一種用於動物模型染色的酞菁藍水溶液的製作方法
2023-07-19 01:40:46 1
專利名稱：一種用於動物模型染色的酞菁藍水溶液的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種動物模型染料。
背景技術：
現在用的伊文斯藍為動物模型染色中一直沿用的經典藍色染料，水溶性，灌注後能與血漿蛋白牢固結合，不進入細胞內液，浸染迅速，但摘取實驗動物心臟及切片時很容易導致非缺血區殘餘染料浸染缺血區。《Refined approach for quantification of in vivoischemia-reperfusion injury in the mouse heart)) (Am J Physiol Heart Circ PhySiol2009)首次提出了酞菁藍過濾液取代依文斯藍應用於實驗動物心肌缺血再灌注模型染色，染色效果明顯優於依文思藍。其製備方法是將酞菁藍粉末溶於生理鹽水，過濾後得到5%的酞菁藍過濾液，但是此法很難避免微小顆粒對冠脈微血管的機械性堵塞，影響真實邊界的呈現，且製備產率低。本實驗組曾分別應用生理鹽水、生理鹽水+十二烷基硫酸鈉溶解酞菁藍，最終均只得到5%的酞菁藍溶液。酞菁藍本身是一種豔綠光藍色棒狀晶體，不溶於水、醇及其他常見溶劑，僅溶於濃硫酸呈橄欖色溶液，稀釋後可析出藍色懸浮體；而酞菁藍粉末直接應用高剪切乳化劑分散，所得粉末會很快聚集成塊狀物。其難溶性和分散後易聚集性是現實動物實驗染色中應用酞菁藍的最大障礙。發明內容
本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種用於動物模型染色的酞菁藍水溶液。
本發明的技術方案概述如下
一種用於動物模型染色的酞菁藍水溶液，用下述方法製成
在帶有攪拌的容器中，加入10克酞菁藍粉末和500-600克發煙硫酸，開啟攪拌並緩慢升溫，在120-130°C保溫反應8-12小時，降溫至20_30°C，將反應液在攪拌下倒入 800-1200克蒸懼水中,加入氯化鈉250-300克使磺化銅酞菁沉澱析出，過濾,濾餅用少量蒸餾水洗滌，將濾餅加入50-100克生理鹽水中，用三乙胺、二甲胺或三乙醇胺調pH值至中性， 用高剪切均質機分散60分鐘，得到用於動物模型染色的酞菁藍水溶液。
應用本發明的一種用於動物模型染色的酞菁藍水溶液進行動物心肌缺血再灌注模型染色，缺血區與非缺血區分界清晰，非缺血區染色均勻，缺血區亦不會被染料汙染，水溶解度高，可實現性強，可靠性高，提高酞菁藍利用效率，效果好。
圖1為利用本發明的酞菁藍水溶液對動物心肌缺血再灌注模型染色。
黑色箭頭指向的灰白色區域為缺血區(即未被酞菁藍或伊文斯藍浸染區)，白色箭頭所指的黑色區域為非缺血區(即被酞菁藍或伊文斯藍浸 染區)。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明作進一步的說明。實施例1一種用於動物模型染色的酞菁藍水溶液，用下述方法製成在帶有攪拌的容器中，加入10克酞菁藍粉末和550克發煙硫酸，開啟攪拌並緩慢升溫，在125°C保溫反應10小時，降溫至25°C，將反應液在攪拌下倒入1000克蒸餾水中，力口入氯化鈉280克使磺化銅酞菁沉澱析出，過濾，濾餅用少量蒸餾水洗滌，將濾餅加入90克生理鹽水中，用三乙胺調pH值至中性，用型號CGJB60-70的高剪切均質機分散60分鐘，得到用於動物模型染色的酞菁藍水溶液。實施例2一種用於動物模型染色的酞菁藍水溶液，用下述方法製成在帶有攪拌的容器中，加入10克酞菁藍粉末和500克發煙硫酸，開啟攪拌並緩慢升溫，在120°C保溫反應12小時，降溫至30°C，將反應液在攪拌下倒入1200克蒸餾水中，力口入氯化鈉300克使磺化銅酞菁沉澱析出，過濾，濾餅用少量蒸餾水洗滌，將濾餅加入100克生理鹽水中，用二甲胺調pH值至中性，用型號CGJB60-70高剪切均質機分散60分鐘，得到用於動物模型染色的酞菁藍水溶液。實施例3一種用於動物模型染色的酞菁藍水溶液，用下述方法製成在帶有攪拌的容器中，加入10克酞菁藍粉末和600克發煙硫酸，開啟攪拌並緩慢升溫，在130°C保溫反應8小時，降溫至20°C，將反應液在攪拌下倒入800克蒸餾水中，加入氯化鈉250克使磺化銅酞菁沉澱析出，過濾，濾餅用少量蒸餾水洗滌，將濾餅加入50克生理鹽水中，用三乙醇胺調PH值至中性，用型號CGJB60-70高剪切均質機分散60分鐘，得到用於動物模型染色的酞菁藍水溶液。實驗證明，用基它型號的高剪切均質機也可以過到相似的效果。酞菁藍BGS 分子式C32H16N8Cu結構式
權利要求
1.ー種用於動物模型染色的酞菁藍水溶液，其特徵是用下述方法製成 在帶有攪拌的容器中，加入10克酞菁藍粉末和500-600克發煙硫酸，開啟攪拌並緩慢升溫，在120-130°C保溫反應8-12小時，降溫至20-30°C，將反應液在攪拌下倒入800-1200克蒸餾水中，加入氯化鈉250-300克使磺化銅酞菁沉澱析出，過濾，濾餅用少量蒸餾水洗滌，將濾餅加入50-100克生理鹽水中，用三こ胺、ニ甲胺或三こ醇胺調pH值至中性，用高剪切均質機分散60分鐘，得到用於動物模型染色的酞菁藍水溶液。
全文摘要
本發明公開了一種用於動物模型染色的酞菁藍水溶液，用下述方法製成在帶有攪拌的容器中，加入10克酞菁藍粉末和500-600克發煙硫酸，開啟攪拌並緩慢升溫，反應，降溫，將反應液在攪拌下倒入蒸餾水中，加入氯化鈉使磺化銅酞菁沉澱析出，過濾，濾餅用少量蒸餾水洗滌，將濾餅加入生理鹽水中，用三乙胺、二甲胺或三乙醇胺調pH值至中性，用高剪切均質機分散，得到用於動物模型染色的酞菁藍水溶液。應用本發明的酞菁藍水溶液進行動物心肌缺血再灌注模型染色，目標邊界清晰，目標區染色均勻，非目標區亦不會被染料汙染，水溶解度高，可實現性強，可靠性高，提高酞菁藍利用效率，效果好。
文檔編號C09B67/12GK103044961SQ201210513160
公開日2013年4月17日 申請日期2012年12月4日 優先權日2012年12月4日
發明者張梅 申請人:中國人民武裝警察部隊後勤學院附屬醫院