植物乳桿菌發酵液和納米氧化鋅抑菌組合物的製作方法
2023-07-14 00:19:21 3
植物乳桿菌發酵液和納米氧化鋅抑菌組合物的製作方法
【專利摘要】本發明公開了植物乳桿菌發酵液和納米氧化鋅抑菌聯合物，屬於醫藥領域。抑菌組合物中植物乳桿菌發酵液與納米氧化鋅兩者合用對抑制大腸桿菌O157、臘樣芽胞桿菌起到聯合抑菌的作用。本發明的一種植物乳桿菌發酵液與納米氧化鋅抑菌混合物與現有的技術相比，解決了常規抑菌方法中納米氧化鋅用難以溶於水的問題，同時採用兩種抑菌物質減少了微生物耐酸的發生機率、降低了其對人體的毒性，更加安全。
【專利說明】植物乳桿菌發酵液和納米氧化鋅抑菌組合物
【技術領域】
[0001]本發明屬於醫藥領域，尤其涉及一種抑菌混合物。
【背景技術】
[0002]無機抗菌劑及其製品，以具有安全、可靠、穩定和持久的抗菌性能等獨特的功能，成為當前抗菌材料領域的研究開發熱點，並普遍受到人們的關注，成為大家主要研究的對象。其中納米氧化鋅為白色固體，穩定性好，高溫下不變色、不分解、價格低廉、資源豐富，己成為無機抗菌劑研究的熱點之一，同時鋅元素為動物和人體內的必需元素，其在體內具有廣泛的生理、生化功能，同時也被稱為「生命元素」。納米氧化鋅作為抑菌劑在醫學領域已引起廣泛關注。
[0003]納米氧化鋅製成抑菌劑需製成液體，但納米氧化鋅難以溶於水，以至於難以體現其抑菌性能。
【發明內容】
[0004]針對納米氧化鋅難以溶於水以至於難以體現其抑菌性能的問題，本發明人經過大量實驗，植物乳桿菌 發酵液能增強納米氧化鋅的溶解度。此外，植物乳桿菌代謝能產生有機酸、雙乙醯、過氧化氫和細菌素等物質，這些物質也能夠抑制病原菌和腐敗菌，故植物乳桿菌發酵液也能增強納米氧化鋅的抑菌性能，同時使微生態製劑具有特殊保健功能。本發明的目的在於提供一種植物乳桿菌和納米氧化鋅混合物，提高納米氧化鋅的溶解度，減少微生物耐藥性的產生。
[0005]本發明提供如下技術方案:
一種植物乳桿菌發酵液和納米氧化鋅抑菌組合物，含有植物乳桿菌發酵液、納米氧化
鋅；
所述植物乳桿菌發酵液製備包括如下步驟:取植物乳桿菌單菌落接種於5mL的MRS培養液中，厭氧培養至菌濃度在IO8 CFU/mL的植物乳桿菌發酵液；所述納米氧化鋅為IOmg/mL的納米氧化鋅膠體溶液。植物乳桿菌發酵液在生產後也可以直接凍幹保存，使用時稀釋。
[0006]抑制大腸桿菌0157和臘樣芽孢桿菌時，植物乳桿菌發酵液與納米氧化鋅的體積比為9:1。
[0007]本發明還涉及所述抑菌組合物在製備抑制大腸桿菌0157藥物中的應用。
[0008]本發明還涉及所述抑菌組合物在製備抑制臘樣芽孢桿菌藥物中的應用。
[0009]本發明抑菌組合物植物乳桿菌發酵液能增強納米氧化鋅的溶解度。此外，植物乳桿菌能代謝產生有機酸、雙乙醯、過氧化氫和細菌素等物質，這些物質也能夠抑制病原菌和腐敗菌，植物乳桿菌發酵液有協同增強納米氧化鋅的抑菌性能，同時使微生態製劑具有特殊保健功能。
【具體實施方式】[0010]所用菌株、試劑均為常規市售菌株、試劑。
[0011]實施例1
1，植物乳桿菌發酵液製備包括如下步驟:以植物乳桿菌為出發菌株，MRS為液體培養基，接植物乳桿菌(購自ATCC編號為ATCC 8014)單菌落於5mL的MRS為液體培養基中，於37°C厭氧培養箱中恆溫培養24h，即可以得到菌濃度在IO8 CFU/mL的植物乳桿菌發酵液。
[0012]2，納米氧化鋅膠體溶液的製備:取阿拉丁公司生產的納米氧化鋅0.01g溶於ImL的蒸懼水中，震蕩混勻得到10mg/mL的納米氧化鋅膠體溶液。
[0013]3、植物乳桿菌和納米氧化鋅聯合抑菌作用。
[0014]a細菌的培養
挑取LB瓊脂培養基上的大腸桿菌0157的單菌落於IOmL LB肉湯培養基中，置於37°C培養箱中培養12 h，再按I %的接種量接種於5 mL的LB肉湯培養基中，37°C培養5h後，取I mL上述菌液用IxPBS水連續稀釋兩個梯度，最終的菌液大約為IO8 CFU/mL。
[0015]b植物乳桿菌發酵液和納米氧化鋅在抑菌性能上的聯合作用
分別取900 μ L上述已稀釋好的菌液於1.5 mL滅菌的離心管中，向I號離心管中加入100 μ L植物乳桿菌發酵液，向2號離心管中加入100 μ L濃度為10 mg/mL的納米氧化鋅膠體溶液，向3號離心管中加入100 μ L納米氧化鋅膠體溶液和植物乳桿菌發酵液的混合液(1:9)，向4號離心管中加入100 μ LlxPBS水，置於37°C恆溫震蕩培養箱中培養5 h。每組實驗平行三次。
[0016]c平板計數
將實驗組待測液和空白組都用IxPBS連續稀釋4個梯度，10_2、10_3、10_4各取出10 μ L分別均勻塗布在LB固體平板上；平板吹乾後，37°C倒置培養12 h，長出菌落後計數，以30-300個菌落形成單位(CFU)為有效的計數範圍。
[0017]實驗結果如下:
【權利要求】
1.一種植物乳桿菌發酵液和納米氧化鋅抑菌組合物，其特徵在於含有植物乳桿菌發酵液、納米氧化鋅。
2.如權利要求1所述的抑菌組合物，其特徵在於所述植物乳桿菌發酵液製備包括如下步驟:取植物乳桿菌單菌落接種於5mL的MRS培養液中，厭氧培養至菌濃度在108CFU/mL的植物乳桿菌發酵液；所述納米氧化鋅為10mg/mL的納米氧化鋅膠體溶液。
3.如權利要求1所述的抑菌組合物，其特徵在於抑制大腸桿菌0157和臘樣芽孢桿菌時，植物乳桿菌發酵液與納米氧化鋅的體積比為9:1。
4.如權利要求1~2任一所述抑菌組合物在製備抑制大腸桿菌0157藥物中的應用。
5.如權利要求 1~2任一所述抑菌組合物在製備抑制臘樣芽孢桿菌藥物中的應用。
【文檔編號】A61K33/30GK103977025SQ201410179431
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年4月30日 優先權日:2014年4月30日
【發明者】許恆毅, 況慧娟, 段宏, 沈駿, 邴雙飛 申請人:南昌大學