茶多酚檢測試紙及其標準比色卡和它們的用途的製作方法

2023-06-27 08:37:31

專利名稱：：茶多酚檢測試紙及其標準比色卡和它們的用途的製作方法
技術領域：
：本發明涉及植物有效成分檢測技術，具體屬於一種茶多酚檢測試紙及其標準比色卡和它們的用途。
背景技術：
：茶葉是全球三大天然飲料之一，茶多酚是茶葉重要的活性成分，是決定茶葉風味和品質的主要物質。目前，關於植物多酚含量的測定方法主要包括高效液色譜測定法，原子吸收法，紫外一可見分光光度法、滴定法和電化學法等。高效液色譜測定法測定物質中各組分得到分離並且進行定性定量分析，該法可同時測定不同的多酚組分以及多種有效成分的指紋圖譜。原子吸收法是利用鹼式乙酸鉛與茶多酚絡合形成黃色沉澱，通過測定上清液中過量的鉛離子，間接測定茶多酚的含量。流動注射-抑制化學發光法是在鹼性條件下，茶多酚還原H202，抑制魯米諾-H202-KI04體系的化學發光，其抑制發光的程度與茶多酚的含量成線形關係。分光光度法也是常用方法，主要包括分光光度比色法、三波長分光光度法和差示分光光度法。分光光度法主要是高等植物及產品中的植物多酚與不同的顯色物質反應，通過顯色物質的光密度與多酚的濃度成相關關係來測定多酚含量，待測物中不同多酚與相同或者是不同的顯色劑成色，具有特徵吸收峰，可以通過多波長和差示分光光度測定。茶多酚與高錳酸鉀、重氮鹽、鉬酸銨、酒石酸亞鐵及相關金屬離子等顯色劑顯色，形成了酒石酸亞鐵比色法(GB8313287)、重氮化-偶合分比色法鉬酸銨分光光度法、高錳酸鉀滴定法及電位滴定法等一系列茶多酚測定方法。另外還有茶多酚在酸性條件下還原F^+為Fe2+，F^+與鐵氰化鉀生成可溶性蘭色配合物KFe[Fe(CN)6]，通過比色間接測定茶多酚的含量。中國農業大學(專利號CN1811391A)也描述了一種利用圖像採集儀器採集茶多酚顯色的圖像信息，基於計算機色度識別系統處理，進行茶多酚含量測定的方法。其優點是以圖像採集儀替代了昂貴的分光光度儀，可以預存標準曲線，只對待測樣品進行測量即可得到其濃度。其測定原理是酒石酸亞鐵與茶多酚顯色，在比色池中直接採集顯色的圖像信息，待測樣品的色度與標準樣品的色度比較，進行茶多酚含量的測定。現有測定茶多酚的方法中，有的方法精密度高、有的方法針對性強，但是需要價格昂貴的精密儀器；滴定法雖然不需要精密儀器，但需要配製試劑和經過滴定的過程。所以，建立一種簡單、方便、快捷的茶多酚檢測方法是非常必要的。
發明內容本發明的目的是提供一種茶多酚檢測試紙及其標準比色卡，並提供一種利用該檢測試紙和標準比色卡方便、快捷地測定樣品中茶多酚含量的方法。本發明提供的一種茶多酚檢測試紙，通過包括如下歩驟的方法製得稱取粘合劑加入蒸餾水中，使其溶解，配製成濃度為0.2-5%的粘合劑溶液；將絡合劑加入到粘合劑溶液中，攪拌溶解，使其濃度為0.2-1.5mol/L;再加入過渡金屬鹽顯色劑，攪拌溶解，使其濃度為0.3-1.5mol/L，即得顯色液；將濾紙浸入顯色液中浸泡3-20分鐘，取出，乾燥，剪裁，整形，包裝，即得多酚檢測試紙；所述的粘合劑選自可溶性澱粉、聚乙烯醇、瓊脂、聚丙烯醯胺凝膠或明膠等；絡合劑選自酒石酸、檸檬酸、草酸、氫氟酸或它們中每一種的鉀鹽或鈉鹽或酒石酸鉀鈉等；顯色劑選自鐵、銅或鋅等的金屬鹽。本發明提供的一種與茶多酚檢測試紙配套使用的標準比色卡，通過包括如下歩驟的方法製得配製濃度在O-IOmg/mL內的3-15種不同濃度的茶多酚標準溶液；用權利要求1所述的茶多酚檢測試紙分別在不同濃度的茶多酚標準溶液中進行顯色，依據顯色結果製作標準色塊，將標準色塊按茶多酚標準溶液濃度依次排列、粘貼，製得標準比色卡。所述的依據顯色結果製作標準色塊，是依據顯色結果利用計算機進行圖像掃描、處理製備得到茶多酚標準色塊。也可以用顏料調色的方法得到。所述的試紙可用於植物或植物製品中茶多酚含量的測定，特別是茶葉中茶多酚含量的測定。一種茶葉中茶多酚含量的測定方法，其特徵在於，包括如下步驟稱量待測茶葉，加入25—50倍體積95'C—100'C的水(g/mL)，浸提20分鐘製得待測溶液；取上述茶多酚檢測試紙滴加或蘸取待測溶液，在20秒_10分鐘內與上述配套使用的標準比色卡比對，得到茶多酚含量。茶多酚含量可根據下式計算或根據事先做好的列表査得。茶多酚含量(mg/g)=(比色值xV)/(WxP)式中比色值(mg/mL):與比色卡比對獲得；V:提取液的體積(mL);P:第一次茶多酚提取率(％)如茶葉以50倍體積水浸提時約為84.30%;W:待測樣品的質量(g)。也可根據公式計算製成茶多酚含量表。與現有技術相比本發明以顯色劑、絡合劑、粘合劑及濾紙等為主要原料製備了茶多酚檢測試紙，這種檢測試紙適用於植物或植物製品中茶多酚含量的測定，特別是茶葉中茶多酚含量的測定。該方法具有簡單、方便、快捷等特性，可以直觀的檢測茶多酚，無需大型精密儀器，也無需專業技術人員或經過專業培訓，更不受環境的約束，也避免試驗條件的限制和試劑配製的繁瑣過程，力便於大眾普及和隨時隨地使用，另外，價格便宜向且便於攜帶，試紙的保存時間長。圖l:可溶性澱粉、酒石酸鉀鈉和三氯化鐵製備的茶多酚檢測試紙在0-10mg/mL不同茶多酚濃度中的顯色與依據其製備成的標準比色卡。上圖為標準比色卡，下圖為實際顯色。圖2:可溶性澱粉、酒石酸鉀鈉和三氯化鐵製備的茶多酚檢測試紙測定花茶和龍井茶的顯色，與相應比色卡比對。圖3:瓊脂粉、酒石酸鉀鈉和三氯化鐵製備的茶多酚檢測試紙測定普洱茶和碧螺春茶的顯色，與相應比色卡比對。具體實施例方式下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。實施例/試紙的製備稱取可溶性澱粉2.5g,溶於80mL水中，加熱至無色透明，配製成2.5%(W/V)的澱粉溶液，稱取酒石酸鉀鈉28.2g，溶於配製好的澱粉溶液中，攪拌溶解，再加入三氯化鐵27.0g,繼續攪拌溶解，定溶至100mL,即得顯色溶液，其中酒石酸鉀鈉和三氯化鐵的摩爾濃度均為1.Omol/L。將定性濾紙浸入顯色溶液中浸泡10分鐘，取出置於玻璃板上於37°C烘箱十燥，即得茶多酚檢測試紙。標準比色卡的製備以茶多酚配製成濃度(mg/mL)分別為0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0的標準液。以上述茶多酚檢測試紙對不同標準濃度的茶多酚顯色，以標準濃度的茶多酚顯色為基準，利用計算機AdobePhotoshop編輯不同顏色的RGB值，以RGB值編輯成各種顏色的色塊，數碼衝印製作出所有色塊。再與標準濃度茶多酚的顯色試紙同時掃描，兩者經計算機軟體進行顏色比對，反覆編輯、數碼衝印、掃描、比對的步驟，直到比對出與標準多酚濃度相匹配的顏色，在數碼衝印製作出的編輯色塊中裁剪出與標準茶多酚溶液在試紙上顯色相匹配顏色的色塊，並按茶多酚濃度標準顯色排列、粘貼，製成茶多酚濃度標準比色卡，見圖1所示。茶葉中茶多酚含量的測定待測樣品的製備稱量待測樣品碧螺春、鐵觀音、龍井、普洱、紅茶和花茶，分別加入50倍體積95'C—IOO'C的水(g/mL)，浸提20分鐘，製得各種茶葉的待測溶液。茶多酚含量測定取茶多酚檢測試紙滴加或蘸取待測溶液，在30秒內採用目測'比色與標準比色卡比對，即得比色值；每份樣品測定三次，取平均值，按下列公式計算茶葉多酚含量。多酚含量(mg/g)=(比色值xV)/(WxP)。其中比色值與比色卡比對獲得；V:提取液的體積(mL);P:第一次提取液茶多酚提取率，按84.30%計；W:待測樣品的質量(g)。結果見表1和圖2，圖2展示可溶性澱粉、酒石酸鉀鈉和三氯化鐵製備的茶多酚檢測試紙的標準顯色卡以及測定花茶茶和龍井茶的顯色結果。結果表明茶多酚檢測試紙目測法結果與國標法相比相對偏差小於10%，適合於茶葉茶多酚的快速測定。表J本發明方法與國標法(GB8313287)茶葉茶多酚含量測定比較tableseeoriginaldocumentpage6實施例21.試紙的製備稱取瓊脂粉0.2g,溶於80mL水中，加熱至無色透明，配製成0.2%(W/V)的澱粉溶液，稱取酒石酸鉀鈉28.2g,溶於配製好的澱粉溶液中，攪拌溶解，再加入三氯化鐵27.09，繼續攪拌溶解，定溶至100mL，即得顯色溶液，其中酒石酸鉀鈉和三氯化鐵的摩爾濃度均為1.0mol/L。將定性濾紙浸入顯色溶液中浸泡5分鐘，取出置於玻璃板上於陰涼乾燥處涼幹，即得茶多酚檢測試紙。2.標準比色卡的製備茶多酚配製成濃度(mg/mL)分別為0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0的標準液。以上述茶多酚測定試紙對不同標準濃度的茶多酚顯色為基準，用繪畫顏料調色的方法製得標準比色卡。3.待測樣品的製備和含量測定按實施例l的方法進行。結果表明茶多酚檢測試紙目測結果與國標法相比相對偏差小於10%，適合於茶葉茶多酚的快速測定。實施例1.試紙的製備稱取可溶性澱粉2.0g,溶於80mL水中，加熱至無色透明，配製成2%(W/V)的澱粉溶液，稱取草酸鈉4.02g，溶於配製好的澱粉溶液中，攪拌溶解，再加入三氯化鐵13.5g,繼續攪拌溶解，定溶至lOOmL，即得顯色溶液，其中草酸鈉和三氯化鐵的摩爾濃度分別為0.3mol/L禾卩0.5mol/L。將定性濾紙浸入顯色溶液中浸泡5分鐘，取出置於玻璃板上於37。C烘箱乾燥，即得茶多酚檢測試紙。2.標準比色卡的製備以上述茶多酚檢測試紙對不同標準濃度的茶多酚顯色為基準，製備其相應標準比色卡，製作方法同實施例1。實施例41.試紙的製備:稱取可溶性澱粉4.0s,溶於80mL水中，加熱至無色透明，配製成4%(W/V)的澱粉溶液，稱取草酸鈉2.68g，溶於配製好的澱粉溶液中，攪拌溶解，再加入硝酸鐵12.123，繼續攪拌溶解，定溶至100mL，即得顯色溶液，其中草酸鈉和硝酸鐵的摩爾濃度分別為0.2mol/L禾卩0.3mol/L。將定性濾紙浸入顯色溶液中浸泡5分鐘，取出置於玻璃板上於37'C烘箱乾燥，即得茶多酚檢測試紙。2.標準比色卡的製備配製成茶多酚濃度(mg/mL)分別為0、0.5、1.5、2.5、3.5、4.5、5.5的標準液。以上述茶多酚檢測試紙對不同標準濃度的茶多酚顯色為基準，製備相應標準比色卡，製作方法見實施例1。3.待測樣品紅茶和碧螺春茶葉，按實施例1的方法製備成待測液。4.含量測定採用茶多酚檢測試紙目測法測定，結果見圖3。實施例51.試紙的製備稱取可溶性澱粉1.5g，溶於80mL水中，加熱至無色透明，配製成1.5%(W/V)的澱粉溶液，稱取氟化鈉4.2g，溶於配製好的澱粉溶液中，攪拌溶解，再加入三氯化鐵40.59，繼續攪拌溶解，定溶至100mL，即得顯色溶液，其中氟化鈉和三氯化鐵的摩爾濃度分別為1.0md/L和1.5mol/L。將定性濾紙浸入顯色溶液中浸泡5分鐘，取出置於玻璃板上於37'C烘箱乾燥，即得茶多酚檢測試紙。2.標準比色卡的製備以上述茶多酚檢測試紙對不同標準濃度的茶多酚顯色為基準，製備相應標準比色卡，製作方法同實施例l。實施例61.試紙的製備稱取可溶性澱粉2.5s,溶於80mL水中，加熱至無色透明，配製成2.5%(W/V)的澱粉溶液，稱取氟化鈉4.2g，溶於配製好的澱粉溶液中，攪拌溶解，再加入硝酸鐵40.4g，繼續攪拌溶解，定溶至100mL，即得顯色溶液，其中氟化鈉和硝酸鐵的摩爾濃度均為1.0mol/L。將定性濾紙浸入顯色溶液中浸泡IO分鐘，取出置於玻璃板上於37。C烘箱乾燥，即得茶多酚檢測試紙。2.標準比色一的製備以i述茶多酚檢測試紙對不同標準濃度的茶多酚顯色為基準，製備相應標準比色卡，製作方法同實施例1。權利要求1、一種茶多酚檢測試紙，其特徵在於，通過包括如下步驟的方法製得稱取粘合劑加入蒸餾水中，使其溶解，配製成濃度為0.2-2.5％的粘合劑溶液；將絡合劑加入到粘合劑溶液中，攪拌溶解，使其濃度為0.3-1.0mol/L；再加入過渡金屬鹽顯色劑，攪拌溶解，使其濃度為0.3-1.0mol/L，即得顯色液；將濾紙浸入顯色液中浸泡3-20分鐘，取出，乾燥，剪裁，整形，包裝，即得多酚檢測試紙；所述的粘合劑選自可溶性澱粉、聚乙烯醇、瓊脂、聚丙烯醯胺凝膠或明膠；絡合劑選自酒石酸、檸檬酸、草酸、氫氟酸、磺基水楊酸或它們中每一種的鉀鹽或鈉鹽或酒石酸鉀鈉；顯色劑選自鐵、銅或鋅的金屬鹽。2、一種標準比色卡，其特徵在於，通過包括如下歩驟的方法製得配製濃度在0-10mg/ml內的3-15種不同濃度的茶多酚標準溶液；用權利要求1所述的茶多酚檢測試紙分別在不同濃度的茶多酚標準溶液中進行顯色，依據顯色結果製作標準色塊，將標準色塊按茶多酚標準溶液濃度依次排列、粘貼，製得標準比色卡。3、按照權利要求2所述的標準比色卡，其特徵在於，所述的依據顯色結果製作標準色塊，是依據顯色結果利用計算機進行圖像掃描、處理製備得到茶多酚標準色塊。4、按照權利要求1所述的試紙用於植物或植物製品中茶多酚含量的測定。5、按照權利要求1所述的試紙用於茶葉中茶多酚含量的測定。6、一種茶葉中茶多酚含量的測定方法，其特徵在於，包括如下步驟稱量待測茶葉，加入25—50倍體積95。C一100。C的水(g/mL)，浸提20分鐘製得待測溶液；取茶多酚檢測試紙滴加或蘸取待測溶液，在20秒一10分鐘內與標準比色卡比對，得出茶多酚含量。全文摘要本發明提供了一種茶多酚檢測試紙，是以鐵等過渡金屬鹽為顯色劑，以酒石酸、檸檬酸、草酸、氫氟酸、磺基水楊酸或它們中每一種的鉀鹽或鈉鹽或酒石酸鉀鈉為絡合劑，以可溶性澱粉、聚乙烯醇、瓊脂、聚丙烯醯胺凝膠或明膠為粘合劑製備而成。同時製備了茶多酚濃度標準比色卡。可根據待測樣品對檢測試紙的顯色與標準比色卡對比，快速目測茶多酚含量。這種檢測試紙適用於植物或植物製品中茶多酚含量的快速測定，特別適用於茶葉中茶多酚含量的測定。利用本發明檢測茶多酚的方法簡單、方便、快捷、成本低廉、易於實施推廣。文檔編號G01N21/77GK101294912SQ20081005504公開日2008年10月29日申請日期2008年6月4日優先權日2008年6月4日發明者史通麟,鵬田,川董,趙艮貴申請人:山西大學