一種厭氧培養基連續分裝裝置的製作方法
2023-05-28 06:57:01
本實用新型涉及一種厭氧培養基連續分裝裝置，屬於厭氧微生物培養研究技術領域。
背景技術：
隨著現代微生物學和厭氧微生物研究的快速發展，厭氧微生物的培養過程也在逐步走向標準化、規範化、精準化。其中，厭氧培養基的分裝過程是一個重要環節，該環節操作的及時性、規範性等都會直接影響厭氧微生物的生長狀況，進而決定研究結果的準確度。
在厭氧微生物接種計數培養之前，需要把滅菌的液體培養基加入到滅菌玻璃培養皿中，待培養基的溫度降至約45℃左右時，向未凝固的培養基中加入青黴素輕輕搖勻，之後才可以接種厭氧微生物梯度稀釋液，再次搖勻進行厭氧培養。而在培養基分裝的過程中，由於厭氧培養箱內空間狹小，動作範圍受限制，導致操作不靈活，單個分裝時間耗時較長，且計數培養試驗需要培養皿的數量較多，所以，很容易發生培養基凝固的現象，給微生物的接種操作帶來不利因素，造成接種率低、重複性差、效率低等一系列問題。因此，急需一種厭氧培養基快速分裝裝置以解決現有技術中存在的上述問題。
技術實現要素：
為了解決現有技術存在的上述問題，本實用新型提供了一種保溫式厭氧培養基快速分裝裝置。這種厭氧培養基分裝裝置效率高、成本低並能夠實現微生物厭氧培養基的規模化和標準化分裝。
本實用新型的技術方案是，提供一種厭氧培養基連續分裝裝置，包括密閉容器，在密閉容器的外圍包裹有保溫層，所述密閉容器還分別通過管一和管二與供氣裝置和培養皿連通；密閉容器內裝有培養液，管一的末端位於培養液液面之上，管二的末端位於培養液液面之下；在密閉容器與培養皿之間的管二上設有三通閥，三通閥上連通注射器。
優選方案，所述保溫層由內至外依次為矽膠層、保溫棉層和錫紙層。
優選方案，所述供氣裝置為氮氣袋。
優選方案，所述注射器上設有刻度。
優選方案，所述管一和管二均為矽膠管。
採用上述技術方案所產生的有益效果在於：通過保溫措施使得液體培養基的溫度保持更久的高溫狀態，不會因為低溫而發生凝固現象，給培養基的批量分裝操作帶來了便利；無菌注射器與三通閥的聯合應用可以快速抽取和注射移取培養基，在厭氧培養箱的狹窄空間內使得培養基的單個分裝操作十分靈活，給培養基的批量分裝操作節約了大量時間；此外，無氧氮氣供給模塊通過矽膠管連通了無氧氮氣袋和裝有培養基的保溫滅菌瓶，當注射器抽取培養基時，瓶內培養基體積減少，瓶內的氣壓降低，為了達到氣體壓力的自然平衡，氣袋內的無氧氮氣在氣壓差的驅動下會自動向瓶內輸送無氧氮氣，直到氣壓差達到平衡為止，完全在自動條件下完成了對瓶內厭氧培養基的保護。解決了厭氧培養基常規分裝時容易發生凝固以及單手分裝操作繁瑣等問題，在厭氧培養箱的狹窄空間內成功實現了液體厭氧培養基的標準化、簡單化、快速化的連續分裝操作。
附圖說明
圖1表示本實用新型提供的一種厭氧培養基連續分裝裝置結構示意圖。
附圖說明：密閉容器1、保溫層2、管一3、管二4、供氣裝置5、培養皿6、三通閥7、注射器8。
具體實施方式
下面對本實用新型實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅是本實用新型的一部分實施例，而不是全部的實施例。基於本實用新型中的實施例，本領域技術人員在沒有做出創新型勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬於本實用新型保護的範圍。
在下面的描述中闡述了很多具體細節以便於充分理解本實用新型，但是本實用新型還可以採用其他不同於在此描述的其它方式來實施，本領域技術人員可以在不違背本實用新型內涵的情況下做類似推廣，因此本實用新型不受下面公開的具體實施例的限制。
如圖1所示，本實施例提供一種厭氧培養基連續分裝裝置，包括密閉容器1（帶有密封蓋的瓶子），在密閉容器1的外圍包裹有保溫層2（由內至外依次為矽膠層、保溫棉層和錫紙層），所述密閉容器1還分別通過管一3和管二4（均為矽膠管）與供氣裝置5（氮氣袋）和培養皿6連通；密閉容器1內裝有培養液，管一3的末端位於培養液液面之上，管二4的末端位於培養液液面之下；在密閉容器1與培養皿6之間的管二4上設有三通閥7，三通閥7上連通帶有刻度的注射器8。
本實用新型在具體應用過程中，通過把無氧氮氣供給與厭氧培養基保溫瓶緊密連接，當注射器抽取培養基時，瓶內培養基體積減少，瓶內的氣壓降低，為了達到氣體壓力的自然平衡，氣袋內的無氧氮氣在氣壓差的驅動下會自動向瓶內輸送無氧氮氣，直到氣壓差達到平衡為止，完全在自動條件下完成了對瓶內厭氧培養基的保護。採用的無菌注射器規格為5ml，每次可以向滅菌玻璃培養皿中定量移取5ml培養基。5ml的注射器體積小，右單手可以靈活操作，做單手可以移動培養皿。保溫層的保溫作用可以最大限度延長液體培養基的液體狀態，防止其凝固。因此，本實用新型確保了培養基分裝的標準化，避免了培養基的凝固作用，提高了厭氧液體培養基的分裝效率及準確性。
該厭氧培養基連續分裝裝置的具體安裝及培養基分裝操作方法包括如下步驟：
第一步：保溫層的製備，在高溫滅菌瓶外塗抹一層耐高溫矽膠，把保溫棉均勻地纏繞在滅菌瓶周圍，在保溫棉外層包裹三層加厚錫箔紙，包裹嚴實，放置過夜，等待矽膠凝固後備用。
第二步：厭氧培養基的配置與滅菌，參照厭氧培養基操作手冊配置厭氧培養基，把配置好的培養基轉移到上述保溫式高溫滅菌瓶中滅菌，向培養基中通入無氧氮氣5 min，趕除培養基中的氧氣，迅速蓋上螺紋瓶蓋進行滅菌。滅菌條件：121℃、0.1 MPa、20 min。
第三步：連帶矽膠管和的螺紋瓶蓋滅菌，用錫箔紙把連帶矽膠管的螺紋瓶蓋包裝嚴實，放入高壓滅菌鍋內滅菌，滅菌條件同上。
第四步：無氧氮氣的灌裝，向氮氣袋內充入無氧氮氣，進行三次袋內氣體置換潤洗，操作氣袋上的氣體閥門把袋內的潤洗氮氣完全排除，再向袋內充入無氧氮氣。
第五步：裝置組裝，把所有滅菌好的材料轉移到厭氧培養箱內，通過氣體置換把厭氧培養箱內的環境調製到無氧條件，擰開裝有培養基的滅菌瓶，迅速把連帶矽膠管的螺紋瓶蓋蓋上並擰緊，把裝有無氧氮氣的氣袋連接到矽膠管上並打開氣體閥門，使瓶內和氣袋內的氣壓聯通平衡。
第六步：無菌注射器的安裝，取一支5ml螺紋式無菌注射器與瓶蓋上方的三通閥連接並旋絲箍緊。
第七步：厭氧培養基的分裝，調節旋轉與注射器偶聯的三通閥，使注射器與培養基聯通，抽動注射器活塞把手，把培養基抽到注射器內，再次調節三通閥使注射器與分裝矽膠管聯通，推動注射器活塞把手，把培養基通過分裝矽膠管注射到滅菌玻璃培養皿中，完成厭氧培養基的快速標準化分裝操作。
第八步：厭氧微生物接種培養，在培養基分裝後進行厭氧微生物梯度稀釋液接種並搖勻，搖勻後待培養基凝固後放入厭氧培養箱內培養觀察，達到預期效果後計數。