一種植物組培消毒方法
2023-08-09 00:34:26
專利名稱：一種植物組培消毒方法
技術領域：
本發明涉及一種植物組培外植體的消毒方法，屬於植物組培技術領域。
背景技術：
植物組織培養技術近幾年發展很快，已經成為名優植物工廠化育苗技術的重要手段之一。國內外對植物組織培養重視，其原因在於，從一個優良植物株選取組織、器官、作為培養材料，通過人為物理、化學等環境的調節，可以有計劃的在短期內，培育多株遺傳特性相同的優良種苗。植物組培外植體的消毒，屬於植物組培技術領域中不可缺少的首要環節，是組織培養成敗的第一要素。但是，由於植物材料的消毒較難掌握，名優植物材料消毒實踐中出現的問題是，消毒時間長了植物材料死亡，消毒時間短了植物材料表面細菌不能殺死，致使植物材料汙染死亡。
發明內容
本發明的目的在於提供一種毒副作用小，操作簡便，適應範圍寬消毒效果好的方法及消毒劑組合物。
本發明的技術方案是這樣實現的這種植物組培消毒方法，其特徵在於將植物的種子清洗乾淨或植物材料剪成帶葉芽的莖段，洗去表面汙垢，用組成至少包括如下比例的次氯酸鈉1-3％，氯化汞0.05-0.5％，水餘量的消毒劑浸泡5-30分鐘。
所述的植物組培消毒方法，消毒劑中次氯酸鈉與氯化汞的應用比例為1-3∶0.1。
所述的植物組培消毒方法，消毒劑中含有過氧化氫3-10％。
所述的植物組培消毒方法，消毒劑中的水經過1.2kg/cm2，121℃，30分鐘的高壓消毒處理。
所述的植物組培消毒方法，植物組培材料在消毒劑中的浸泡時間包括，水稻、小麥種子20～30分鐘，木本植物6～15分鐘，草本植物5～10分鐘。
所述的植物組培消毒方法，種子去殼後浸泡在消毒劑中用搖床振蕩30分鐘消毒。
所述的植物組培消毒方法，於植物莖段或莖尖用流水衝洗表面汙垢，用70％酒精衝洗一次，再用消毒劑浸泡5-10分鐘。
本發明的植物組培消毒方法的適用範圍比較廣，不僅適用於裸露的種子，同時對木本植物，草本植物，藥用植物都顯示了很好的效果。尤其是對一些國外引進的名優資源，使用該方法以毒副作用小，效果明顯等優勢，為名優資源保存利用提供了有利的保障。
具體實施例方式
下面結合本發明的植物組培消毒方法的應用實例，說明本發明的具體實施方式
。
1、消毒器皿準備選取200mL的三角瓶，使用前衝洗乾淨，用塑料膜封口，經高壓消毒後備用。
2、消毒劑的準備分別配製0.1％氯化汞(重量％)溶液，1％、2％、3％的次氯酸鈉(重量％)溶液，5％、10％的過氧化氫(體積％)溶液，使用前按需要比例混合；經高壓消毒的無菌水。
3、器械的準備消毒濾紙、手術刀、剪刀、鑷子等。
實施例1將水稻種子去殼後放到150mL三角瓶中，用無菌水衝洗一遍，加入次氯酸鈉∶氯化汞為的3∶0.1消毒劑，置於搖床震蕩30分鐘，用無菌水衝洗3～4遍，接種到培養基中，在暗培養環境25～27℃的條件下，3天即可出芽，消毒效果100％。
實施例2從田間取轉基因油麻新鮮莖尖，用流水從洗表面汙垢，用70％酒精衝一次，加入次氯酸鈉∶氯化汞為2∶0.1的消毒劑浸泡，消毒時間為5～10分鐘，無菌水衝洗至清，而後選擇帶芽點或葉圓基的材料，剪成0.5cm的莖段或莖尖，接種到已經備好的培養基中，材料的消毒效果95％以上，培養3～5天長出新芽。
實施例3從田間取轉基因油麻新鮮莖尖，用流水從洗表面汙垢，用70％酒精衝一次，加入過氧化氫∶次氯酸鈉∶氯化汞為5∶1∶0.1的消毒劑浸泡，消毒時間為10～15分鐘，無菌水衝洗至清，而後選擇帶芽點或葉圓基的材料，剪成0.5cm的莖段或莖尖，接種到已經備好的培養基中，材料的消毒效果95％以上，培養3～5天長出新芽。
實施例4選取驅蚊草莖段或莖尖，用首先流水衝洗，然後用70％酒精10秒，加入次氯酸鈉∶氯化汞為2∶0.1的消毒劑浸泡，消毒時間為5～8分鐘，最後用備好的無菌水衝洗至清，用已消毒手術刀分割成0.5cm左右，接種到所需培養基中，採用該方法消毒效果達95％以上。
實施例5霍霍巴試管汙染苗的消毒，根據汙染程度不同，首先用無菌水衝洗，再用70％酒精消毒，加入次氯酸鈉∶氯化汞為2∶0.1的消毒劑浸泡，消毒時間為6～10分鐘，用無菌水衝洗至清，用濾紙吸去多餘水分，接種到相應的培養基中，消毒效果可以達到90％以上。
實施例5草櫻花的消毒，選取草櫻花的莖段，經流水衝洗去表面塵土，70％酒精消毒10秒，加入次氯酸鈉∶氯化汞為1∶0.1的消毒劑浸泡，消毒時間為5～8分鐘，用無菌水衝洗至清，用濾紙吸去多餘水分，接種到相應的培養基中，消毒效果可以達到90％以上；在正常的培養條件下，5天可以觀察到新的生長點。
實施例6珠美海棠試管苗的消毒，用流水從洗表面汙垢，用70％酒精衝一次，加入過氧化氫∶氯化汞為10∶0.1的消毒劑浸泡，消毒時間為15～20分鐘，無菌水衝洗至清，而後選擇帶芽點或葉圓基的材料，剪成0.5cm的莖段或莖尖，接種到已經備好的培養基中，材料的消毒效果95％以上，培養3～5天長出新芽。
權利要求
1.一種植物組培消毒方法，其特徵在於將植物的種子清洗乾淨或植物材料剪成帶葉芽的莖段，洗去表面汙垢，用組成至少包括如下比例的次氯酸鈉1-3％，氯化汞0.05-0.5％，水餘量的消毒劑浸泡5-30分鐘。
2.根據權利要求1所述的植物組培消毒方法，其特徵在於消毒劑中次氯酸鈉與氯化汞的應用比例為1-3∶0.1。
3.根據權利要求1所述的植物組培消毒方法，其特徵在於消毒劑中含有過氧化氫3-10％。
4.根據權利要求1所述的植物組培消毒方法，其特徵在於消毒劑中的水經過1.2kg/cm2，121℃，30分鐘的高壓消毒處理，。
5.根據權利要求1所述的植物組培消毒方法，其特徵在於植物組培材料在消毒劑中的浸泡時間包括，水稻、小麥種子20～30分鐘，木本植物6～15分鐘，草本植物5～10分鐘。
6.根據權利要求5所述的植物組培消毒方法，其特徵在於種子去殼後浸泡在消毒劑中用搖床振蕩30分鐘消毒。
7.根據權利要求1所述的植物組培消毒方法，其特徵在於植物莖段或莖尖用流水衝洗表面汙垢，用70％酒精衝洗一次，再用消毒劑浸泡5-10分鐘。
全文摘要
本發明提供一種植物組培消毒方法，其特徵在於將植物的種子清洗乾淨或植物材料剪成帶葉芽的莖段，洗去表面汙垢，用組成至少包括如下比例的次氯酸鈉1－3％，氯化汞0.05－0.5％，水餘量的消毒劑浸泡5－30分鐘。本發明的植物組培消毒方法的適用範圍比較廣，不僅適用於裸露的種子，同時對木本植物，草本植物，藥用植物都顯示了很好的效果。尤其是對一些國外引進的名優資源，使用該方法以毒副作用小，效果明顯等優勢，為名優資源保存利用提供了有利的保障。
文檔編號A61L2/18GK1561695SQ200410012209
公開日2005年1月12日 申請日期2004年3月26日 優先權日2004年3月26日
發明者王玉珍, 羅景蘭, 史印山, 徐進 申請人:中國科學院遺傳與發育生物學研究所