一株六溴環十二烷降解菌的篩選及應用的製作方法
2023-06-05 03:41:41 2
本發明屬於微生物及其修復六溴環十二烷hbcd汙染的應用技術領域。涉及一株hbcd降解菌的篩選方法及其對hbcd降解方法及應用。
背景技術：
六溴環十二烷(hbcd)是一種新型的溴代阻燃劑，由於其阻燃效率高，熱穩定性好，所需添加量小，對材料性能影響小及價格便宜等優點，被廣泛應用於電子、電器、化工、建築、交通、紡織、石油和採礦等領域中。hbcd是僅次於pbdes和雙酚a的第三大溴代阻燃劑。hbcd主要有三種同分異構體，即α-hbcd，β-hbcd和γ-hbcd。其中，工業產品中γ-hbcd所佔比例最高為75～89％，α-hbcd為10～13％，β-hbcd最少一般為98％。
四、hbcd的檢測
hbcd檢測採用高相液相色譜—質譜聯用hplc-ms(watersapgc/uplcxevotq-s,waters,milford,ma,usa)，液相色譜柱為德國macherey-nagel系列手性色譜柱(200mm×4.0mm×5μm,macherey-nagel,german)。流動相流速為0.4ml/min，柱溫為25攝氏度，錐孔電壓為12v。流動相a為乙腈/甲醇(85/15)，流動相b為超純水。流動相a/流動相b為60/40。該方法檢出限90％，如圖4。
實施例3、acinetobacterhaemolyticusstrainhw-2對hbcd降解的最優條件
採用單因素實驗，選定3個因素：ph、溫度、hbcd濃度，分別設定5水平，ph(5、6、7、8、9)，溫度(20℃、25℃、30℃、35℃、40℃)，hbcd濃度(500μg/l、1000μg/l，μg/l，2000μg/l，5000μg/l，10000ug/l)，優化acinetobacterhaemolyticusstrainhw-2對hbcd的降解條件。每個處理3個重複，降解時間為15天，研究結果發現，acinetobacterhaemolyticusstrainhw-2菌對hbcd最優的降解條件為ph為7，溫度35℃，hbcd的濃度為500μg/l。如圖5。
實施例4、acinetobacterhaemolyticusstrainhw-2在hbcd降解過程中的代謝產物變化
acinetobacterhaemolyticusstrainhw-2在hbcd降解過程中會利用hbcd合成各種胞外蛋白，同時hbcd會被降解變為可利用碳源。在無添加hbcd的丙酮培養基中，溶解性蛋白和可利用碳源和添加了hbcd的有明顯變化。添加hbcd後，可利用碳源和溶解性蛋白存在時間延長。如圖6。
organizationname:南開大學
title:一株六溴環十二烷降解菌的篩選及應用
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