一種蓽茇組織培養的快速繁殖方法

2023-05-26 16:33:56

一種蓽茇組織培養的快速繁殖方法
【專利摘要】本發明研究了一種蓽茇組織培養的快速繁殖方法，包括蓽茇無菌外植體的獲得、愈傷組織的誘導、愈傷組織的分化、生根培養、煉苗移栽等步驟，本發明方法所製備的蓽茇生產周期短，增值率高，可以在短期內獲得大量的蓽茇幼苗。
【專利說明】 一種蓽茇組織培養的快速繁殖方法

【技術領域】
[0001]本發明涉及蓽茇組織培養的快繁方法，屬於植物【技術領域】。

【背景技術】
[0002]胃，Piper longum L.，又名:蓽撥梨、阿梨訶他、椹聖，胡椒科，攀援藤本，長達數米；枝有粗縱稜和溝槽，幼時被極細的粉狀短柔毛，毛很快脫落。原產熱帶，喜高溫潮溼氣候，中國主產地雲南省盈江縣，年平均氣溫19.3°C，最低月平均氣溫11.6°C，極端顯低氣溫-1.2°C。幼苗需適度遮蔭，否則因光照太強抑制生長，影響產量。花果期需充足光照。宜選山間、盆地、溝邊溼潤、疏鬆、肥沃的壤上種植。產於雲南東南至西南部，廣西、廣東和福建有栽培。生子疏蔭雜木林中，海拔約580米。尼泊爾、印度、斯裡蘭卡、越南及馬來西亞也有分布。用於脘腹冷痛、嘔吐、洩瀉、偏頭痛、鼻淵、外治牙痛、冠心病、心絞痛。治心腹冷痛，嘔吐吞酸，腸鳴洩瀉，冷痢，陰疝，頭痛，鼻淵，齒痛，用扦插、壓條繁殖。


【發明內容】

[0003]本發明所要解決的技術問題是提供一種蓽茇的快速繁殖方法，由該方法所製備的蓽茇，生產周期短，增殖率高，可以短期內獲得大量的蓽茇幼苗。
[0004]本發明所要解決的技術問題是通過以下方案來實現的:
取蓽發幼嫩的葉片，流水衝洗18min,超淨工作檯上10%的次氯酸鈉處理1min,無菌水衝洗6次，消毒處理過的蓽茇幼嫩葉片接入MS+6-BA0.5mg/L+2,4-Dlmg/L+10%蘋果汁培養基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，溫度26±2°C，溼度75%，誘導出來的愈傷組織放入培養基1/2MS+6-BA0.5mg/L+ABA0.1-0.2mg/L進行愈傷組織分化培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照18001x，溫度26±2°C，30天後開始分化變綠的愈傷組織逐漸形成不定芽，分化出來的3-4cm的芽接入培養基1/2MS+KT1-1.2mg/L+NAAl-l.2mg/L 中進行生根誘導，附加蔗糖 20g/L，瓊脂 6g/L，pH5.8，光照10000lx，溫度26 ±2°C，分化出來的芽接入生根培養基培養I周后，誘導出根，待10天後每株長出5條根,根長約3cm,植株健壯,葉色濃綠,去掉蓋子，實驗室煉苗4天,洗去培養基，移栽到花盆中放入溫控培養箱中培養。
[0005]採用本發明製備的蓽茇成活率高，周期短，產量大，汙染小，利於大規模種植。
[0006]下面將結合【具體實施方式】對本發明作進一步闡述，但本發明要求保護的範圍並不局限於下列實施方式。

【具體實施方式】
[0007]實施例1
取蓽發幼嫩的葉片，流水衝洗18min,超淨工作檯上10%的次氯酸鈉處理1min,無菌水衝洗6次，消毒處理過的蓽茇幼嫩葉片接入MS+6-BA0.5mg/L+2,4-Dlmg/L+10%蘋果汁培養基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，溫度26±2°C，溼度75%，誘導出來的愈傷組織放入培養基1/2MS+6-BA0.5mg/L+ABA0.lmg/L進行愈傷組織分化培養，附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L，ρΗ5.8，光照18001χ，溫度26 ±2。。，30天後開始分化變綠的愈傷組織逐漸形成不定芽，分化出來的3-4cm的芽接入培養基l/2MS+KTlmg/L+NAAlmg/L中進行生根誘導，附加蔗糖20g/L,瓊脂6g/L，ρΗ5.8，光照ΙΟΟΟΟΙχ,溫度26±2°C，分化出來的芽接入生根培養基培養I周后，誘導出根，待10天後每株長出5條根，根長約3cm，植株健壯，葉色濃綠，去掉蓋子，實驗室煉苗4天，洗去培養基，移栽到花盆中放入溫控培養箱中培養，成活率88%。
[0008]實施例2
取蓽發幼嫩的葉片，流水衝洗18min,超淨工作檯上10%的次氯酸鈉處理1min,無菌水衝洗6次，消毒處理過的蓽茇幼嫩葉片接入MS+6-BA0.5mg/L+2,4-Dlmg/L+10%蘋果汁培養基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，溫度26±2°C，溼度75%，誘導出來的愈傷組織放入培養基1/2MS+6-BA0.5mg/L+ABA0.2mg/L進行愈傷組織分化培養，附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L，ρΗ5.8，光照18001χ，溫度26 ±2。。，30天後開始分化變綠的愈傷組織逐漸形成不定芽，分化出來的3-4cm的芽接入培養基1/2MS+KT1.2mg/L+NAA1.2mg/L中進行生根誘導，附加蔗糖20g/L,瓊脂6g/L，ρΗ5.8，光照ΙΟΟΟΟΙχ,溫度26±2°C，分化出來的芽接入生根培養基培養I周后，誘導出根，待10天後每株長出5條根，根長約3cm，植株健壯，葉色濃綠，去掉蓋子，實驗室煉苗4天，洗去培養基，移栽到花盆中放入溫控培養箱中培養，成活率91%。
[0009]實施例3
取蓽發幼嫩的葉片，流水衝洗18min,超淨工作檯上10%的次氯酸鈉處理1min,無菌水衝洗6次，消毒處理過的蓽茇幼嫩葉片接入MS+6-BA0.5mg/L+2,4-Dlmg/L+10%蘋果汁培養基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，溫度26±2°C，溼度75%，誘導出來的愈傷組織放入培養基1/2MS+6-BA0.5mg/L+ABA0.2mg/L進行愈傷組織分化培養，附加蔗糖30g/L,瓊脂6.5g/L，ρΗ5.8，光照18001χ，溫度26 ±2。。，30天後開始分化變綠的愈傷組織逐漸形成不定芽，分化出來的3-4cm的芽接入培養基1/2MS+KT1.2mg/L+NAAlmg/L中進行生根誘導，附加蔗糖20g/L,瓊脂6g/L，ρΗ5.8，光照ΙΟΟΟΟΙχ,溫度26±2°C，分化出來的芽接入生根培養基培養I周后，誘導出根，待10天後每株長出5條根，根長約3cm，植株健壯，葉色濃綠，去掉蓋子，實驗室煉苗4天，洗去培養基，移栽到花盆中放入溫控培養箱中培養，成活率89%。
【權利要求】
1.一種蓽茇組織培養的快速繁殖方法，包括蓽茇無菌外植體的獲得、愈傷組織的誘導、愈傷組織的分化、生根培養、煉苗移栽，其主要步驟如下: (1)取蓽茇幼嫩的葉片，對其進行消毒處理； (2)取步驟(I)消毒處理過的蓽茇幼嫩葉片接入MS+6-BA0.5mg/L+2,4-Dlmg/L+10%蘋果汁培養基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，溫度26±2°C，溼度 75%; (3)取步驟(2)誘導出來的愈傷組織放入培養基1/2MS+6-BA0.5mg/L+ABA0.1-0.2mg/L進行愈傷組織分化培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照18001x，溫度26±2°C，30天後開始分化變綠的愈傷組織逐漸形成不定芽； (4)取步驟(3)分化出來的3-4cm的芽接入培養基1/2MS+KT1-1.2mg/L+NAAl-l.2mg/L中進行生根誘導，附加蔗糖20g/L，瓊脂6g/L，pH5.8，光照ΙΟΟΟΟΙχ，溫度26±2°C ； (5)取步驟(4)生根的試管苗進行煉苗移栽。
2.按照權利要求1所述的一種蓽茇組織培養的快速繁殖方法，其特徵在於:步驟(I)中所述蓽茇無菌葉片的獲得為，取蓽茇幼嫩的葉片，流水衝洗18min，超淨工作檯上10%的次氯酸鈉處理lOmin，無菌水衝洗6次。
3.按照權利要求1所述的一種蓽茇組織培養的快速繁殖方法，其特徵在於:步驟(2)中蓽茇愈傷組織的誘導中附加了蘋果汁，可以促進愈傷組織的誘導和分化。
4.按照權利要求1所述的一種蓽茇組織培養的快速繁殖方法，其特徵在於:步驟(3)中蓽茇愈傷組織的分化中附加了 ABA，可以促進愈傷組織的分化。
5.按照權利要求1所述的一種蓽茇組織培養的快速繁殖方法，其特徵在於:步驟(4)中蓽茇的煉苗移栽方法為分化出來的芽接入生根培養基培養I周后，誘導出根，待10天後每株長出5條根,根長約3cm,植株健壯,葉色濃綠,去掉蓋子，實驗室煉苗4天,洗去培養基，移栽到花盆中放入溫控培養箱中培養。
【文檔編號】A01H4/00GK104160968SQ201410463167
【公開日】2014年11月26日 申請日期:2014年9月12日 優先權日:2014年9月12日
【發明者】楊存 申請人:南京通澤農業科技有限公司