免疫功能,而且使用劑量低、 療效較好、毒副作用小等。主要做消化系統等惡性腫瘤的治療。常常與化療藥物 配合使用,免除化療所產生的不良反應。特別適合不能手術或復發的胃癌病人, 提高患者的生活質量,延長患者的生命。
香菇多糖的提取分離、純化非常複雜,而且效率低、成本高、不易批i生產。 原有方法是香菇多糖粗糖溶液經圓柱型層析柱中的DEAE—纖維素吸附、洗脫分 離後,冷凍乾燥所得到的香菇多糖單一組份。慮有方法所遇困難是由於香燕多
糖不易溶解,溶液的粘度大,而傳統的層析柱由柱接口1和圓柱體2連接而成, 如圖1所示,在>0.25%溶解含量時,通過量只能達到500mg/cm2,過之則易堵塞, 因粗品溶液中,如溶解含量大時,香菇多糖的粘稠溶液逐步聚積在DEAE—纖維 素臨界表面,無法流通,形成堵塞達不到吸附分離的效果。
發明內容
本發明的目的是提供一種在層析柱中不易堵塞,可批量生產的香恭多糖分離 純化的方法。
為實現以上目的,本發明的技術方案是提供一種香菇多糖分離純化的方法,
其特徵在於,香菇多糖粗品經預處理後,通過經改變異型柱中DEAE—纖維素吸
附、洗漆、各種濃度的NaOH溶液洗脫、中和、透析、沉澱、凍幹而得到單一香
菇多糖,其方法為
步驟1.香菇多糖粗品經預處理,
將香菇多糖粗糖按2.5。/。以下溶解含1:的範圍加熱至50X: —99",溶解
在水中後冷卻,在常溫下扎透析袋,用自來水透析》60H後,透析液濃縮 至原體積的1/6—1/9範圍內,在常溫攪拌的條件下按l: l.l加入藥用乙 醇沉澱,沉澱物分離出後,經2倍沉澱物體積的藥用乙醇洗錄,再次分離 出沉澱物,在《60t條件下真空乾燥,得到經預處理的香菇多糖; 步驟2.香菇粗糖按2.5%以下的比例範圍內,加熱至50'C—99'C,全部溶解在水 中,溶液自然冷卻至常溫,裝在異型柱中,通過DEAE—纖維素吸附、 洗滌、濃度為0.5mol/L以下的NaOH溶液洗脫、中和、透析、濃縮、凍 幹方法,得到香菇多糖單一組份。
所述的異型層析柱由柱接口連接上大下小漏鬥體和圓柱體組成,其漏鬥 體最大直徑為圓柱體直徑的1一10倍。
本發明將原層析柱從柱接口以下分成二部分,上半部分為壇大通過面積, 將原來的直柱形改成上大下小漏鬥形,下半部分保持原有幾何形狀,使得效果不 變,採取逐步過渡的形式上下結合,在DEAE—纖維素與香菇多糖溶液臨界接觸 面增加了 1 10倍以上接觸面積,另外再配以香菇多糖的預處理,使之能適應該 異型柱條件的吸附,改香燕多糖分離純化變為香菇多糖動態高效分離純化,產品 在經洗漆、洗脫、透析、沉澱、凍乾等一系列處理後,即得到單一香菇多糖。
本發明的優點是適應大批量工業化生產,在方法簡便、質量保證的前提下能 獲得高效率、低成本的產品。
圖1為原層析柱結構示意圖;圖2為本發明層析柱結構示意圖。
具體實施例方式
以下結合附圖和實施例對本發明作進一步說明。
實施例
如圖2所示,為本發明層析柱結構示意圖,所述的異型層析柱由柱接口 1 連接上大下漏鬥體2和圓柱體2組成,其漏鬥體最大直徑為圓柱體直徑的3倍。 一種香菇多糖分離純化的方法為 步驟1.香菇多糖粗品經預處理
將香菇多糖粗糖按2%溶解含量加熱至50X:—99"C,溶解在水中後冷卻,
在常溫下扎透析袋,用自來水透析^60H後,透析液濃縮至原體積的1/6—1/9 範圍內,在常溫攪拌的條件下按l: l.l加入藥用乙醇沉澱,沉澱物分離出後, 經2倍沉澱物體積的藥用乙醇洗滌,再次分離出沉澱物,在《60t條件下真空幹 燥,得到經預處理的香菇多糖;
步驟2.香菇粗糖按2%的比例範圍內,加熱至50'C—99'C,全部溶解在水中,溶 液自然冷卻至常溫,裝在異型柱中,通過DEAE—纖維素吸附、洗滌、濃 度為0.5mol/L以下的NaOH溶液洗脫、中和、透析、濃縮、凍幹方法, 得到香菇多糖單一組份。 步驟2中的濃度為0.5mol/L以下的NaOH溶液洗脫、中和、透析、濃縮、
凍幹方法為常規提取方法。
權利要求
1.一種香菇多糖分離純化的方法,其特徵在於,香菇多糖粗品經預處理後,通過經改變異型柱中DEAE-纖維素吸附、洗滌、各種濃度的NaOH溶液洗脫、中和、透析、沉澱、凍幹而得到單一香菇多糖,其方法為步驟1.香菇多糖粗品經預處理,將香菇多糖粗糖按2.5%以下溶解含量的範圍加熱至50℃-99℃溶解,在水中後冷卻,在常溫下扎透析袋,用自來水透析≥60H後,透析液濃縮至原體積的1/6-1/9範圍內,在常溫攪拌的條件下按1∶1.1加入藥用乙醇沉澱,沉澱物分離出後,經2倍沉澱物體積的藥用乙醇洗滌,再次分離出沉澱物,在≤60℃條件下真空乾燥,得到經預處理的香菇多糖;步驟2.香菇粗糖按2.5%以下的比例範圍內,加熱至50℃-99℃,全部溶解在水中,溶液自然冷卻至常溫,裝在異型柱中,通過DEAE-纖維素吸附、洗滌、濃度為0.5mol/L以下的NaOH溶液洗脫、中和、透析、濃縮、凍幹方法,得到香菇多糖單一組份。
2. 根據權利要求1所述一種香菇多糖分離純化的方法,其特徵在於,所述的異 型層析柱由柱接口 (1)連接上大下漏鬥體(2)和圓柱體(2)組成,其漏鬥 體最大直徑為圓柱體直徑的1一10倍。
全文摘要
本發明涉及一種香菇多糖分離純化的方法,其特徵在於,將傳統層析柱的圓柱型柱改為異型柱後,香菇多糖粗品經預處理,使之能適應該異型柱條件的吸附,改香菇多糖分離純化變為香菇多糖動態高效分離純化,產品在經洗滌、洗脫、透析、沉澱、凍乾等一系列處理後,即得到單一香菇多糖。本發明的有點是適應大批量工業化生產,在方法簡便、質量保證的前提下能獲得高效率、低成本的產品。
文檔編號A23L1/28GK101161112SQ20061011695
公開日2008年4月16日 申請日期2006年10月10日 優先權日2006年10月10日
發明者朱益鋒, 王立峰, 幸 金 申請人:上海慈瑞醫藥科技有限公司