促進甘薯種質資源間基因交流的方法
2023-11-12 02:22:17 1
專利名稱：促進甘薯種質資源間基因交流的方法
技術領域：
本發明涉及一種種子改良技術，具體是一種促進甘薯種質資源間基因交流的方法。
背景技術：
甘薯作為重要的飼料、加工、糧食及生物能源作物，並具有高產、穩產、適應性廣、 抗病性強的特點，目前在我國仍然是廣泛種植的主要作物之一。由於我國不是甘薯起源中 心，甘薯資源比較匱乏，優良新品種的選育要求有豐富的優異種質資源，種質的創新與利用 是育種的基礎。目前甘薯種質創新主要採用有性雜交、遺傳轉化、體細胞雜交、誘變等；由於 甘薯通常情況下自交不親和、部分種間雜交不親和、甚至同群內品種間雜交不親和和結實 率低、基因型依賴性等原因，一定程度上延緩了甘薯遺傳改良。
發明內容
本發明提供一種促進甘薯種質資源間基因交流的方法，打破種間及不親和群品種 間雜交障礙，具有操作方便快捷，為甘薯種質創新提供新的技術方法，加快甘薯遺傳改良。本發明是通過如下技術方案實現的一種促進甘薯種質資源間基因交流的方法， 其特徵是通過甘薯組織培養獲得供體和受體植株；將供體和受體植株在離體、無菌條件 下，進行無性嫁接，促使甘薯品種間基因滲透，創新甘薯種質，為甘薯種間及不同不親和群 品種間基因交流，進而創新及豐富甘薯種質資源。所述的通過甘薯組織培養獲得供體和受體植株是通過莖尖分生組織培養基莖尖 分生組織培養，得到再生嫁接所需的供體和受體植株。所述的供體和受體植株在離體、無菌條件下進行無性嫁接，是將粗細程度比較相 近的供體和受體植株，在超淨工作檯即無菌條件下，切取接穗植株2-3節，切口呈契型；砧 木材料去所有葉片和萌發的腋芽，接口處從中間劈開，然後將接穗插入，用無菌Parafilm 對嫁接傷口進行包裹，完成嫁接的植株接種在MS固體培養基中，嫁接後20-30天，將嫁接成 活植株，自接口部位切開，去掉接口處0. 5-lcm莖段，將接穗和砧木分別接種在MS固體培養 基中。本發明的有益效果是本發明主要是利用供體和受體試管組培培養植株，在離體、 無菌條件下，通過無性嫁接，促進甘薯品種間基因滲透，有助於甘薯種間及不同不親和群品 種間基因交流，豐富了甘薯種質創新方法，該方法操作方便、快捷，不受季節限制。
圖1是嫁接後砧木和接穗的ISSR檢測；圖2是部分砧木和接穗ISSR檢測，在圖1中鑑定的基因滲透株系及部分非基因滲 透株系的ISSR重複鑑定，進一步證實了擴增的可靠性及濟薯18和鄭薯20間基因滲透的真 實性。
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圖3是部分砧木和接穗RAPD檢測，在圖1中鑑定的基因滲透株系及部分非基因滲 透株系的RAPD (引物BA0023)擴增結果。圖4是整個離體嫁接操作流程。
具體實施例方式下面結合實施例進一步說明本發明的方法和效果，但限制本發明的保護範圍。實施例1本實驗首先是通過莖尖分生組織培養，再生嫁接所需的濟薯18和鄭薯20。莖尖 分生組織培養基條件為ILMS基本培養基添加NAAO. lmg/L和6_BA2mg/L、蔗糖30g/L、瓊脂 9g/L，滅菌前PH值為5. 8-6. 0.培養條件為光照2000Lux，溫度25士2°C .選用濟薯18和鄭薯20莖尖分生組織培養再生植株，粗細程度比較相近或者砧木 較接穗粗些。在超淨工作檯(無菌條件下)，以鄭薯20作為砧木，以濟薯18作為接穗；切 取接穗植株2-3節，切口呈契型；砧木材料去所有葉片和萌發的腋芽，接口處從中間劈開， 深度約0. 5cm,然後將接穗插入，用無菌Parafilm對嫁接傷口進行包裹，完成嫁接的植株接 種在MS固體培養基中，所用的固體培養基是1LMS基本培養基+蔗糖15g+瓊脂9g，PH值 5.8。嫁接後20-30天，將嫁接成活植株，自接口部位切開，去掉接口處0.5-lcm莖段(嫁接 部位)，將接穗和砧木分別接種在MS固體培養基中。嫁接具體操作流程見圖4。圖中，1 從中間劈開的砧木和契型接穗；2 接穗和砧木 的嫁接；3 接口的包裹；4 嫁接好的植株；5 嫁接植株的培養；6 嫁接成活的植株。對嫁接後的砧木和接穗葉片分別進行取樣提取DNA，進行ISSR和RAPD擴增，鑑定 品種間基因滲透。選用的ISSR引物和RAPD引物個5條，具體見表1.表1 =ISSR引物和RAPD引物
權利要求
一種促進甘薯種質資源間基因交流的方法，其特徵是通過甘薯組織培養獲得供體和受體植株；將供體和受體植株在離體、無菌條件下，進行無性嫁接，促使甘薯品種間基因滲透，創新甘薯種質，為甘薯種間及不同不親和群品種間基因交流，進而創新及豐富甘薯種質資源。
2.根據權利要求1所述的促進甘薯種質資源間基因交流的方法，其特徵是所述的通 過甘薯組織培養獲得供體和受體植株是通過莖尖分生組織培養基莖尖分生組織培養，再生 嫁接所需的供體和受體植株。
3.根據權利要求2所述的促進甘薯種質資源間基因交流的方法，其特徵是莖尖分生 組織培養基條件為1LMS基本培養基添加NAAO. lmg/L、6-BA2mg/L、蔗糖30g/L和瓊脂9g/ L，滅菌前PH值為5. 8-6. 0 ；培養條件為光照2000LUX，溫度25士2°C。
4.根據權利要求1所述的促進甘薯種質資源間基因交流的方法，其特徵是所述的供 體和受體植株在離體、無菌條件下進行無性嫁接，是將粗細程度相近的供體和受體植株，在 超淨工作檯即無菌條件下，切取接穗(受體)植株2-3節，切口呈契型；砧木(供體)材料去 所有葉片和萌發的腋芽，接口處從中間劈開，然後將接穗插入，用無菌Parafilm對嫁接傷 口進行包裹，完成嫁接的植株接種在MS固體培養基中，嫁接後20-30天，將嫁接成活植株， 自接口部位切開，去掉接口處0. 5-lcm莖段，將接穗和砧木分別接種在MS固體培養基中。
5.根據權利要求4所述的促進甘薯種質資源間基因交流的方法，其特徵是接口處從 中間劈開的深度為0. 5cm。
6.根據權利要求4所述的促進甘薯種質資源間基因交流的方法，其特徵是所述的MS 固體培養基是1LMS基本培養基+蔗糖15g+瓊脂9g，PH值5. 8。
全文摘要
本發明公開了一種促進甘薯種質資源間基因交流的方法，屬通過甘薯組織培養獲得供體和受體植株；將供體和受體植株在離體、無菌條件下，進行無性嫁接，促使甘薯品種間基因滲透，創新甘薯種質，為甘薯種間及不同不親和群品種間基因交流，進而創新及豐富甘薯種質資源。有益效果是本發明打破種間及不親和群品種間雜交障礙，為甘薯種質創新提供了新的技術方法，加快甘薯遺傳改良。該方法操作方便、快捷，不受季節限制。
文檔編號A01H4/00GK101933458SQ20101022840
公開日2011年1月5日 申請日期2010年7月5日 優先權日2010年7月5日
發明者史新敏, 周志林, 唐君, 曹清河, 趙冬蘭 申請人:江蘇徐州甘薯研究中心