一種天然殺菌除蟲劑的製作方法
2023-08-05 12:21:31
本發明涉及農業種植和植物化工領域，具體涉及一種天然殺菌除蟲劑。
背景技術：
：漆樹是指漆樹科(Anacardiaceae)漆樹屬(Toxico-dendron)的一類植物，隸屬亞熱帶區系，新生代第3紀古老孑遺樹種，是我國重要經濟樹種。漆樹全屬20餘種，主要分布亞洲東部和北美洲至中美洲，印度、朝鮮、日本也有分布。中國漆樹屬植物共有15種，在我國南部各省區均有分布。在雲南的分布十分廣泛，雲南漆樹的特點是，有從不過8米的小喬木到高達18米以上的大喬木的多個類型。奇數羽葉的小葉數目有少至1片的，也有多到21片的，以9~15片的類型居多；葉形偏小，多呈狹卵形。種實豐盛飽滿。除割漆之外，常有提蠟榨油的價值。漆樹的物候在雲南各地也不一，前後相差2~3個節令。雲南漆樹多變、高大的特點是與其生境分不開的。雲南地形的84%是山地。從滇東北的海拔800~2000米,到滇西北的2100~2800米之間都有漆樹分布。大葉漆樹，拉丁名：Toxicodendronhookeri(SahnietBahadur)C.Y.WuetT.L.Mingvar.hookeri，小喬木。產雲南西北部和西藏東南部，生於海拔1250-2600米的闊葉林中。多葉小漆樹，拉丁名：Toxicodendrondelavayi，小喬木。產於國內雲南，四川，生長於海拔1900-2400米的闊葉林中。小漆樹，拉丁名：Toxicodendrondelavayi(Franch.)F.A.Barkl.，小灌木。產雲南中部至西北部、四川西南部。生長於海拔1100-2500米。漆葉為漆樹科漆樹屬植物漆樹的葉，漆葉可入藥，最早見於古方「漆葉青黏散」，《本草綱目》載其性溫味辛、有小毒、主治五屍勞疾、殺蟲。其在傳統中醫中為少常用藥，但在漆樹產區及民間應用廣泛，且確有療效。近代科學研究表明，漆葉的功效不可忽視，目前，在漆樹造林、生漆生產、漆酚漆酶類化合物的應用研究方面的報導很多，但對漆樹中漆葉的應用卻少有研究和報導，僅見少數植物學和生藥學方面的研究報導。根據西北大學晁菲對漆樹葉的研究表明，漆樹葉中主要含有漆酚類化合物，對漆葉中的漆酚類化合物進行了鑑定，初步確定了其中9個漆酚類化合物。在謝立璟、張麗霞等人的文獻「漆樹葉皮膚刺激性與致敏性的實驗研究」中，表明漆樹葉對實驗動物皮膚有輕度刺激性，無致敏性。通過文獻及專利檢索，對於用漆樹芽/葉/芽提取物/葉提取物/芽和葉提取物製備用於殺菌除蟲的產品目前還未見有文獻報導。技術實現要素：本發明的目的是提供一種利用漆樹葉或其提取物的天然殺菌除蟲劑，並加快漆樹葉在農業種植過程中的殺菌和除蟲等領域應用，使漆樹資源得到高效開發利用，進而充分發揮其經濟效益、社會效益和生態效益。本發明的目的通過以下技術方案實現：一種用於利用漆樹葉或其提取物的天然殺菌除蟲劑，包括以下步驟：（1）採摘漆樹嫩芽或樹葉並用清水洗淨、乾燥至含水量為1-5%、粉碎至20-60目；（2）按g:g固液比1：20-100的比例在步驟（1）的原料中加入水和/或乙醇，混勻後在25-100℃、壓力0-0.3MPa、攪拌速度50-100r/min條件下處理1-48h，處理1-2次，合併後待用；（3）按油脂和乳化劑的質量比為1：0.2-1的比例，將油脂和乳化劑混合，在40-80℃、攪拌速度50-100r/min條件下乳化處理0.5-2h，乳化均勻完全後待用，其中油脂與漆樹樹葉的質量比為1-2:1；（4）在步驟（2）提取液和漆樹葉或芽一併加入步驟（3）的乳化後油脂中，攪拌0.5-2h，靜置2-8h後分相；（5）將步驟（4）分層液體的下層水相部分用分液漏鬥分出並過濾後即得漆樹樹葉提取物。所述步驟（1）中的漆樹葉可為新鮮、無腐爛的原料。上述步驟中所述的漆樹葉可為一種或多種漆樹葉。上述步驟中所述的各種不同漆樹葉可以混合後粉碎、提取。本發明中所述的一種利用漆樹葉或其提取物的天然殺菌除蟲劑，目前在市面上還未有出現。本發明對現有技術和產品而言，提供了一種利用漆樹葉或其提取物的天然殺菌除蟲劑，進一步豐富了現有殺菌和除蟲產品，不但將漆樹樹葉加工為一種高附加值的產品，而且延長了漆樹的產業鏈。現有殺菌除蟲劑的不足之處主要有：使用化學藥品的殺菌除蟲劑較多，藥液殘留量大、容易在動物體內沉積，對水土、生態造成汙染，害蟲易產生抗藥性，成本較高，並在噴施農藥時對施藥人員產生一定刺激和健康損害。本發明產品的主要作用機理是對害蟲產生內吸作用和拒食忌避作用，對細菌產生免疫作用，並對作物產生保護作用，從而達到殺菌除蟲的功效。本發明產品較現有產品的優勢主要體現在：（1）純天然殺菌除蟲劑；（2）殺菌、除蟲效果好；（3）不易產生抗藥性；（4）幾乎不產生殘留；（5）不造成水土汙染；（6）生產工藝簡單、成本低容易製備生產。下面以本發明的實施例為基礎詳細說明本發明，但本發明不局限於此。具體實施方式：下面結合實施例進一步描述本發明：實施例1，其步驟如下：（1）採摘漆樹樹葉並用清水清洗、乾燥至含水量為小於4%、粉碎至20-30目；（2）按g:g固液比1：20的比例在步驟（1）的原料中加入水，混勻後在提取溫度25℃、壓力0.0MPa、攪拌速度50r/min條件下處理48h，提取處理2次，合併後待用；（3）按香果油和乳化劑月桂酸單甘油酯的質量比為1：0.2的比例，將油脂和乳化劑混合，在溫度60℃、攪拌速度50r/min條件下乳化處理0.5h，乳化均勻完全後待用，其中香果油與漆樹樹葉的質量比為1:1；（4）在步驟（2）提取液和漆樹葉一起加入步驟（3）的乳化後油脂中，攪拌0.5h，靜置2h後分相；（5）將步驟（4）分層液體的下層水相部分用分液漏鬥分出並用100目濾網過濾後即得漆樹樹葉提取物；（6）將步驟（5）處理所得的濾液按濾液：水1：5比例稀釋，稀釋後混勻即得一種天然殺菌除蟲劑。為實驗實施例產品的殺菌和除蟲效能，將該混合液來防治青椒疫病、三七炭疽病、葉斑病、根腐和莖腐病，使藥液沿青椒和三七莖基部淋溶到根際周圍土壤裡，並施以葉面噴施清液，青椒疫病防治率為45%，三七炭疽病、葉斑病、根腐和莖腐病防治率為60%。實施例2，其步驟如下：（1）採摘漆樹嫩芽或樹葉並用清水洗淨、採用烘箱乾燥至含水量為3%左右、乾燥溫度為60℃，並粉碎至20目左右；（2）按g:g固液比1：80的比例在步驟（1）的原料中加入水，混勻後在提取溫度70℃、壓力0.0MPa、攪拌速度100r/min條件下處理2h，提取處理2次，合併後待用；（3）按漆樹油和乳化劑蔗糖酯的質量比為1：0.5的比例，將漆樹油和乳化劑混合，在溫度80℃、攪拌速度100r/min條件下乳化處理2h，乳化均勻完全後待用，其中油脂與漆樹樹葉的質量比為2:1；（4）在步驟（2）提取液和漆樹葉或芽一併加入步驟（3）的乳化後油脂中，攪拌2h，靜置8h後分相；（5）將步驟（4）分層液體的下層水相部分用分液漏鬥分出並用80目濾袋過濾後即得漆樹樹葉提取物；（6）將步驟（5）處理所得的濾液按濾液：水1：6比例稀釋，稀釋後混勻即得一種天然殺菌除蟲劑。為實驗實施例產品的殺菌和除蟲效能，試用於番茄、黃瓜灰黴病、白粉病、葉黴病防治上。在發病前或發病初期均勻噴霧一次，每隔8天用藥一次，總次數3次，病蟲害防治率可達65%。實施例3，其步驟如下：（1）採摘漆樹嫩芽或樹葉並用清水洗淨、用微波乾燥至水份為2%，微波乾燥條件為乾燥時間為80s、乾燥溫度為65℃，微波功率200W，再粉碎至40目左右；（2）按g:g固液比1：20的比例在步驟（1）的原料中加入乙醇，混勻後在提取溫度55℃、壓力0.1MPa、攪拌速度100r/min條件下提取處理1h，處理2次，合併後待用；（3）按茶果油和乳化劑丙二醇脂肪酸酯的質量比為1：0.3的比例，將茶果油和乳化劑混合，在溫度70℃、攪拌速度50r/min條件下乳化處理1h，乳化均勻完全後待用，其中茶果油與漆樹樹葉的質量比為1.5:1；（4）在步驟（2）提取液和漆樹葉或芽一併加入步驟（3）的乳化後油脂中，攪拌0.5h，靜置4h後分相；（5）將步驟（4）分層液體的下層水相部分用分液漏鬥分出並用100目濾袋過濾後即得漆樹樹葉提取物；（6）將步驟（5）處理所得的濾液按濾液：水1：100比例稀釋，稀釋後混勻即得一種天然殺菌除蟲劑。為實驗實施例產品的殺菌和除蟲效能，試用於番茄、黃瓜灰黴病、葉黴病防治上。在發病前或發病初期均勻噴霧一次。每隔7天用藥一次，總次數3次，病蟲害防治率可達75%。實施例4，其步驟如下：（1）採摘大葉漆樹、小漆樹和多葉小漆樹嫩芽和樹葉（質量比1:1:1）並用清水清洗、曬乾至水分小於3%、粉碎至60目；（2）按g:g固液比1：100的比例在步驟（1）的原料中加入水和乙醇（質量比2:1）的混合溶劑，混勻後在提取溫度50℃、壓力0.05MPa、攪拌速度50r/min條件下提取處理1h，處理1次，並合併後待用；（3）按桐油和乳化劑山梨糖醇脂的質量比為1：0.2的比例，將油脂和乳化劑混合，在溫度80℃、攪拌速度80r/min條件下乳化處理0.5h，乳化均勻完全後待用，其中油脂與漆樹樹葉的質量比為2:1；（4）在步驟（2）提取液和漆樹葉或芽一併加入步驟（3）的乳化後油脂中，攪拌0.5h，靜置6h後分相；（5）將步驟（4）分層液體的下層水相部分用分液漏鬥分出並用100目濾布過濾後即得漆樹樹葉提取物；（6）將步驟（5）處理所得的濾液按濾液：水1：5比例稀釋，混合均勻後即得一種天然殺菌除蟲劑。為實驗實施例產品的殺菌和除蟲效能，試用於防治甘藍黑斑病、菜豆銹病及炭疽病防治上。在發病初期均勻噴霧一次，每隔12天用藥一次，總次數4次，病蟲害防治率可達65%。實施例5，其步驟如下：（1）採摘漆樹嫩芽或樹葉並用清水洗淨、曬乾至水分小於3%、粉碎至60目；（2）按g:g固液比1：20的比例在步驟（1）的原料中加入提取溶劑水，混勻後在提取溫度90℃、壓力0.0MPa、攪拌速度100r/min條件下處理2h，處理2次，並合併後待用；（3）按柴油和乳化劑脂肪酸單甘油脂的質量比為1：1的比例，將油脂和乳化劑混合，在溫度60℃、攪拌速度50r/min條件下乳化處理2h，乳化均勻完全後待用，其中油脂與漆樹樹葉的質量比為2:1；（4）在步驟（2）提取液和漆樹葉或芽一併加入步驟（3）的乳化後油脂中，攪拌0.5h，靜置5h後分相；（5）將步驟（4）分層液體的下層水相部分用分液漏鬥分出並用100目濾網真空抽濾過濾，真空度為-0.05MPa，過濾後即得漆樹樹葉提取物；（6）將步驟（5）處理所得的濾液按濾液：水1：40比例稀釋，稀釋後混勻即得一種天然殺菌除蟲劑。為實驗實施例產品的殺菌和除蟲效能，試用於生態茶葉葉斑病、小綠葉蟬、蚜蟲和紅蜘蛛病防治上。在發病前或發病初期均勻噴霧一次，每隔6天用藥一次，總次數6次，病蟲害防治率可達70%。為進一步說明實施例產品的殺菌、抑菌能力，分別對實施例1、2、3中所得漆葉殺菌產品進行抗菌性實驗，具體做法為：1、抗細菌性能（1）菌種活化以大腸桿菌、蠟狀芽孢桿菌為革蘭氏陰性菌，金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌為革蘭氏陽性菌，取凍幹菌種管，在菌種上加入適當濃度的營養肉湯，待菌種融化分散後，將其接種於含10mL液體營養肉湯培養基試管內，置於37°C、轉速為180rpm的搖床內振蕩培養24h，使菌液達到一定的濃度。（2）菌懸液的製備用接種針挑取第一代培養的菌懸液，劃線接種於瓊脂培養基平板上，置於37°C培養箱中培養24h，即為第二代培養物。挑取上述第二代培養物中典型的菌落，劃線接種於瓊脂斜面培養基試管中，置於37°C培養箱中培養24h，即第三代培養物。取菌種的第三代培養物，用吸管吸取無菌水3mL-5mL加入斜面培養基試管中，反覆吹洗，洗下菌落，然後用吸管將洗液移至另一無菌試管中，在手掌上振蕩至菌落無結團、分散均勻為止，得到細菌菌懸液，並將菌懸液稀釋成106CFU/mL-107CFU/mL作為試驗用菌懸液，將其置4°C冰箱冷藏備用。（3）抑菌圈的測定培養皿中倒入滅菌的牛肉膏蛋白腖培養基10mL-I5mL，待溶液冷卻凝固。將0.1mL配置好的106-107CFU/mL菌懸液均勻塗抹於牛肉膏蛋白腖培養基上，待培養基表面幹後用5mm的無菌打孔器打孔，分別將30μL實施例溶液注入含有菌懸液的培養皿。將接種完成後的培養基置於37°C恆溫培養箱進行培養24h，測定抑菌圈的大小。2、抗真菌性能（1）菌種活化試驗菌為黑麴黴菌，將黑麴黴菌接種於瓊脂斜面培養基試管內，置於28-30°C、恆溫培養箱中培養96-120h，使其產生一定量的孢子。（2）菌懸液的製備將培養96-120h的瓊脂斜面培養基試管中加入少量無菌水，用滅菌接種針輕柔刮取表面的新鮮黴菌孢子，將孢子懸液置於錐形瓶內，注入洗脫液40mL。錐形瓶中加入小玻璃珠10粒與孢子混合，密封后置于振蕩器中不斷振蕩使孢子散開，然後用單層紗布棉過濾除去菌絲。將其裝入滅菌離心管中，用離心機分離沉澱孢子，去掉上層清液。再加入洗脫液40mL，重複離心操作3次。稀釋孢子懸液，並以計數板計數，製成106-107spores/mL濃度的黴菌孢子懸液。然後將盛有黴菌孢子懸液的錐形瓶放於80°C水浴鍋內10min，以除去細菌營養體。將黴菌孢子懸液置於4°C冰箱冷藏備用。（3）抑菌圈的測定培養皿中倒入滅菌的瓊脂培養基10mL-I5mL，待溶液冷卻凝固。將0.1mL配置好的106-107CFU/mL菌懸液均勻塗抹於瓊脂培養基上，待培養基表面幹後用5mm的無菌打孔器打孔，分別將30μL實施例溶液注入含有菌懸液的培養皿。將接種完成後的培養基置於28°C恆溫培養箱進行培養48-72h，測定抑菌圈的大小。以上每組實驗做三次，取其平均值做為實驗結果。實施例1、2、3漆葉殺菌產品抗菌性實驗表實施例大腸桿菌（mm）蠟狀芽孢桿菌(mm)金黃色葡萄球菌(mm)枯草芽孢桿菌(mm)黑麴黴菌(mm)111.510.37.69.97.2212.311.08.911.38.3312.411.88.310.58.6如上表所示，實施例1、2、3漆葉殺菌產品抗菌性能較為優異，不僅表現在對大腸桿菌、蠟狀芽孢桿菌等細菌的抗細菌能力較強，對於真菌中的黑麴黴菌的抑制效果也較為明顯。隨著配方和工藝的不同其抗菌性能有所差別。當前第1頁1 2 3