一種穩定的α-澱粉酶檢測試劑盒的製作方法

2023-06-30 07:34:01

一種穩定的α-澱粉酶檢測試劑盒的製作方法
【專利摘要】本發明提供了一種穩定的α-澱粉酶檢測試劑盒，包括試劑R1及試劑R2；所述試劑R1的各組分及濃度為：緩衝液0.5～100mM，NaCl20～200mM，CaCl210～100mM，十二烷基苯磺酸鈉1～10g/L，α-葡萄糖苷酶0.1～10KU/L，穩定劑0.1～10g/L，防腐劑0.1～10g/L；所述試劑R2的各組分及濃度為：緩衝液0.5～100mM，4,6-亞乙基-對硝基苯-α-D-麥芽七糖苷0.5～10g/L，十二烷基苯磺酸鈉1～10g/L，穩定劑0.1～10g/L，防腐劑0.1～10g/L。本發明通過加入十二烷基苯磺酸鈉改善試劑盒性能，本發明重複性好，試劑穩定，靈敏度高，線性範圍廣。
【專利說明】一種穩定的α-澱粉酶檢測試劑盒

【技術領域】
[0001]本發明涉及醫學免疫體外診斷領域，具體地，涉及一種穩定的α -澱粉酶檢測試劑盒。

【背景技術】
[0002]澱粉酶(a -Amylase)簡稱AMS或AMY，一類能將澱粉分子水解的酶，一般作用於可溶性澱粉、直鏈澱粉、糖元等α-1，4-葡聚糖，水解α-1，4-糖苷鍵，產生葡聚糖、麥芽糖和葡萄糖分子。澱粉酶在胰腺和唾液腺中含量豐富，胰澱粉酶由胰腺以活性狀態排入消化道，是最重要的水解碳水化合物的酶，和唾液腺分泌的澱粉酶一樣都屬於α-澱粉酶。澱粉酶分子量小，可通過腎小球濾過，隨尿排出。當罹患胰腺疾病或有胰腺外分泌功能障礙時可引起澱粉酶活性升高或降低，因此，測定血清和尿液中的澱粉酶對胰腺炎的診斷具有重要意義。尿澱粉酶水平波動較大，所以優選血清澱粉酶檢測，或兩者同時測定。
[0003]α -澱粉酶是最早應用於臨床檢驗的一個酶，早在20世紀初，就用來診斷急性胰腺炎，但是血清和尿液中的α -澱粉酶測定，長期以來一直是最難標準化的分析法。
[0004]其診斷方法:血、尿α -澱粉酶(AMY)測定在臨床上的應用已有很長的歷史，到目前為止，測定方法已不下200種。應用於澱粉酶測定的底物種類繁多，早期的測定方法所採用的底物是澱粉，六十年代出現了以染色澱粉為底物的測定方法，由於澱粉結構組成的不確定性及酶解產物的不均一性，使酶促反應不能按化學式量進行計算。應用不同來源、廠家、批號的澱粉作底物時，測得結果差別較大，方法不易標準化。染色澱粉中色素的加入量不易控制，操作繁雜，不適合自動分析。七十年代後期，國外出現了以具有明確結構組成的人工合成底物進行α-澱粉酶測定的方法，這些方法成為現在檢測α-澱粉酶的主流，但是各個方法也存在著一些弊端，IFCC批准了用亞乙基封閉的G7-PNP作底物的酶偶聯法(EPS法)作為臨時推薦方法。


【發明內容】

[0005]針對現有技術中的缺陷，本發明的目的是提供一種穩定的α -澱粉酶檢測試劑盒，本發明採用IFCC批准的對於α-澱粉酶檢測的參考方法，將其製備成適用於全自動生化儀的試劑盒，使得操作更為簡便，同時通過加入十二烷基苯磺酸鈉改善了試劑盒的性能。採用此方法重複性好，試劑穩定，靈敏度高，線性範圍廣。
[0006]本發明是通過以下技術方案實現的:
[0007]本發明涉及一種穩定的α -澱粉酶檢測試劑盒，包括試劑Rl及試劑R2，所述試劑Rl的各組分及濃度包括:
[0008]

【權利要求】
1.一種穩定的α -澱粉酶檢測試劑盒，其特徵在於，包括試劑Rl及試劑R2 ;所述試劑Rl的各組分及濃度包括:緩衝液0.5?100mmol/L，NaCl20?200mmol/L，CaCl210?lOOmmol/L，
十二焼基苯磺酸鈉I?10g/L，α -葡萄糖苷酶0.1?10KU/L，穩定劑0.1?10 g/L，防腐劑0.1?10 g/L ； 所述試劑R2的各組分及濃度包括:緩衝液0.5?100 mmol/L，
4，6-亞乙基-對硝基苯-a -D-麥芽七糖苷0.5?10g/L，
十二焼基苯磺酸鈉I?10g/L， 穩定劑0.1?10g/L, 防腐劑0.1?10g/L。
2.如權利要求1所述的穩定的α-澱粉酶檢測試劑盒，其特徵在於，所述試劑Rl中的緩衝液的pH 7.0?8.0。
3.如權利要求1所述的穩定的α-澱粉酶檢測試劑盒，其特徵在於，所述試劑Rl中的緩衝液包括甘氨酸緩衝液、Tris緩衝液、甘氨酸-NaOH緩衝液、HEPES緩衝液中的一種或幾種的混合。
4.如權利要求1所述的穩定的α-澱粉酶檢測試劑盒，其特徵在於，所述試劑Rl中的穩定劑包括牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖、螯合劑EDTA中的一種。
5.如權利要求1所述的穩定的α-澱粉酶檢測試劑盒，其特徵在於，所述試劑Rl中的防腐劑為疊氮鈉或proclin300防腐劑。
6.如權利要求1所述的穩定的α-澱粉酶檢測試劑盒，其特徵在於，所述試劑R2中的緩衝液的pH 7.0?8.0。
7.如權利要求1所述的穩定的α-澱粉酶檢測試劑盒，其特徵在於，所述試劑R2中的緩衝液包括甘氨酸緩衝液、Tris緩衝液、甘氨酸-NaOH緩衝液、HEPES緩衝液中的一種或幾種的混合。
8.如權利要求1所述的穩定的α-澱粉酶檢測試劑盒，其特徵在於，所述試劑R2中的穩定劑包括牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖、螯合劑EDTA類中的一種。
9.如權利要求1所述的穩定的α-澱粉酶檢測試劑盒，其特徵在於，所述試劑R2中的防腐劑為疊氮鈉或proclin300防腐劑。
【文檔編號】G01N33/52GK104198691SQ201410401270
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年8月14日 優先權日:2014年8月14日
【發明者】李偉奇, 李 傑, 房君江, 張秀文, 林清玉 申請人:上海睿康生物科技有限公司