一種生防複合菌劑及其製備工藝的製作方法
2023-12-04 03:04:36 1
本發明涉及一種土壤改良劑技術領域，尤其涉及一種生防複合菌劑，還涉及一種該生防複合菌劑的製備工藝。
背景技術：
作為農業大國，作物秸稈資源豐富，數量巨大，種類多樣，每年的作物秸稈產出量多達上億噸。傳統的秸稈主要用於墊圈、餵養牲畜、堆漚肥，今年來，隨著家畜飼養量的大幅度減小，很大一部分秸稈以堆積、焚燒等形式傾入環境中，在對環境造成嚴重汙染的同時，也造成了資源的極大浪費。
將秸稈進行高效的資源化利用，不僅可以減少汙染、保護環境，而且可以變廢為寶，促進經濟可持續發展，因此出現了秸稈還田技術，即將這些作物秸稈在作物收穫的同時直接粉碎在農田中，經過發酵形成養料為下一季的作物生長提供養分，這一舉措成為秸稈資源化利用中最簡便、經濟的方法，但隨著秸稈還田的投入使用發現，秸稈粉碎後短期內不易腐解，因此實際利用效率低，同時分解難免會釋放出其它菌種，有些菌種的存在會抑制作物生長，為了解決上述問題，往往需要在土壤中添加改良劑，既加速秸稈腐解，又能促進作物生長。
目前使用的土壤改良劑多為複合菌劑，複合菌劑是由兩種或兩種以上且互不拮抗的微生物菌種製成的微生物製劑。但是目前大多數農作物秸稈還田腐解菌劑存在微生物代謝類型及功能單一、針對性不強和復配比例不當等問題，無法達到快速高效的秸稈腐解效果，因此難以大規模推廣應用。另外秸稈還田的土壤中很容易滋生細菌和病蟲害，對作物的正常生長產生巨大危害，如何開發高效秸稈還田複合菌劑，在對農作物秸稈進行有效處理，加強加快秸稈腐解的同時，又能達到防治病蟲害的目的，成為一個亟待解決的問題。
技術實現要素：
本發明所要解決的技術問題是提供一種加快有機物分解、加速作物生長且能夠防治病蟲害的生防複合菌劑。
為解決上述技術問題，本發明的技術方案是：一種生防複合菌劑，包括以重量份比的組分：
菌種：淡紫紫孢菌8～12、螢光假單孢菌18～22、蠟樣芽胞桿菌18～22、膠質芽孢桿菌8～12、枯草芽孢桿菌18～22、巨大芽孢桿菌8～12、蘇雲金桿菌4～6、綠色木黴4～6；
培養基：牛肉膏0.8～1.2、磷酸二氫鉀2.5～4、尿素1.3～1.8、糖蜜10～12、胺基酸1.5～2.5、葡萄糖2.5～3.5、蛋白腖0.3～0.6、氯化鈉0.25～0.4、硝酸鉀0.35～0.6。
作為優選的技術方案，包括以重量份比的組分：
菌種：淡紫紫孢菌10、螢光假單孢菌20、蠟樣芽胞桿菌20、膠質芽孢桿菌10、枯草芽孢桿菌20、巨大芽孢桿菌10、蘇雲金桿菌5、綠色木黴5；
培養基：牛肉膏1、磷酸二氫鉀3、尿素1.5、糖蜜11、胺基酸2、葡萄糖3、蛋白腖0.5、氯化鈉0.3、硝酸鉀0.5。
作為優選的技術方案，包括以重量份比的組分：
菌種：淡紫紫孢菌11、螢光假單孢菌19、蠟樣芽胞桿菌19、膠質芽孢桿菌11、枯草芽孢桿菌19、巨大芽孢桿菌19、蘇雲金桿菌5.5、綠色木黴5.5；
培養基：牛肉膏1.1、磷酸二氫鉀3.5、尿素1.65、糖蜜11.5、胺基酸2.2、葡萄糖3.25、蛋白腖0.55、氯化鈉0.35、硝酸鉀0.55。
本發明還公開了上述生防複合菌劑的製備方法，主要包括以下步驟：
步驟一、
取以下重量份配比的組分製備培養基：
胺基酸2、磷酸二氫鉀2、葡萄糖1、蛋白腖0.5、尿素0.5、牛肉膏1，將酸鹼度調整為6.5～7.5，形成培養基；
取重量份配備的螢光假單孢菌、蠟樣芽胞桿菌、膠質芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蘇雲金桿菌，將上述各菌種在無菌室內分別進行純化復壯，將各菌種投入本步驟製得的培養基中，在26～30℃的環境中，搖床培養24～72小時，備用；
步驟二、
取以下重量份配比的組分製備培養基：
磷酸二氫鉀1、糖蜜6、尿素1、氯化鈉0.1，將酸鹼度調整為6.9～7.1，形成培養基，取重量份配比的淡紫紫孢菌，投入本步驟製得的培養基中，在26～30℃的環境中，搖床培養24～72小時，備用；
步驟三、
取以下重量份配比的組分製備培養基：
硝酸鉀0.5、氯化鈉0.2、糖蜜5、葡萄糖2，酸鹼度調整為6.5～7.5，形成培養基；取重量份配比的培養綠色木黴，投入本步驟製得的培養基中，在26～30℃的環境中，搖床培養24～72小時，備用；
步驟四、
將步驟一、步驟二和步驟三製得的各菌種基液一起投入種子罐中進行滅菌培養，在28～32℃的環境中滅菌培養5～8天，熟化後即得生防複合菌劑。
作為優選的技術方案，還包括以下重量份配比的培養基組分，大豆蛋白粉10～12、瓊脂2.5～3.5。
作為優選的技術方案，在所述步驟二中磷酸二氫鉀、糖蜜、尿素和氯化鈉的混合物中加入大豆蛋白粉11、瓊脂3。
所述淡紫紫孢菌、所述螢光假單孢菌、所述蠟樣芽胞桿菌、所述膠質芽孢桿菌、所述枯草芽孢桿菌、所述巨大芽孢桿菌、所述蘇雲金桿菌和所述綠色木黴的活菌數分別≥107CFU/g。
本發明還公開了上述生防複合菌劑的另一種製備方法，主要包括以下步驟：
步驟一、
取以下重量份配比的組分製備培養基：
胺基酸2.2、磷酸二氫鉀2.25、葡萄糖1.05、蛋白腖0.55、尿素0.65、牛肉膏1.1，將酸鹼度調整為6.5～7.5，形成培養基；
取重量份配備的螢光假單孢菌、蠟樣芽胞桿菌、膠質芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蘇雲金桿菌，將上述各菌種在無菌室內分別進行純化復壯，將各菌種投入本步驟製得的培養基中，在26～30℃的環境中，搖床培養24～72小時，備用；
步驟二、
取以下重量份配比的組分製備培養基：
磷酸二氫鉀1.25、糖蜜6.5、尿素1、氯化鈉0.15，將酸鹼度調整為6.9～7.1，形成培養基，取重量份配比的淡紫紫孢菌，投入本步驟製得的培養基中，在26～30℃的環境中，搖床培養24～72小時，備用；
步驟三、
取以下重量份配比的組分製備培養基：
硝酸鉀0.55、氯化鈉0.2、糖蜜5、葡萄糖2.2，酸鹼度調整為6.5～7.5，形成培養基；取重量份配比的培養綠色木黴，投入本步驟製得的培養基中，在26～30℃的環境中，搖床培養24～72小時，備用；
步驟四、
將步驟一、步驟二和步驟三製得的各菌種基液一起投入種子罐中進行滅菌培養，在28～32℃的環境中滅菌培養5～8天，熟化後即得生防複合菌劑。
作為優選的技術方案，還包括以下重量份配比的培養基組分，大豆蛋白粉10～12、瓊脂2.5～3.5，在所述步驟二中磷酸二氫鉀、糖蜜、尿素和氯化鈉的混合物中加入所述大豆蛋白粉和所述瓊脂。
作為優選的技術方案，所述淡紫紫孢菌、所述螢光假單孢菌、所述蠟樣芽胞桿菌、所述膠質芽孢桿菌、所述枯草芽孢桿菌、所述巨大芽孢桿菌、所述蘇雲金桿菌和所述綠色木黴的活菌數分別≥107CFU/g。
由於採用了上述技術方案，本發明的有益效果是：各菌種單獨經過培養，按配比調整菌數後按一定的比例混合而成，有些菌種要單獨培養，防止混合後導致有些菌種衰微，這種方式複合而成菌種功能各異，完美搭配相符包含固氮、溶磷、解鉀、分解有機質、抑制蟲害、促進有機轉換加速腐化有機質分解養分，使廢棄秸稈等資源變廢為寶，減少汙染，本發明的生防複合菌劑對當前的土壤改良、農業的環保、廢棄秸稈垃圾有著很好的解決效果，是一種既能改良土壤，又能加快作物生長，加速分解有機物菌劑。
具體實施方式
下面結合實施例，進一步闡述本發明。在下面的詳細描述中，只通過說明的方式描述了本發明的某些示範性實施例。毋庸置疑，本領域的普通技術人員可以認識到，在不偏離本發明的精神和範圍的情況下，可以用各種不同的方式對所描述的實施例進行修正。因此，描述在本質上是說明性的，而不是用於限制權利要求的保護範圍。
實施例一：
一種生防複合菌劑，包括以重量份比的組分：菌種：淡紫紫孢菌8～12、螢光假單孢菌18～22、蠟樣芽胞桿菌18～22、膠質芽孢桿菌8～12、枯草芽孢桿菌18～22、巨大芽孢桿菌8～12、蘇雲金桿菌4～6、綠色木黴4～6；
培養基：牛肉膏0.8～1.2、磷酸二氫鉀2.5～4、尿素1.3～1.8、糖蜜10～12、胺基酸1.5～2.5、葡萄糖2.5～3.5、蛋白腖0.3～0.6、氯化鈉0.25～0.4、硝酸鉀0.35～0.6。本實施例具體的包括以重量份比的組分：菌種：淡紫紫孢菌10、螢光假單孢菌20、蠟樣芽胞桿菌20、膠質芽孢桿菌10、枯草芽孢桿菌20、巨大芽孢桿菌10、蘇雲金桿菌5、綠色木黴5；培養基：牛肉膏1、磷酸二氫鉀3、尿素1.5、糖蜜11、胺基酸2、葡萄糖3、蛋白腖0.5、氯化鈉0.3、硝酸鉀0.5。
本實施例的製備方法主要包括以下步驟：
步驟一、
取以下重量份配比的組分製備培養基：
胺基酸2、磷酸二氫鉀2、葡萄糖1、蛋白腖0.5、尿素0.5、牛肉膏1，將酸鹼度調整為6.5～7.5，形成培養基；
取重量份配備的螢光假單孢菌、蠟樣芽胞桿菌、膠質芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蘇雲金桿菌，將上述各菌種在無菌室內分別進行純化復壯，將各菌種投入本步驟製得的培養基中，在28℃的環境中，搖床培養48小時，備用；
步驟二、
取以下重量份配比的組分製備培養基：
磷酸二氫鉀1、糖蜜6、尿素1、氯化鈉0.1，將酸鹼度調整為7，形成培養基，取重量份配比的淡紫紫孢菌，投入本步驟製得的培養基中，在28℃的環境中，搖床培養48小時，備用；
步驟三、
取以下重量份配比的組分製備培養基：
硝酸鉀0.5、氯化鈉0.2、糖蜜5、葡萄糖2，酸鹼度調整為6.5～7.5，形成培養基；取重量份配比的培養綠色木黴，投入本步驟製得的培養基中，在28°C的環境中，搖床培養24～72小時，備用；
步驟四、
將步驟一、步驟二和步驟三製得的各菌種基液一起投入種子罐中進行滅菌培養，在28～32℃的環境中滅菌培養5～8天，熟化後即得生防複合菌劑。
還可以在組分中加入以下重量份配比的培養基組分，大豆蛋白粉10～12、瓊脂2.5～3.5。在所述步驟二中，磷酸二氫鉀、糖蜜、尿素和氯化鈉的混合物中加入大豆蛋白粉11、瓊脂3。在上述方法中，所述淡紫紫孢菌、所述螢光假單孢菌、所述蠟樣芽胞桿菌、所述膠質芽孢桿菌、所述枯草芽孢桿菌、所述巨大芽孢桿菌、所述蘇雲金桿菌和所述綠色木黴的活菌數分別≥107CFU/g。
實施例二：
本實施例與實施例一的區別在於各組分含量不同，本實施例包括以重量份比的組分：
菌種：淡紫紫孢菌11、螢光假單孢菌19、蠟樣芽胞桿菌19、膠質芽孢桿菌11、枯草芽孢桿菌19、巨大芽孢桿菌19、蘇雲金桿菌5.5、綠色木黴5.5；培養基：牛肉膏1.1、磷酸二氫鉀3.5、尿素1.65、糖蜜11.5、胺基酸2.2、葡萄糖3.25、蛋白腖0.55、氯化鈉0.35、硝酸鉀0.55。
本實施例的製備方法主要包括以下步驟：
步驟一、
取以下重量份配比的組分製備培養基：
胺基酸2.2、磷酸二氫鉀2.25、葡萄糖1.05、蛋白腖0.55、尿素0.65、牛肉膏1.1，將酸鹼度調整為6.5～7.5，形成培養基；
取重量份配備的螢光假單孢菌、蠟樣芽胞桿菌、膠質芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蘇雲金桿菌，將上述各菌種在無菌室內分別進行純化復壯，將各菌種投入本步驟製得的培養基中，在26～30℃的環境中，搖床培養24～72小時，備用；
步驟二、
取以下重量份配比的組分製備培養基：
磷酸二氫鉀1.25、糖蜜6.5、尿素1、氯化鈉0.15，將酸鹼度調整為6.9～7.1，形成培養基，取重量份配比的淡紫紫孢菌，投入本步驟製得的培養基中，在26～30℃的環境中，搖床培養24～72小時，備用；
步驟三、
取以下重量份配比的組分製備培養基：
硝酸鉀0.55、氯化鈉0.2、糖蜜5、葡萄糖2.2，酸鹼度調整為6.5～7.5，形成培養基；取重量份配比的培養綠色木黴，投入本步驟製得的培養基中，在26～30℃的環境中，搖床培養24～72小時，備用；
步驟四、
將步驟一、步驟二和步驟三製得的各菌種基液一起投入種子罐中進行滅菌培養，在28～32℃的環境中滅菌培養5～8天，熟化後即得生防複合菌劑。
還可以在組分中加入以下重量份配比的培養基組分，大豆蛋白粉10～12、瓊脂2.5～3.5，在所述步驟二中，磷酸二氫鉀、糖蜜、尿素和氯化鈉的混合物中加入所述大豆蛋白粉和所述瓊脂。
在上述方法中，所述淡紫紫孢菌、所述螢光假單孢菌、所述蠟樣芽胞桿菌、所述膠質芽孢桿菌、所述枯草芽孢桿菌、所述巨大芽孢桿菌、所述蘇雲金桿菌和所述綠色木黴的活菌數分別≥107CFU/g。
本發明雖然是多種微生物的搭配，但菌種單獨培養成熟穩定後組合，避免了多種微生物一起培養產生拮抗造成部分菌種死亡的現象。針對每種微生物的功能組合為強勢的菌體，其中包含固氮，絮凝，能力較強的螢光假單孢及解磷菌蠟樣芽孢桿菌，螢光假單孢菌還對腐黴，絲囊黴猝倒病有很好的治療效果；分解有機質、纖維、蛋白、秸稈及農殘所用的綠色木黴、枯草芽孢桿菌、蘇雲金桿菌，對鱗翅目、雙翅目膜翅目有較強的殺傷力的巨大芽孢桿菌解磷，該菌劑是典型的好氣菌，整個菌體還包含強有力防治能力的淡紫紫孢菌、綠色木黴、枯草芽孢等菌種，具體地淡紫紫孢菌為線蟲卵寄生真菌，能消滅線蟲、根結線蟲、塊莖蛾等，枯草芽孢桿菌可針對不同的同時也有殺滅線蟲的功能，綠色木黴加速分解有機物、纖維、木質素，且上述菌種存活能力強大，能快速繁殖，具有固氮，溶磷防止肥分流失的效果，針對土壤病害有較好的防治作用，特別對當前廢棄垃圾，秸稈，糞便有很好的處理作用。
本發明的各菌種單獨經過培養，按配比調整菌數後按一定的比例混合而成，有些菌種要單獨培養，防止混合後導致有些菌種衰微，這種方式複合而成菌種功能各異，完美搭配相符包含固氮、溶磷、解鉀、分解有機質、抑制蟲害、促進有機轉換加速腐化有機質分解養分，使廢棄秸稈等資源變廢為寶，減少汙染，本發明的生防複合菌劑對當前的土壤改良、農業的環保、廢棄秸稈垃圾有著很好的解決效果，是一種既能改良土壤，又能加快作物生長，加速分解有機物菌劑。
以上顯示和描述了本發明的基本原理、主要特徵及本發明的優點。本行業的技術人員應該了解，本發明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發明的原理，在不脫離本發明精神和範圍的前提下，本發明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發明範圍內。本發明要求保護範圍由所附的權利要求書及其等效物界定。