氨基二酸親水色譜固定相及其製備方法
2023-12-07 04:15:26 1
氨基二酸親水色譜固定相及其製備方法
【專利摘要】本發明氨基二酸親水色譜固定相，其結構為： ；其製備方法包括：⑴矽膠表面引入末端炔基：①在有機溶劑中加入矽烷偶聯劑、丙炔胺；②加入活化的微球型矽膠；③反應、過濾、洗滌，得到固體物；④真空乾燥得到末端炔基矽膠；⑵用「連結化學」鍵合氨基二酸親水色譜固定相：①製備矽膠上炔基；②加入修飾有疊氮基團的氨基二酸及催化劑；③反應、過濾、洗滌，得到固體物；④真空乾燥得到氨基二酸親水色譜固定相。本發明採用「點擊化學」作為鍵合反應方法，可在溫和條件下實現高選擇性和高轉化率的固載，製備過程簡單，每個中間體結構明確；製備的氨基二酸親水色譜固定相作為極性固定相在親水作用液相色譜模式下能對強極性化合物進行高效分離。
【專利說明】氨基二酸親水色譜固定相及其製備方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及液相色譜固定相技術，具體的說，是一種使用"點擊化學"（Click chemistry)作為鍵合方法鍵合的氨基二酸親水色譜固定相及其製備方法。 技術背景
[0002] 親水作用色譜（HILIC)是近年來發展起來的用於分離強極性組分的色譜技術，是 一種以極性固定相(如矽膠或矽膠表面的結構修飾）以及含高濃度極性有機溶劑和低濃度 水溶液為流動相的色譜模式。親水作用色譜解決了傳統反相色譜疏水性固定相(如C18、C8 等）對強極性化合物(如核苷、頭孢、培南等）保留很弱，甚至無保留的問題。親水作用色譜 用於分離極性化合物(如胺基酸、肽和糖等）已有文獻報導。親水作用色譜的固定相依然是 使用正相固定相，主要是直接使用矽膠、氨基、醯胺基、二醇基、糖類等作為固定相，但是，不 同類型的固定相存在著不同的保留機制和分離性能，其中，有些類型的固定相存在一些較 大的缺點，例如：矽膠柱容易發生不可逆吸附現象；氨基柱會與糖類生成SchifT鹼；從而影 響分離。目前，專門為親水作用色譜開發的固定相剛剛起步，能商品化的親水作用色譜固定 相種類較少，因而需要開發其他類型的固定相來滿足親水作用色譜的發展要求。
[0003] "點擊化學"（Clickchemistry)，也有譯為"連結化學"、"動態組合化學"或"速 配接合組合式化學"，是由化學家巴裡?夏普萊斯（K.B.Sharpless)等人提出的一個合成概 念，其核心是：用少量簡單可靠和高選擇性的化學轉變來獲得更廣泛的分子多樣性。"點擊 化學"開創了快速、有效、甚至是100%可靠的、高選擇性地製造各類新化合物的合成化學新 領域，其中，最為廣泛應用的反應是Huisgenl，3-diploarcycloaddition反應，它在色譜 固定相的合成上發揮了非常重要的作用，其反應式為：
【權利要求】
1. 一種氨基二酸親水色譜固定相，其特徵在於，其結構為：
2. -種如權利要求1所述的氨基二酸親水色譜固定相的製備方法，使用"點擊化學"為 鍵合方法鍵合氨基二酸分子，包括以下步驟： (1) 矽膠表面引入末端炔基 ① 在有機溶劑中加入矽烷偶聯劑、丙炔胺，矽烷偶聯劑與丙炔胺的摩爾比為1? 5:1. 2?5,每克矽膠所需有機溶劑的量為5?30mL，於60?150°C條件下反應6?36小時； ② 加入活化的微球型矽膠，每克微球型矽膠所需的矽烷偶聯劑為1?IOmmol ; ③ 在80?120°C條件下繼續反應12?48小時，然後用砂芯漏鬥過濾，再依次用二氯 甲烷、甲醇和丙酮洗滌，得到固體物； ④ 將步驟（1)③得到的固體物置於真空乾燥箱中在40?80°C條件下乾燥6?12小 時，得到末端炔基矽膠； 其特徵在於： (2) 用"連結化學"鍵合氨基二酸親水色譜固定相 ① 將步驟（1)④得到的末端炔基矽膠加入體積比為2?10 : 1的水與甲醇的混合溶 劑中，每克炔基矽膠所需水與甲醇混合溶劑的量為20?50mL，得到矽膠上炔基； ② 加入修飾有疊氮基團的氨基二酸及催化劑：修飾有疊氮基團的氨基二酸加入的摩 爾劑量為步驟（2)①得到的矽膠上炔基的摩爾劑量的1?15倍；所述催化劑為二價銅與抗 壞血酸鈉的混合物或者一價銅鹽，所述催化劑的摩爾劑量分別為所述矽膠上炔基的摩爾劑 量：二價銅1?10%與抗壞血酸鈉2?40%混合，或者為一價銅鹽1%-10% ; ③ 在10?80°C條件下反應72?120小時，然後用砂芯漏鬥過濾，依次用水、重量濃度 為2?20%的EDTA二鈉水溶液、水、甲醇和丙酮洗漆，得到固體物； ④ 將步驟（2)③得到的固體物置於真空乾燥箱中在40?80°C條件下乾燥6?12小 時，得到目標產物--氨基二酸親水色譜固定相； 所述步驟（2)的反應式為：
3. 根據權利要求2所述的製備方法，其特徵在於，步驟（1)①採用的有機溶劑為 N，N-二甲基甲醯胺。
4. 根據權利要求2所述的製備方法，其特徵在於，步驟（1)①採用的矽烷偶聯劑的結構 為：
5. 根據權利要求2所述的製備方法，其特徵在於，步驟（1)②所使用的微球型矽膠為粒 徑和孔徑均勻的全多孔矽膠球狀體，其粒徑為5?40 m，孔徑為60?300 A。
6. 根據權利要求2所述的製備方法，其特徵在於，步驟（2)②加入的修飾有疊氮基團的 氨基二酸的結構為：
【文檔編號】B01J20/283GK104324707SQ201410471342
【公開日】2015年2月4日 申請日期:2014年9月16日 優先權日:2014年9月16日
【發明者】褚長虎, 殷偉, 柴惠惠, 程玲平, 郭瑞強, 劉仁華 申請人:華東理工大學