一種抗原抗體複合物解離液試劑盒及應用的製作方法
2023-11-07 15:04:42 1
專利名稱：一種抗原抗體複合物解離液試劑盒及應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種檢測用試劑盒，尤其涉及一種血清或血漿樣本中的抗原抗體複合物解離液試劑盒及應用，屬於醫療檢測用試劑技術領域。
背景技術：
在機體感染病原體時，首先產生的是抗原，同時也產生少量的抗體。早期感染時 可檢測到抗原，隨著感染周期的延長，機體對病原體的免疫應答反應增強，抗體的量隨之增 力口，並與抗原相結合、形成抗原抗體複合物，致使抗原和抗體在血清或血漿中的濃度降低， 造成臨床上抗原或抗體檢測靈敏度大幅降低。因此，要提高待測樣本中的抗原或抗體檢測 靈敏度，是必要設法將結合的抗原抗體複合物進行解離。然而，檢索結果發現與檢測相關的 血清或血漿樣本中的抗原抗體複合物解離液試劑盒未見報導。
發明內容
針對現有技術的不足，本發明要解決的問題是提供一種血清或血漿樣本中的抗原 抗體複合物解離液試劑盒及應用。本發明所述抗原抗體複合物解離液試劑盒由如下體積百分比濃度的試劑等量混 合製成0. 3% Triton-XlOO1.5%十二烷基硫酸鈉1.5% 3-[(3_膽烷醯胺丙基)_ 二甲銨]丙磺酸。上述抗原抗體複合物解離液試劑盒的製備方法是將試劑盒組分中的試劑按設計 濃度量各配成水溶液，然後按等體積量混合在一起，取混合液按5ml量分裝入試劑瓶中。本發明所述抗原抗體複合物解離液試劑盒在病原體抗原抗體複合物分離中的應用。其中所述病原體抗原抗體複合物優選是指C肝病毒抗原抗體複合物、B肝病毒 抗原抗體複合物、A肝病毒抗原抗體複合物、愛滋病病毒抗原抗體複合物、甲型Hmi流感 病毒抗原抗體複合物或禽流感病毒抗原抗體複合物；最優選是指C肝病毒抗原抗體複合 物。傳統的方法在檢測病原體抗原或抗體時不能將抗原和抗體進行分離，大大影響了 檢測試劑盒的靈敏度。本發明提供的抗原抗體複合物解離液試劑盒有效實現了待檢測血清 或血漿樣本中病原抗原抗體複合物的迅速解離，提高了抗原和抗體的絕對濃度值，大大提 高了待測樣本的檢測靈敏度。本發明的抗原抗體複合物解離液試劑盒通用於各種病原體抗原抗體複合物的分 離，能夠實現對感染病原體後形成的抗原抗體進行快速分離，利於免疫的方法檢測，大大的 提高了各種病原體的檢出率，減少漏診率。
具體實施例方式實施例1本發明所述抗原抗體複合物解離液試劑盒的製備按體積百分比濃度量分別配製0.3% Triton-XlOO (曲拉通X-100)、1. 5%十二烷 基硫酸鈉(SDS)和1.5% 3-[(3_膽烷醯胺丙基)-二甲銨]丙磺酸(3-[(3-Ch0lamid0pr0 pyl)_dimethylammonio]propanesulfonic acid)的水溶液，然後按 1 1 1 體禾只量t昆合 在一起，取混合液按5ml量分裝入試劑瓶中，包裝製成試劑盒。實施例2本發明所述抗原抗體複合物解離液試劑盒在C肝病毒抗原抗體複合物分離中的 應用採用酶聯免疫方法檢測HCV核心抗原的試劑盒，能直接檢測血清或血漿中的游離 核心抗原，可縮短HCV病毒感染檢測的「窗口期」約40 50天，在核酸檢測技術查出HCV RNA之後1 2天，就可以檢測出HCV核心抗原的存在。然而在機體出現抗HCV抗體之後， 抗體與抗原相結合成複合物，測定游離HCV-cAg的酶聯免疫法的靈敏度明顯降低。若將抗 原與抗體相結合成複合物解離開後，檢測總HCV-cAg可大大提高檢測的靈敏度。上述C肝病毒抗原抗體複合物具體解離方法是1)取待測血清標本100 μ 1，加入本發明所述抗原抗體複合物解離液50 μ 1，混合 後56°C孵育30min，即對樣本進行預處理，充分解離樣本中的抗原抗體複合物，使核心區抗 原充分暴露；2)按照各HCV核心抗原試劑盒生產企業提供的產品操作說明書對步驟1)預處理 後的樣本進行實驗檢測，以試劑盒規定的可見光波長臨界OD值判斷標記的抗原或抗體檢 測結果。上述使用本發明所述抗原抗體複合物解離液對待測的血清或血漿樣本經56°C，30 分鐘處理後，抗原/抗體複合物解離釋放出所有抗原/抗體，樣本再加入被包被的單抗的酶 標板微孔中，如其中含有抗原，則會與酶標板上包被的抗體形成抗原_抗體結合物，經37°C 孵育後洗滌，再加入辣根過氧化物酶標記二抗，形成雙抗原夾心複合物，最後加入酶底物顯 色，在合適波長下測定光密度OD值，即可根據本試劑制定的cutoff臨界值判斷抗原陽性結^ ο與實施例2方法類似的，待測樣本中的B肝病毒抗原抗體複合物、A肝病毒抗原 抗體複合物、愛滋病病毒抗原抗體複合物、甲型Hmi流感病毒抗原抗體複合物或禽流感病 毒抗原抗體複合物均可以使用本發明所述抗原抗體複合物解離液對其經56°C，30分鐘處 理，使抗原/抗體複合物解離釋放出所有抗原/抗體，以提高待測樣本的檢測靈敏度。
權利要求
一種抗原抗體複合物解離液試劑盒，其特徵在於所述試劑盒由如下體積百分比濃度的試劑等量混合製成0.3％Triton-X1001.5％十二烷基硫酸鈉1.5％3-[(3-膽烷醯胺丙基)-二甲銨]丙磺酸。
2.權利要求1所述抗原抗體複合物解離液試劑盒在病原體抗原抗體複合物分離中的應用。
3.如權利要求2所述的應用，其特徵在於所述病原體抗原抗體複合物為C肝病毒抗 原抗體複合物、B肝病毒抗原抗體複合物、A肝病毒抗原抗體複合物、愛滋病病毒抗原抗體 複合物、甲型mm流感病毒抗原抗體複合物或禽流感病毒抗原抗體複合物。
4.如權利要求3所述的應用，其特徵在於所述病原體抗原抗體複合物為C肝病毒抗 原抗體複合物。
全文摘要
本發明公開了一種抗原抗體複合物解離液試劑盒，由體積百分比濃度0.3％Triton-X100、1.5％十二烷基硫酸鈉和1.5％3-[(3-膽烷醯胺丙基)-二甲銨]丙磺酸的試劑等量混合製成。本發明還公開了所述試劑盒在病原體抗原抗體複合物分離中的應用。本發明的試劑盒有效實現了待檢測血清或血漿樣本中病原抗原抗體複合物的迅速解離，提高了抗原和抗體的絕對濃度值，大大提高了待測樣本的檢測靈敏度。
文檔編號G01N33/569GK101832999SQ20101015945
公開日2010年9月15日 申請日期2010年4月29日 優先權日2010年4月29日
發明者丁興龍, 朱之煒, 朱翎嘉, 江長林, 鄭祖惠 申請人:山東萊博生物科技有限公司