一種檢測養殖場黴菌毒素的膠體金讀卡儀的製作方法
2023-12-12 23:32:57
本發明涉及膠體金試紙技術領域，具體地，涉及一種檢測養殖場黴菌的膠體金讀卡儀。
背景技術：
膠體金是由氯金酸(HAuC14)在還原劑如白磷、抗壞血酸、鞣酸等作用下，合成一定大小的金顆粒，並由於靜電作用成為一種穩定的膠體狀態，形成帶負電的疏水膠溶液，由於靜電作用而成為穩定的膠體狀態，故稱膠體金。免疫金標記技術主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性，在金標蛋白結合處，在顯微鏡下可見黑褐色顆粒，當這些標記物在相應的配體處大量聚集時，肉眼可見紅色或粉紅色斑點，因而用於定性或半定量的快速免疫檢測方法中。
黴菌是一種多細胞微生物，廣泛存在於自然界中，在微生物學上屬於真菌，黴菌毒素是由黴菌產生的有毒有害物質。在土壤中，在植物上，包括穀物、飼草和青貯飼料均可發現黴菌毒素。高溫高溼的環境條件通常有利於飼料中黴菌的繁殖和黴菌毒素的產生。黴菌毒素對動物的危害是世界性的問題，中國是農業大國，但中國種殖業比重較大的是農戶散養或者小型養殖場養殖，規模分散，黴菌毒素類疫病防治水平和生產管理能力落後，在發生疫病流行時，難以有效控制。黴菌毒素的傳統實驗檢測也存在程序複雜、檢測時間長的技術問題，檢測結果出來後產品已經銷售或轉移，無法及時處理，無法滿足現場檢測需要及時、高效、快速的需要。
技術實現要素：
針對上述現有技術存在的不足，本發明提供了一種檢測養殖場黴菌毒素的膠體金讀卡儀，以解決上述技術問題。
本發明通過以下技術方案實現：
一種檢測養殖場黴菌毒素的膠體金讀卡儀，包括膠體金試紙讀卡腔，膠體金試紙的圖像採集裝置；所述圖像採集裝置還包括微處理器，所述微處理器還包括通訊模塊、圖像傳感器和冷光源，所述微處理器還包括顯示系統，所述微處理器通過通訊模塊與智能終端連接通信；所述膠體金試紙讀卡腔應放置與微處理器內置程序對應的黴菌毒素膠體金試紙。
優選地，所述微處理器還包括USB接口模塊，USB模塊與微處理器連接，兼具電源線和數據線的作用。
優選地，所述顯示系統包括LED顯示屏和控制面板；所述通訊模塊為WIFI模塊；所述智能終端為智慧型手機或者平板電腦。
相對於現有技術，本發明的有益效果：
1、本發明的膠體金讀卡儀利用利用圖像傳感器採集膠體金試紙的顯色結果，可以避免人為評估帶來的誤差，導致檢測結果出現誤差。
2、本發明的膠體金讀卡儀根據讀卡儀測出的檢測線T線的顯色強度和C線的顯色強度比值控制和待測黴菌毒素樣品中黴菌毒素的含量呈相關定量涵數關係，根據預設的內標準曲線算出檢測結果，同一批次的檢測結果使用同樣的評價體系，有利於檢測結果的穩定性。
附圖說明
此處的附圖被併入說明書中並構成本說明書的一部分，示出了符合本發明的實施例，並與說明書一起用於解釋本發明的原理。
圖1是本發明的結構方框示意圖。
具體實施方式
結合以下實施例對本發明作進一步描述。
圖1是本發明的結構方框示意圖，如圖1所示。
一種檢測養殖場黴菌毒素的膠體金讀卡儀，包括膠體金試紙讀卡腔，膠體金試紙的圖像採集裝置；所述圖像採集裝置還包括微處理器，所述微處理器還包括通訊模塊、圖像傳感器和冷光源，所述微處理器還包括顯示系統，所述微處理器通過通訊模塊與智能終端連接通信；所述膠體金試紙讀卡腔應放置與微處理器內置程序對應的黴菌毒素膠體金試紙。
所述檢測養殖場黴菌毒素的膠體金讀卡儀的定量檢測結果為根據讀卡儀測出的檢測線T線的顯色強度和C線的顯色強度比值控制和待測黴菌毒素樣品中黴菌毒素的含量呈相關定量涵數關係，設置為儀器的內標準曲線，該手持式讀卡儀器通過成像系統測量C/T線的反射光強度，y＝ax-m，其中y代表T/C值，x代表濃度；n代表斜率；m代表位移。
優選地，所述微處理器還包括USB接口模塊，USB模塊與微處理器連接，兼具電源線和數據線的作用。
優選地，所述顯示系統包括LED顯示屏和控制面板；所述通訊模塊為WIFI模塊；所述智能終端為智慧型手機或者平板電腦。
本發明的膠體金讀卡儀利用利用圖像傳感器採集膠體金試紙的顯色結果，可以避免人為評估帶來的誤差，導致檢測結果出現誤差；本發明還可以與智能終端連接，複合現在的工作和生活習慣，可以讓檢測人員方便地將讀卡數據儲存或者在線發送，實現線下實驗，線上分析的科研模式，有利於提高工作效率。
由於膠體金試紙上包被有待測物的抗體和抗原，抗體和抗原通常都是一些蛋白質，蛋白質一般都是不耐高溫，如果高溫照射膠體金試紙，可能會導致試紙上的蛋白質變性，影響試紙的顯色異常，導致實驗結果不準確。所以在選擇光源時候，優先選擇一些發熱量較小的光源。
更優選地，所述圖像傳感器為CMOS攝像頭或CCD圖像傳感器，所述冷光源為100-150W的普通滷素燈光源或者400-600W的高壓氙燈光源。
優選地，所述黴菌毒素膠體金試紙標記黴菌毒素類單克隆抗體和血清蛋白，可以檢測黃麴黴B2、黃麴黴G1、黃麴黴G2、黃麴黴F2毒素和串珠鐮孢菌毒素。
以下將詳細介紹黴菌毒素膠體金試紙組成及製備過程：
所述黴菌毒素膠體金試紙包括底板、樣品層，膠體金層，反應膜和吸水墊組成，膠體金墊上吸附有膠體金標記的黴菌毒素類單克隆抗體和動物血清蛋白，反應膜上包被有檢測抗原和質量控制抗體，檢測抗原顯示為檢測線T，為黴菌毒素類抗原；質量控制抗體顯示為質控線C，為羊抗鼠IgG抗體。
檢測原理：本發明的黴菌毒素膠體金試紙基於膠體金雙抗夾心技術，檢測卡的硝酸纖維膜上預先包被了黴菌毒素抗原(T線)和羊抗鼠IgG抗體(C線)。其中T線為檢測線，C線為質控線。金標抗原特異性結合黴菌毒素抗體，T線顯色深度隨黴菌毒素抗體濃度呈線性改變，通過膠體金讀卡儀測出樣本中黴菌毒素抗體效價高低。
本實施例的檢測線設置1-3條，質控線設置1-3條。
作為優選地，本實施例的檢測線設置2條，質控線設置2條。
檢測線之間的差距較大，可能會導致結果出現差異，為了能更好的控制膠體金的層析時間差，兩條檢測線之間的距離為3.5～5.5mm。
檢測線和質控線的距離也會影響層析的結果，間距太大會增長檢測時間；間距太短，膠體金過度聚集會引起檢測線和質控線一起被覆蓋，影響後續檢測儀讀取顯色結果。
優選地，檢測線和質控線間距控制在11-15mm，優選間距為13mm。
所述檢測線中黴菌毒素類抗原質量濃度0.2-0.6mg/ml，優化濃度0.3-0.4mg/ml
所述膠體金的顆粒大小控制在60-100nm範圍內，優化為90nm，膠體金濃度為1.35％的濃度。
所述黴菌毒素膠體金試紙的樣品層、膠體金層、反應膜和吸水墊從左到右，從上至下依次結合，每一層均與相鄰的層端部重疊。
與現有技術相比，本發明的膠體金試紙具有以下有益效果：
1、本發明中的試劑盒檢測時間快、方便、穩定、且準確，適合範圍廣。
2、本發明不僅可以實現定性檢測，還可以實現定量檢測。實驗結果通過讀卡儀來讀取顯色結果，減少人為評估帶來的誤差。
3、本發明的檢測方法，不需要對樣品進行複雜的預處理，操作步驟簡短，不需要使用大型昂貴儀器，不受實驗儀器條件限制，有利於檢測的現場進行，有利於實驗設置落後的基層單位開展實驗。
4、本發明的膠體金試紙的檢測結果比實際樣本的檢測結果很接近，樣品檢測結果與真實結果的準確性都控制在96％左右；重複檢測結果的平均偏差CV％控制在15％以內，說明膠體金試劑條的檢測結果的準確性較高，能適用於市場需求達到的產品質量及符合現場大量樣品篩選能選用的定量膠體金試劑條。
實驗例
本發明的膠體金試紙與HPLC法對比，檢測不同的樣品中的相同黴菌毒素，膠體金試紙檢測為實驗組，HPLC法為對照組，每個處理重複3次，實驗結果取平均值，結果如表1所示。
表1膠體金試紙與HPLC法檢測結果對比數據表
根據質譜聯用檢測樣本後的數據與膠體金定量試劑條對比結果來看，膠體金的檢測結果比實際樣本的檢測結果很接近，樣品檢測結果與真實結果的準確性都控制在96％左右；重複檢測結果的平均偏差CV％控制在15％以內，說明膠體金試劑條的檢測結果的準確性較高，能適用於市場需求達到的產品質量及符合現場大量樣品篩選能選用的定量膠體金試劑條。
最後應當說明的是，以上實施例僅用以說明本發明的技術方案，而非對本發明保護範圍的限制，儘管參照較佳實施例對本發明作了詳細地說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發明技術方案的實質和範圍。