一種定量檢測可溶性生長刺激表達蛋白2的試驗裝置製造方法
2023-05-28 05:39:51 1
一種定量檢測可溶性生長刺激表達蛋白2的試驗裝置製造方法
【專利摘要】本實用新型涉及一種定量檢測可溶性生長刺激表達蛋白2的試驗裝置，其包括測試卡和免疫定量分析儀；所述的測試卡包括從下至上依次銜接的襯板、吸水墊、包被膜、膠體金墊和濾血墊，所述膠體金墊上固定有膠體金標記的抗人生長刺激表達蛋白2抗體；所述的包被膜上設置有抗人生長刺激表達蛋白2抗體包被的檢測線和IgG抗體包被的質控線；所述的免疫定量分析儀包括殼體，在所述殼體的前端設置有顯示屏、功能按鍵和卡槽，在殼體內設有印表機，所述殼體後端設有開關、串行通信接口、電源接口、鍵盤連接口和虛擬連接口，在所述卡槽的底部設置有與所述測試卡相匹配的矩形凹槽。本實用新型操作簡便、床旁使用、擴大了檢測範圍。
【專利說明】一種定量檢測可溶性生長刺激表達蛋白2的試驗裝置
【技術領域】
[0001]本實用新型涉及一種定量檢測可溶性生長刺激表達蛋白2的試驗裝置。
【背景技術】
[0002]心衰是一種複雜臨床綜合症，其發病率和死亡率均較高。臨床上心衰時症狀和體徵特異性較差，難以辨別病人是否患心衰。超聲心動圖、X射線以及有創血流動力學等輔助檢查有局限性，且受客觀條件限制。因此我們需尋求一種客觀可靠、便捷、價廉、便於隨訪以及適合動態觀察的方法作為補充手段，心力衰竭標誌物的檢測可以滿足以上需求。
[0003]目前心力衰竭標誌物主要有三種:B型鈉尿肽(BNP)、N端BNP前體(NT-proBNP)、可溶性生長刺激表達蛋白2 (ST2)。可溶性ST2是由ST2基因編碼，由過負荷的心肌細胞、心肌成纖維細胞分泌的一種血清蛋白。臨床上Weinberg、Figal研究中均已證明由心力衰竭導致死亡者的血清中可溶性ST2水平明顯高於生存者，可溶性ST2與心衰患者的一年後的死亡風險呈劑量依賴關係。經多因素分析，可溶性ST2預測一年的死亡率價值非常高。血清可溶性ST2水平升高伴有病死率的升高，是心衰預後差的標誌，因此開展血清可溶性ST2免疫學檢測技術研究具有重要的意義。目前BNP、NT-proBNP在國內外已經有成熟的檢測產品，而可溶性生長刺激表達蛋白2國內目前沒有相關檢測產品。
[0004]當前國外採用酶聯免疫吸附法來檢測生長刺激表達蛋白2，檢測速度慢，需要約4小時，不利用臨床使用。CN201220401468的專利實質為定性檢測產品，無法用於心衰的預後評估和嚴重程度評估。
實用新型內容
[0005]本實用新型目的在於提供一種操作簡便、床旁使用、快速定量檢測生長刺激表達蛋白2，滿足臨床準確評估心力衰竭需求的檢測裝置。
[0006]本實用新型的技術方案如下:
[0007]本實用新型包括測試卡和免疫定量分析儀；
[0008]所述的測試卡包括從下至上依次銜接的襯板、吸水墊、包被膜、膠體金墊和濾血墊，所述膠體金墊上固定有膠體金標記的抗人生長刺激表達蛋白2抗體；所述的包被膜上設置有抗人生長刺激表達蛋白2抗體包被的檢測線和IgG抗體包被的質控線；
[0009]所述的免疫定量分析儀包括殼體，在所述殼體的前端設置有顯示屏、功能按鍵和卡槽，在殼體內設有印表機，所述殼體後端設有開關、串行通信接口、電源接口、鍵盤連接口和虛擬連接口，在所述卡槽的底部設置有與所述測試卡相匹配的矩形凹槽。
[0010]進一步的，本實用新型所述的測試卡還包括包被於檢測試紙外側的卡殼，所述的卡殼上設置有加樣區和檢測區，所述的加樣區與所述濾血墊的位置相對應，所述的檢測區與所述檢測線和質控線的位置相對應。
[0011]進一步的，本實用新型還包括儲存有所述測試卡的標準曲線的測試晶片，所述的測試晶片與所述矩形凹槽相匹配。[0012]進一步的，本實用新型所述的包被膜為硝酸纖維素膜。
[0013]進一步的，本實用新型所述的膠體金墊中膠體金顆粒的粒徑為2(T50nm。
[0014]進一步的，本實用新型所述的IgG抗體為兔抗鼠IgG抗體、羊抗鼠IgG抗體或羊抗兔IgG抗體。
[0015]進一步的，本實用新型所述的抗人生長刺激表達蛋白2抗體為鼠抗人生長刺激表達蛋白2抗體或兔抗人生長刺激表達蛋白2抗體。
[0016]進一步的，本實用新型所述的抗人生長刺激表達蛋白2抗體為單克隆抗體，IgG抗體為多克隆抗體。
[0017]本實用新型的積極效果為:
[0018]本實用新型的試驗裝置包括測試卡和免疫定量分析儀，免疫定量分析儀檢測所述測試卡檢測區的光密度，可以實現對可溶性生z長刺激表達蛋白2的定量檢測，從而實現對心力衰竭預後的準確判斷，當ST2 35ng/ml時，表明心衰預後較差。
[0019]本實用新型的試驗裝置還包括儲存有所述測試卡的標準曲線的測試晶片。通過免疫定量分析儀讀取晶片中的標準曲線信息，可以節約臨床上獲取標準曲線的試驗步驟，進一步節約試驗時間，使試驗時間進一步縮短至15分鐘，提高了檢測速率，減少了患者等待結果的時間。
[0020]本實用新型的試驗裝置包括兩種鼠抗人ST2的單克隆抗體。第一個鼠抗人ST2的單抗被包被在膠金墊中，可與血液中ST2分子結合。第二個鼠抗人ST2的單抗的功能是作為捕獲抗體結合第一個抗體與ST2的免疫結合物。提高了檢測的靈敏度，僅需要IOOul樣品既可以滿足測試需求，同時擴大了檢測範圍，檢測範圍最高可達200ng/ml，加強了對不同程度心力衰竭的預後和嚴重程度評估。
[0021]本實用新型的測試卡的膠體金顆粒的粒徑為2(T50nm，所標記抗體的效價為1:2 X 105?2.63 X 106，檢測線上包被的鼠抗人ST2抗體的量為0.2?0.4mg/mL ;在此工藝下，本實用新型的免疫定量分析儀可以實現準確的讀數，試驗數據的可靠度高。
[0022]本實用新型的試驗方法操作步驟簡單，不存在使用障礙。
[0023]本實用新型的試驗方法使用全血、血漿或血清，樣品的獲取方便，可實現在患者的床芳檢測。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0024]圖1為本實用新型測試卡的結構示意圖；
[0025]圖2為本實用新型測試卡的A-A剖視圖；
[0026]圖3為本實用新型免疫定量分析儀的結構示意圖；
[0027]圖4為本實用新型免疫定量分析儀的後視結構示意圖；
[0028]圖5為本實用新型測試晶片的結構示意圖；
[0029]圖6為本實用新型測試晶片的標準曲線；
[0030]圖7為本試驗裝置臨床試驗數據ROC曲線圖。
[0031]在附圖中，I測試卡、1-1襯板、1-2吸水墊、1-3包被膜、1-4膠體金墊、1-5濾血墊、
1-6卡殼、1-7加樣區、1-8檢測區、1-9檢測線、1-10質控線、2免疫定量分析儀、2-1印表機、2-2顯示屏、2-3功能按鍵、2-4卡槽、2-5開關、2_6串行通信接口、2_7電源接口、2_8鍵盤連接口、2-9虛擬連接口、2-10矩形凹槽、3測試晶片、3-1數據存儲區。
【具體實施方式】
[0032]本實用新型包括測試卡I和免疫定量分析儀2。
[0033]如附圖1和2所示，所述的測試卡I包括從下至上依次銜接的襯板1-1、吸水墊1-2、包被膜1-3、膠體金墊1-4和濾血墊1-5，所述膠體金墊上固定有膠體金標記的抗人生長刺激表達蛋白2抗體；所述的包被膜上設置有抗人生長刺激表達蛋白2抗體包被的檢測線1-9和IgG抗體包被的質控線1-10 ;所述的測試卡I還包括包被於檢測試紙外側的卡殼1-6，所述的卡殼6上設置有加樣區1-7和檢測區1-8，所述的加樣區1-7與所述濾血墊1_5的位置相對應，所述的檢測區1-8與所述檢測線1-9和質控線1-10的位置相對應。
[0034]如附圖3和4所示，所述的免疫定量分析儀包括殼體，在所述殼體的前端設置有顯示屏2-2、功能按鍵2-3和卡槽2-4，在殼體內設有印表機2-1，所述殼體後端設有開關2_5、串行通信接口 2-6、電源接口 2-7、鍵盤連接口 2-8和虛擬連接口 2-9，在所述卡槽2_4的底部設置有與所述測試卡I相匹配的矩形凹槽2-10。
[0035]如圖5所示，所述的測試晶片3與所述矩形凹槽2-10相匹配，所述的測試晶片3設置有數據存儲區3-1用於存儲所述測試卡I的標準曲線，其中的標準曲線如圖6所示。
[0036]使用本實用新型時的樣本採集:採集靜脈全血樣本加入EDTA或肝素抗凝管獲得抗凝的全血或血漿樣本，或者加入含促凝劑的試管離心獲得血清。對於冷凍或冷藏的血漿和血清樣本，檢測前必須使其恢復至室溫，並充分混勻。血漿樣本檢測前應輕輕反轉幾次以便混勻。
[0037]使用本實用新型時的加樣檢測:將測試晶片放入免疫定量分析儀，獲得本批次測試卡的標準曲線數據。打開測試卡的包裝袋，在測試卡上標記患者的編號(或姓名)並錄入配套儀器中；用兩指擠壓吸管頂部球囊，將吸頭進入到患者樣本中，鬆開兩指；使整個吸管充滿樣本；將吸管中的樣本全部加入測試卡上方加樣區中；把測試卡放入配套免疫定量分析儀，按分析儀的使用手冊進行操作，15分鐘可獲知定量結果。
[0038]使用本實用新型時的結果解釋:當ST2 35ng/ml時，表明心衰預後較差。
[0039]實施例1
[0040]心衰預後患者使用本實用新型所檢測的ST2值及定量分析。
[0041]使用根據上述方法所研製的生長刺激表達蛋白2測試卡，共檢測疑似心衰患者標本220例，女性佔64.5%，男性佔35.5%，平均年齡65 ± 16.3歲，生長刺激表達蛋白2檢測試劑盒的診斷結果的曲線下面積為0.919 (見圖7)，表明生長刺激表達蛋白2測試卡在臨床上有很高的診斷價值，有助於對心衰病人進行診斷和預後評估。而定性的測試卡不能給出數據用於心衰嚴重程度評估，在臨界值附近由於存在灰色區域難以準確判斷，更無法在經過治療後評估患者是否得到改善。通過使用生長刺激表達蛋白2定量測試卡，則可以準確評估患者心衰嚴重程度，也可以更好地監測治療效果。
【權利要求】
1.一種定量檢測可溶性生長刺激表達蛋白2的試驗裝置，其特徵在於其包括測試卡(I)和免疫定量分析儀(2)； 所述的測試卡(I)包括從下至上依次銜接的襯板(1-1)、吸水墊(1-2)、包被膜(1-3)、膠體金墊(1-4)和濾血墊(1-5)，所述膠體金墊上固定有膠體金標記的抗人生長刺激表達蛋白2抗體；所述的包被膜上設置有抗人生長刺激表達蛋白2抗體包被的檢測線(1-9)和IgG抗體包被的質控線(1-10)； 所述的免疫定量分析儀包括殼體，在所述殼體的前端設置有顯示屏(2-2)、功能按鍵(2-3)和卡槽(2-4)，在殼體內設有印表機(2-1 )，所述殼體後端設有開關(2-5)、串行通信接口( 2-6 )、電源接口( 2-7 )、鍵盤連接口( 2-8 )和虛擬連接口( 2-9 )，在所述卡槽(2-4 )的底部設置有與所述測試卡(I)相匹配的矩形凹槽(2-10)。
2.根據權利要求1所述的一種定量檢測可溶性生長刺激表達蛋白2的試驗裝置，其特徵在於所述的測試卡(I)還包括包被於檢測試紙外側的卡殼(1-6)，所述的卡殼(6)上設置有加樣區(1-7)和檢測區(1-8)，所述的加樣區(1-7)與所述濾血墊(1-5)的位置相對應，所述的檢測區(1-8)與所述檢測線(1-9)和質控線(1-10)的位置相對應。
3.根據權利要求1所述的一種定量檢測可溶性生長刺激表達蛋白2的試驗裝置，其特徵在於其還包括儲存有所述測試卡(I)的標準曲線的測試晶片(3)，所述的測試晶片(3)與所述矩形凹槽(2-10)相匹配。
4.根據權利要求1所述的一種定量檢測可溶性生長刺激表達蛋白2的試驗裝置，其特徵在於所述的包被膜(1-3)為硝酸纖維素膜。
5.根據權利要求1所述的一種定量檢測可溶性生長刺激表達蛋白2的試驗裝置，其特徵在於所述的膠體金墊(1-4)中膠體金顆粒的粒徑為2(T50nm。
6.根據權利要求1所述的一種定量檢測可溶性生長刺激表達蛋白2的試驗裝置，其特徵在於所述的IgG抗體為兔抗鼠IgG抗體、羊抗鼠IgG抗體或羊抗兔IgG抗體。
7.根據權利要求1所述的一種定量檢測可溶性生長刺激表達蛋白2的試驗裝置，其特徵在於所述的抗人生長刺激表達蛋白2抗體為鼠抗人生長刺激表達蛋白2抗體或兔抗人生長刺激表達蛋白2抗體。
8.根據權利要求6或7所述的一種定量檢測可溶性生長刺激表達蛋白2的試驗裝置，其特徵在於所述的抗人生長刺激表達蛋白2抗體為單克隆抗體，IgG抗體為多克隆抗體。
【文檔編號】G01N33/68GK203502418SQ201320547214
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年9月4日 優先權日:2013年9月4日
【發明者】劉成山, 段志強, 吳萌 申請人:石家莊洹眾生物科技有限公司