製造醯肼的改良方法

2023-07-01 06:32:01 1

專利名稱：製造醯肼的改良方法
技術領域：
本發明涉及自胼及醯基氯製備醯胼的改良合成方法。所述醯胼產物具有可用於將卡奇黴素連接至單克隆抗體的經保護硫醇基團。
背景技術：
麥羅塔(MYLOTARG) (吉妥單抗奧佐米星(gemtuzumab ozogamicin))也稱為CMA-676或僅CMA，其由通過酸可水解連接體與卡奇黴素結合的抗⑶33的單克隆抗體組成。當經衍生化的卡奇黴素與DNA小溝結合時，其幹擾DNA進展並最終造成癌細胞死亡。所述市售產品以麥羅塔 名稱作為靶向第一抗體的化學治療劑出售，且當前已批准用於治療老年患者的急性髓性白血病(AML)。統稱為卡奇黴素或LL-E33288複合物的抗菌及抗腫瘤劑強效家族成員闡述於美國專利第4，970，198號；第4，939，244號及第5，079，233號中。所述家族成員可用於與作為載體的單克隆抗體形成治療有用的免疫偶聯物。抗體可為抗-CD33抗體(例如，hp67.6)、 抗-CD22 抗體(例如，G544)、抗-路易斯 Y 抗體(anti-Lewis Y antibody)(例如，G193)、 抗-5T4抗體(例如，H8)或抗-CD20抗體(例如，利妥昔單抗(rituximab))。卡奇黴素家族成員優選為N-醯基卡奇黴素，更優選為N-乙醯基γ卡奇黴素。卡奇黴素家族成員含有甲基三硫醚，其可與合適硫醇反應形成二硫醚，同時引入可用於將卡奇黴素衍生物連接至載體的醯胼官能團。所述與卡奇黴素的反應的實例在美國專利第5，053，394號中給出。所述卡奇黴素醯胼衍生物經由形成腙而連接至單克隆抗體。例如，將藥物的醯胼衍生物連接至氧化抗體的一般方法闡述於麥克恩(T. J. McKearn)等人，美國專利第4，671，958號中。美國專利第5，770，701號涉及製備目標形式的LL-E33288複合物的二硫醚化合物的方法。使連接體4- -乙醯基-苯氧基)丁酸與卡奇黴素醯胼衍生物(優選為卡奇黴素N-乙醯基 Y 二甲基醯胼)縮合以提供羧酸腙，所述羧酸腙用N-羥基琥珀醯亞胺進一步處理，得到準備用以與所選生物大分子偶聯的OSu酯(N-琥珀醯亞胺基氧基)。卡奇黴素含有通過造成雙鏈DNA斷裂的-S-S-鍵結還原而激活的烯二炔彈頭。因此，其中醯基含有巰基官能團的經單醯基化的胼可用於將卡奇黴素連接至單克隆抗體。3-甲基-3-巰基丁酸醯胼(也稱為DMH連接體或CL-332258)是用於將卡奇黴素連接至單克隆抗體以製造(例如)吉妥單抗奧佐米星或伊妥單抗奧佐米星(inotuzumab ozogamicin)的優選含巰基N-醯胼。隨後將經衍生化的卡奇黴素激活以與經人源化的單克隆抗體偶聯得到CMA-676。當前，DMH連接體可通過5步反應方法經由中間體對-甲氧基苄基硫醚醯胼5製備。(化學方程式I-V)。 在於USA實施的本製造過程中，對-甲氧基-苄基硫醇與3，3- 二甲基丙烯酸的麥可加成 (Michael addition)是經哌啶輔助(化學方程式I)。化學方程式I
權利要求
1.一種自胼及對-甲氧基苄基硫醚醯氯製備3-甲基-3巰基丁酸醯胼的方法，其包含以下步驟(a)製備包含胼及惰性溶劑的實質上已攪拌均勻的漿液；及(b)向所述漿液中連續添加對-甲氧基苄基硫醚醯氯。
2.如權利要求1所述的方法，其中進一步包括(c)移除對-甲氧基苄基保護基團，以得到3-甲基-3巰基丁酸醯胼。
3.如權利要求1所述的方法，其中所述對-甲氧基苄基硫醚醯氯實質上逐滴添加至所述漿液中。
4.如權利要求1所述的方法，其中所述對-甲氧基苄基硫醚醯氯以溶液的形式添加，所述溶液包括對-甲氧基苄基硫醚醯氯和所述惰性溶劑。
5.如權利要求1所述的方法，其中所述惰性溶劑是二氯甲烷。
6.如權利要求1所述的方法，其中所述3-甲基-3巰基丁酸醯胼含有小於5%的具有以下結構的雙醯胼副產物
7.如權利要求1所述的方法，其中調節所述對-甲氧基苄基硫醚醯氯的連續添加，以使反應溫度保持在_68°C至-75 °C。
8.如權利要求1所述的方法，其中所述胼漿液是在270rpm至400rpm速度下攪拌。
9.一種自胼及對-甲氧基苄基硫醚醯氯製備3-甲基-3巰基丁酸醯胼的方法，其包含以下步驟(a)將包含經攪拌惰性溶劑的反應容器冷卻至期望低溫；(b)以連續方式向所述反應容器中添加胼，由此製備包含所述胼及所述惰性溶劑的實質上已攪拌均勻的漿液；(c)以連續方式向所述漿液中添加對-甲氧基苄基硫醚醯氯，由此形成醯胼鍵結。
10.如權利要求9所述的方法，其中進一步包括(d)移除對-甲氧基苄基保護基團，以得到3-甲基-3巰基丁酸醯胼。
11.如權利要求10所述的方法，其中所述對-甲氧基苄基硫醚醯氯以溶液的形式添加， 所述溶液包括對-甲氧基苄基硫醚醯氯和所述惰性溶劑。
12.如權利要求10所述的方法，其中所述惰性溶劑是二氯甲烷。
13.如權利要求10所述的方法，其中所述3-甲基-3巰基丁酸醯胼含有小於5%的具有以下結構的雙醯胼副產物
14.如權利要求10所述的方法，其中調節所述對-甲氧基苄基硫醚醯氯的連續添加，以使反應溫度保持在_68°C至-75 °C。
15.如權利要求10所述的方法，其中所述胼漿液是在270rpm至400rpm速度下攪拌。
16.權利要求1-15中任一權利要求所述的方法製備得到的3-甲基-3巰基丁酸醯胼。
17.一種製備卡奇黴素家族成員與作為載體的單克隆抗體的免疫偶聯物的方法，其包含按照如權利要求2或10所述的方法製備3-甲基-3巰基丁酸醯胼，並使用所述3-甲基-3 巰基丁酸醯胼來製備所述免疫偶聯物。
18.如權利要求17所述的方法，其中3-甲基-3-巰基丁酸醯胼用作連接體來製造吉妥單抗奧佐米星或伊妥單抗奧佐米星。
19.一種製備卡奇黴素家族成員與作為載體的單克隆抗體的免疫偶聯物的方法，其包含製備醯胼，其包含如下步驟(a)製備包含胼及惰性溶劑的實質上已攪拌均勻的漿液；及(b)持續往所述漿液中添加含有S經保護的巰基官能團； 移除所述S經保護的巰基官能團的保護基團；及將所得的醯胼用作連接體來製造吉妥單抗奧佐米星或伊妥單抗奧佐米星。
全文摘要
本發明揭示自肼及醯基氯製備醯肼的方法，其包含以下步驟(a)在低溫下製備包含肼及惰性溶劑的實質上已攪拌均勻的漿液；及(b)向所述漿液中連續添加醯基氯。所述方法可避免或限制產生不期望的雙醯肼副產物。所述方法可用於製備用以將卡奇黴素(calicheamicin)連接至單克隆抗體的3-甲基-3-巰基丁酸醯肼分子。
文檔編號C07C323/60GK102558001SQ20111043457
公開日2012年7月11日 申請日期2008年5月20日 優先權日2007年5月22日
發明者喬治·A·基亞雷洛, 艾曼·薩赫利 申請人:惠氏有限責任公司