鮑魚多糖的製備工藝的製作方法

2023-06-01 14:12:16 1

專利名稱：鮑魚多糖的製備工藝的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種貝類的多糖提取領域。
背景技術：
多糖是一類重要的生物活性物質，參與了細胞的各種生命現象的調節，可作為免 疫促進劑，能控制細胞的分裂和分化，調節細胞的生長和衰老。對腫瘤細胞起抑制作用，同 時對正常細胞無毒害作用。目前，關於鮑魚多糖提取的研究尚鮮見報導。國內大連工業大學 的朱蓓薇採用酶法成功地從鮑魚中提取了多糖，並通過動物實驗表明鮑魚多糖具有抗炎、 抗氧化、抗疲勞等功效。酶法提取雖然可以使後續的濃縮和脫蛋白工藝更簡易、省時，但主 要還是用於多糖的提取，且提取條件不易控制、得率偏低。海產類提取物時常含有一定量的重金屬，考慮到食品安全的需要，通常採用離子 交換樹脂的方法脫除重金屬，進行純化。但與此同時，樹脂活化和再生時強酸強鹼的使用會 造成環境汙染。採用電滲析技術去除重金屬，僅需使用少量電能，無需強酸強鹼，進而杜絕 了環境汙染，並且節約人力物力。

發明內容
本發明提供了一種鮑魚多糖的製備工藝。對鮑魚多糖的製備旨在提高鮑魚附加值。本發明的技術方案是它包括以下步驟
A)將新鮮鮑魚肉或臟器洗淨後，加入鮑魚肉或臟器重量的1-5倍的水後，打漿得到鮑 魚肉或臟器預處理液，進行B步驟；
B)低溫或常溫下將預處理液通過高壓脈衝電場處理後，得到PEF處理液，進行C步驟；
C)將經過高壓脈衝電場處理的處理液通過離心或過濾進行固液分離，去除沉澱物，得 清液，進行E步驟；
D)將離心或過濾後所得清液進行電滲析處理，以除去重金屬，通過每膜對的電壓為 0. 6-1. 0V，取淡相，進行E步驟；
E)將經過C步驟所得清液或經過D步驟所得淡相濃縮至可溶性固形物含量3%-10%，加 入濃縮液體積2. 5-4倍的乙醇，室溫下靜置8-12h，離心分離，沉澱物即為鮑魚多糖。與現有技術相比，本發明的突出優點是
本發明利用了高壓脈衝電場(PEF)提取技術，能夠最大限度地去除蛋白質等非多糖成 分，原料的利用率達到最大值；在保證高得率的同時操作均在低溫或常溫下進行，並有效縮 短了鮑魚多糖的提取時間，從而能充分保持多糖的生物活性，並提高生產效率，減少廢物對 環境的汙染。利用電滲析技術去除重金屬，簡單、高效、減少環境汙染，提高產品質量。
具體實施例方式本發明的鮑魚多糖的製備工藝主要分為原料處理、提取、純化和醇沉四個步驟。具體步驟如下
A)原料處理在0-30°C的常溫或低溫下，將新鮮鮑魚取肉或內臟衝洗乾淨，去除結締 組織，按照料液重量比1:1-1:5加入蒸餾水，打漿、過20-40目篩、攪勻，製備成鮑魚預處理液。B)提取(可採用以下四種方法中的任意一種方法)
①在常溫或低溫下，將鮑魚預處理液通過高壓脈衝電場處理，電場強度15-35kV/cm、頻 率200-3170Hz、脈寬1. 5μ s-17y s的高壓脈衝電場進行處理，處理時間300-1500 μ s，得 PEF處理液。C)步驟10000-20000g離心，去沉澱，取上清液。②在常溫或低溫下，將鮑魚預處理液通過高壓脈衝電場處理，電場強度 15-35kV/cm、頻率200-3170Hz、脈寬1. 5 μ s_17 μ s的高壓脈衝電場進行處理，處理時間 300-1500 μ S0將PEF處理液10000-20000g離心，去沉澱，取上清液。將HAc溶液環境下配 制的濃度為2%-5%的殼聚糖膠體溶液與上清液按照體積比1 10-1 20加入，30-50°C水浴， 攪拌10-30min，絮凝蛋白質，充分吸附蛋白質，進行粗蛋白的分離。C)步驟離心或過濾，取 清液。③在常溫或低溫下，將鮑魚預處理液通過高壓脈衝電場處理，電場強度 15-35kV/cm、頻率200-3170Hz、脈寬1. 5 μ s_17 μ s的高壓脈衝電場進行處理，處理時間 300-1500 μ S。將PEF處理液10000_20000g離心，去沉澱，取上清液。向上清液中加入中性 蛋白酶進行酶解，PH 6-8，加酶量為6.0*104-2.4*105u/kg，37-42°C，攪拌酶解，反應3-4h， 100°C迅速滅酶5min ；冷卻至室溫。C)步驟離心或過濾，取清液。D)純化將經過C步驟離心或過濾後所得清液進行電滲析處理，以除去重金屬，通 過每膜對的電壓為0. 6-1. 0V，取淡相；
E)醇沉將經過上述C步驟或D步驟所得上清液或淡相濃縮至可溶性固形物含量 3%-10%，加入濃縮液體積2. 5-4倍的乙醇，室溫下靜置8-12h，離心分離，沉澱物即為鮑魚多糖。本發明的技術方案按如下所述實現 實施例1
在10°C下，取IOkg洗淨、去結締組織的鮑魚肉或內臟，按料液比1:1加蒸餾水、打漿、 過40目篩、攪勻，製備成鮑魚預處理液。將鮑魚預處理液通過高壓脈衝電場處理，電場強 度15kV/cm，頻率3170Hz，脈寬1. 5 μ s，處理時間1500 μ s，得PEF處理液，在分離因數為 15160G的條件下離心，去沉澱，取上清液。將所得上清液濃縮至可溶性固形物含量至6%，按 料液體積的2. 5倍加入純度95%以上酒精，經1 靜置醇沉。醇沉後，進行沉降離心，取沉 澱，即為鮑魚多糖。經50°C冷凍乾燥得鮑魚多糖粉末210g。實施例2:
在20°C下，取IOkg洗淨、去結締組織的鮑魚肉或內臟，按料液比1:2加蒸餾水、打漿、 過40目篩、攪勻，製備成鮑魚預處理液。將鮑魚預處理液通過高壓脈衝電場處理，電場強 度20kV/cm，頻率1000Hz，脈寬2.0 μ s，處理時間1200 μ s，得PEF處理液。在分離因數為 15160G的條件下離心分離，去沉澱，取上清液。採用40個膜對的膜堆，通過電壓MV，對上 清液進行電滲析處理，取淡相。將淡相處理液濃縮到可溶性固形物含量至6%，按料液體積的 2. 6倍加入純度85%以上酒精，經Ilh靜置醇沉。醇沉後，進行沉降離心，取沉澱，即為鮑魚多糖。經50°C冷凍乾燥得鮑魚多糖粉末194g。樣品經檢測，重金屬含量為7. Oppm，對比實 施例1降低三分之二。實施例3:
在30°C下，取IOkg洗淨、去結締組織的鮑魚肉或內臟，按料液比1:4加蒸餾水、打漿、 過20目篩、攪勻，製備成鮑魚預處理液。將鮑魚預處理液通過高壓脈衝電場處理，電場強度 25kV/cm,頻率1500Hz，脈寬5. O μ s，處理時間800 μ s，得PEF處理液。在分離因數為15160G 的條件下離心分離，去沉澱，取上清液。將質量分數為3%的殼聚糖膠體溶液(體積分數3% 的HAc溶液環境下配製)與PEF處理液體積比1 10加入，並30°C水浴，攪拌、溶解30min， 充分吸附絮凝蛋白質。在分離因數為15160G的條件下離心，去沉澱，分離粗蛋白。採用40 個膜對的膜堆，通過電壓^V，進行電滲析處理，取淡相。將淡相處理液濃縮到可溶性固形 物含量至6%，按料液體積的3倍加入純度75%以上酒精，經IOh靜置醇沉。醇沉後，進行沉 降離心，取沉澱，即為鮑魚多糖。經50°C冷凍乾燥得鮑魚多糖粉末175g。樣品經檢測，重金 屬含量為5. Oppm，對比實例一降低四分之三。實施例4:
在1°C下，取IOkg洗淨、去結締組織的鮑魚肉或內臟，按料液比1:4加蒸餾水、打漿、過 40目篩、攪勻，製備成鮑魚預處理液。將鮑魚預處理液通過高壓脈衝電場處理，電場強度 30kV/cm,頻率500Hz，脈寬8.0 μ s，處理時間500 μ s，得PEF處理液。在分離因數為15160G 的條件下離心分離，去沉澱，取上清液。向上述處理液中加入中性蛋白酶進行酶解，PH 7， 加酶量為6. 0*104u/kg，40°C水浴，攪拌酶解，反應汕後，100°C迅速滅酶5min (滅酶工藝為 現有技術，可採用溫度95-100°C、時間2-10 min內的任意值)。冷卻至室溫，在分離因數為 15160G的條件下離心，取上清液，得鮑魚多糖酶解液。採用40個膜對的膜堆，通過電壓36V， 進行電滲析處理，取淡相。將淡相處理液濃縮到可溶性固形物含量至6%，按料液體積的3. 5 倍加入純度95%以上酒精，經9h靜置醇沉。醇沉後，進行沉降離心，取沉澱，即為鮑魚多糖。 經50°C冷凍乾燥得鮑魚多糖粉末155g。樣品經檢測，重金屬含量為5. Oppm，對比實例一降 低四分之三。實施例5:
在10°C下，取IOkg洗淨、去結締組織的鮑魚肉或內臟，按料液比1:5加蒸餾水、打漿、 過40目篩、攪勻，製備成鮑魚預處理液。將鮑魚預處理液通過高壓脈衝電場處理，電場強度 35kV/cm,頻率200Hz，脈寬17. 0 μ s，處理時間300 μ s，得PEF處理液。在分離因數為15160G 的條件下離心分離，去沉澱，取上清液。向上述處理液中加入中性蛋白酶進行酶解，PH 7，加 酶量為1.2*105u/kg，40°C水浴，攪拌酶解，反應3h後，100°C迅速滅酶5min。冷卻至室溫， 板框過濾，取濾液，得鮑魚多糖酶解液。採用40個膜對的膜堆，通過電壓40V，進行電滲析 處理，取淡相。將淡相處理液濃縮到可溶性固形物含量至6%，按料液體積的4. 0倍加入純 度95%以上酒精，經他靜置醇沉。醇沉後，進行沉降離心，取沉澱，即為鮑魚多糖。經噴霧 乾燥得鮑魚多糖粉末148g。樣品經檢測，重金屬含量為5. Oppm，對比實例一降低四分之三。
權利要求
1.一種鮑魚多糖的製備工藝，其特徵在於它包括以下步驟A)將新鮮鮑魚肉或臟器洗淨後，加入鮑魚肉或臟器重量的1-5倍的水後，打漿得到鮑 魚肉或臟器預處理液，進行B步驟；B)低溫或常溫下將預處理液通過高壓脈衝電場處理後，得到PEF處理液，進行C步驟；C)將上述步驟的處理液離心或過濾分離，去除沉澱物，得上清液，進行E步驟；D)將經過C步驟離心或過濾後所得清液進行電滲析處理，以除去重金屬，通過每膜對 的膜堆電壓為0. 6-1. 0V，取淡相，進行E步驟；E)將經過C步驟所得清液或經過D步驟所得淡相濃縮至可溶性固形物含量3%-10%，加 入濃縮液體積2. 5-4倍的乙醇，室溫下靜置8-12h，離心分離，沉澱物即為鮑魚多糖。
2.根據權利要求1所述的鮑魚多糖的製備工藝，其特徵在於所述的高壓脈衝電場處 理的方法是在0-30°C的溫度下，將鮑魚肉或臟器預處理液通過電場強度15-35kV/cm、頻 率200-3170Hz、脈寬1. 5μ s-17y s的高壓脈衝電場進行處理，處理時間300-1500 μ S。
3.根據權利要求1或2所述的鮑魚多糖的製備工藝，其特徵在於它還包括Bl步驟， 所述的Bl步驟位於B步驟之後、C步驟之前，所述的Bl步驟為向B步驟所得的上清液中 加入殼聚糖膠體溶液，將HAc溶液環境下配製的濃度為2%-5%的殼聚糖膠體溶液與PEF處 理液按照體積比1:10-1:20加入，30-50°C水浴，攪拌10-30min，充分吸附絮凝蛋白質；離心 或過濾，分離粗蛋白，取清液。
4.根據權利要求1或2所述的鮑魚多糖的製備工藝，其特徵在於它還包括B2步驟， 所述的B2步驟位於B步驟之後、C步驟之前，所述的B2步驟為向B步驟所得的上清液中 加入中性蛋白酶進行酶解，在PH 6-8、加酶量為6. 0*104-2. 4*105u/kg、37_42°C的條件下攪 拌酶解，反應3-4h，95°C -100°C迅速滅酶5min ；冷卻至室溫，離心或過濾，取清液，然後再進 行C步驟。
5.根據權利1所述的鮑魚多糖的製備工藝，其特徵在於將E步驟所得的鮑魚多糖經 過乾燥得鮑魚多糖粉末。
全文摘要
本發明涉及一種鮑魚多糖的製備工藝，它包括以下步驟①將洗淨的鮑魚肉或臟器打漿得到鮑魚預處理液，常溫下採用高壓脈衝電場處理；②採用殼聚糖對PEF處理後的鮑魚料液進行絮凝除去粗蛋白，以提高多糖純度；③採用電滲析技術對預處理液進行處理，有效脫去重金屬；④採用乙醇沉澱製備鮑魚多糖。本發明大幅度提高了多糖得率，在保證所得多糖的生物活性的同時，解決了傳統酶法提取工藝多糖得率低的難題。
文檔編號C08B37/00GK102140141SQ20111012316
公開日2011年8月3日 申請日期2011年5月13日 優先權日2011年5月13日
發明者餘鑫, 盧曉燕, 方婷, 羅曉航, 陳錦權 申請人:漳州歐聖食品有限公司, 陳錦權