一種具有抗菌活性的化合物及其製備方法
2023-07-28 19:17:26
一種具有抗菌活性的化合物及其製備方法
【專利摘要】本發明公開了一種來自海洋放線菌的具有抗菌活性的化合物及其製備方法，該化合物的結構如式I所示，該化合物具有顯著的抗菌活性，對金黃色葡萄球菌的抑制作用好於鹽酸四環素，且在鹼性條件下抑菌作用增加，對於感染後機體環境pH增加的疾病具有很好的治療前景。本發明還公開了具有抗菌活性的化合物的製備方法，由海洋放線菌和大腸桿菌共培養發酵產生，可通過對培養液進行乙酸乙酯或二氯甲烷萃取後，再有矽膠這層析和反相色譜分離純化得到，易於操作和實施。
【專利說明】一種具有抗菌活性的化合物及其製備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及細菌培養製備化合物領域，具體涉及一種具有抗菌活性的化合物及其製備方法。
【背景技術】
[0002]尋找新的活性好的抗生素是當今世界的一大難題。微生物是抗生素的主要來源，但是人們已經很難從現有菌株的二次代謝產物發現新抗生素，少數發現的新菌株，其二次代謝產物的抗菌活性往往也不太理想。海洋微生物中蘊藏著豐富的活性二次代謝產物，其研究開發，是解決當前陸地藥用資源緊張的重要手段，對於人類重大疾病的治療具有十分重要的意義。
[0003]海洋微生物能表達許多重要的次級代謝產物，但是在自然狀態下，次級代謝產物表達的量極其微少或者不表達，只有在外界環境的刺激下，其表達的量才會增加。共培養作為增加微生物次級代謝產物表達的一種方式，是微生物活性二次代謝產物發現的重要研究手段。
[0004]申請公布號CN1371379A (申請號為00812158.3)的中國發明專利申請公開了一種從海洋放線菌中得到的新吲哚並咔唑生物鹼，結構如式(I)所示，其中，R1是氫原子、含I到6個碳原子的烷基或含I到6個碳原子的烷氧基，R2是氫原子、含I到6個碳原子的烷基或含I到6個碳原子的烷氧基。該化合物或可藥用的鹽可用於製備治療或預防哺乳動物惡性腫瘤的藥物。該化合物通過放線菌菌種CLC0-002在適當的培養基中在受控條件下培養得到，該菌種在有氧和中溫條件下於液體培養基中培養，溫度為22°C至35°C，pH在6.0至8.0之間。
[0005]
【權利要求】
1.一種具有抗菌活性的化合物，其特徵在於，為式I結構的化合物；
2.根據權利要求1所述的具有抗菌活性的化合物的製備方法，其特徵在於，包括以下步驟: 1)將海洋放線菌接種於發酵培養基中，靜置培養5~10天，得到接種有海洋放線菌的發酵培養基； 2)再將大腸桿菌接種於步驟I)中的接種有海洋放線菌的發酵培養基中，靜置共培養10~20天，得到共培養發酵液； 3)將共培養發酵液分離純化得到式I結構的化合物，即具有抗菌活性的化合物。
3.根據權利要求2所述的具有抗菌活性的化合物的製備方法，其特徵在於，步驟I)中，所述的發酵培養基，以IL計，由以下重量組分製成: 酵母提取物1-1Og ；甘油l_15g ；海水餘量； 通過酸鹼緩衝液將該發酵培養基調節PH至7-8。
4.根據權利要求2所述的具有抗菌活性的化合物的製備方法，其特徵在於，步驟I)中，所述的海洋放線菌為海洋鏈黴菌Sti^ptomyces sp.MCC1A03740。
5.根據權利要求2所述的具有抗菌活性的化合物的製備方法，其特徵在於，步驟2)中，所述的大腸桿菌為大腸桿菌Escherichia coli ATCC35218。
6.根據權利要求2所述的具有抗菌活性的化合物的製備方法，其特徵在於，步驟2)中，所述的大腸桿菌的接種體積為發酵培養基體積的0.1%-5%。
7.根據權利要求2所述的具有抗菌活性的化合物的製備方法，其特徵在於，步驟3)中，所述的分離純化包括:將共培養發酵液用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取，萃取液濃縮後進行矽膠柱層析，薄層檢識得到所需要的餾分，再通過反相色譜純化，得到式I結構的化合物。
8.根據權利要求7所述的具有抗菌活性的化合物的製備方法，其特徵在於，所述的矽膠柱層析的條件:採用的流動相為體積比為10~2:1的石油醚-乙酸乙酯溶液或體積比為100:0~2的二氯甲燒-甲醇溶液。
9.根據權利要求7所述的具有抗菌活性的化合物的製備方法，其特徵在於，所述的反相色譜純化的條件:採用的填料為十八烷基鍵合矽膠，採用的流動相為體積比為65~80:35~20甲醇-水的溶液或者體積比為35~50:65~50乙腈-水的溶液。
【文檔編號】C12R1/465GK103980266SQ201410132696
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年4月2日 優先權日:2014年4月2日
【發明者】馬忠俊, 餘立雁, 王丹, 胡志飛, 胡志娟 申請人:浙江大學